专利名称:Sod脐橙汁及其生产方法
技术领域
本发明属于食品加工领域。进一步说是一种SOD脐橙汁及其生产方法。技术背景
果汁作为软饮料,其市场前景十分看好,生产发展很快。资料统计表明,世界发达国家和地区人均年消费果汁由1990年的34.2Kg升到1999年地41.7Kg,发展中国家也由10.8Kg上升到13.2Kg,而我国在1999年的果汁消费为人均1Kg,远低于世界发展中国家的平均值。近20年来,世界柑桔的消费量已明显增长,尤其是柑桔的深加工明显扩大,如美国和巴西60%以上的柑桔用于深加工。开发具有保健功能的果汁饮料是目前市场的热点。
SOD酶是生物重要保护酶之一,能增强机体抗逆能力,防衰老。目前SOD酶主要用于医药、化妆品行业。由于SOD酶普遍存在于各种植物中,因此有关SOD酶的提取技术广见于报道,但迄今未发现利用微生物通过栽培方法开发出高含量的SOD农产品以及利用高含量的SOD农产品开发出果汁的报道。

发明内容
本发明的目的在于利用微生物开发出的脐橙专用SOD制剂;本发明的目的还在于用开发出的脐橙专用SOD制剂生产高含量SOD脐橙;本发明另一目的在于以及利用高含量的SOD脐橙经加工生产SOD脐橙汁。
SOD脐橙经选果、洗涤、榨汁、筛滤、贮罐、脱油脱气、均质、杀菌、保温钝化、包装等步骤即制得本发明的SOD脐橙汁。
以下叙述本发明的详细内容
1、脐橙专用SOD制剂的生产方法
一种微生物,它是蜡状芽孢杆菌,拉丁文为Bacillus cereus,它已保藏在中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC NO.0760和CGMCC NO.0761。
一种脐橙专用SOD制剂,该制剂含有保藏号为CGMCC NO.0760和/或CGMCC NO.0761的芽孢杆菌。
一种脐橙专用SOD制剂,该制剂含有保藏号为CGMCC NO.0760和/或CGMCC NO.0761的芽孢杆菌,其芽孢杆菌含量为2.5×1010cfu/g——3.5×1010cfu/g。
2、应用本发明SOD制剂生产SOD脐橙的方法
(1)树盘基施脐橙专用SOD制剂每棵结果脐橙树施用15-25克脐橙专用SOD制剂,将SOD制剂均匀撒在树盘内,然后使SOD制剂与树盘内的土充分混匀。
在中国脐橙产区,基施时间一般在2月下旬到3月上旬。
(2)树冠喷雾脐橙专用SOD制剂基施后的脐橙树每月中旬,收获前二个月每10-15天树冠喷雾脐橙专用SOD制剂,每次每亩用量为40-60g,全生产过程中喷次为10-12次。
在中国脐橙产区,从3月到9月,每月中旬喷一次SOD制剂1000倍液,每亩喷稀释液40-60千克;10月上旬和下旬各喷1次,11月上、中、下旬各喷1次,稀释液浓度和用量同前。从3月到11月共喷10-12次SOD制剂。
3、SOD脐橙汁的生产方法
将上述方法得到的SOD脐橙经选果、洗涤、榨汁、筛滤、贮罐、脱油脱气、均质、杀菌、保温钝化、包装等步骤即制得本发明的SOD脐橙汁。
本发明较已有技术相比具有如下典型优点
1、本发明脐橙专用SOD制剂施用到脐橙树上,其脐橙内的SOD耐热性好,在深加工和贮藏过程中不易失活。本发明的制剂用到脐橙上,通过芽孢杆菌在脐橙树体内繁殖、转移,提高脐橙体内的SOD活性和含量。本发明制剂产生的SOD酶有较强的耐温抗热性和抗逆能力,在70℃条件下处理1小时,酶活为原酶活的47%;100℃条件下处理30分钟,酶活为原酶活的37%;对臭氧、高温和高酸的耐性很强。
2、本发明的SOD制剂是由植物体内有益内生共生芽孢杆菌中制备而成,具有高度的安全性。
3、用本发明所述的方法可获得的高含SOD酶的脐橙汁除保持原有脐橙汁的优良品味,SOD含量明显提高,具有增强人体免疫力和延缓衰老的功效,SOD脐橙汁符合功能饮料的发展方向。实施方式
实施例1 脐橙专用SOD制剂生产方法
一、生产菌株蜡质芽孢杆菌CGMCC NO.0760和/或CGMCC NO.0761(QC1和/或QC2)。
二、生产工艺流程
QC1和QC2经液体深层发酵法制成粉剂,其主要生产步骤为原菌种活化、菌种扩大培养、种子罐培养、发酵罐培养、添加填充料、压滤、干燥、粉碎、粉剂质量检测、包装、产品检测等。本工艺为本领域技术人员公知的技术。
三、技术参数(见表1)
表1 本发明微生物制剂的技术参数
四、菌种生产操作规程
1、仪器设备和试剂无菌室或超净工作台、灭菌锅、试管、克氏瓶、冰箱、温箱。显微镜、NaOH、HCl、NaCl、牛肉膏、蛋白胨和琼脂等。
2、培养基制备按如下配方制备培养基牛肉膏0.3%,蛋白胨0.5%,NaCl0.5%,琼脂2%。将琼脂加热溶化后用NaOH或Hcl调PH值至7.0-7.5,然后分装克氏瓶或试管,置于灭菌锅内,在0.11MPa压力下灭菌30min,冷却后制成斜面备用。
3、菌种活化与扩大培养用培养基在无菌条件下从原菌种斜面上挑取少许菌苔,置放试管斜面内进行划线,然后置28-30℃温箱内培养24h,经检查无杂菌、菌体生长整齐,再置28-30℃温箱内培养24-28h,肉眼观察,菌苔丰满,涂片、染色检查无杂菌,芽孢大小一致的,可放冰箱中存放备用(4℃左右为宜)。
五、种子罐培养
1、培养基种子罐培养基配方豆饼粉O.5%、鱼粉0.3%、玉米粉0.5%、葡萄糖0.3%,豆油0.2%-0.3%(或泡敌0.3%)。
2、空发酵罐灭菌发酵罐在应用前清洗干净,排除污物,并在0.14MPa压力下,灭菌30min。
3、种子罐装料按照上述不上述种子罐培养基的配方比例装料,投料量不得超过罐容积70%。
4、种子罐灭菌装好料后,在0.11MPa压力下灭菌30min,冷却至30℃后即可接种。
5、悬浮液制备在无菌条件下将每个克氏瓶斜面菌种加100ml无菌水,把菌苔刮下制成孢子悬浮液,含菌量为10亿个菌体/ml,并在80℃恒温水锅中处理20min。
6、接种将制好的孢子悬浮液,在无菌条件下接种后,按1%的比例接种于冷却至30℃的种子罐内进行培养。
7、种子罐培养条件控制接种后在温度为28-30℃,压力0.05MPa通气量1∶1(每min体积比)和220转/min搅拌条件下,培养8-10h。
六、发酵罐发酵
1、发酵罐培养基配方豆饼粉2%,鱼粉0.5%,玉米浆1.8%,淀粉0.4%,硫酸镁0.06%,碳酸钙0.5%,磷酸二氢钾0.03%,豆油0.1%或泡敌0.05%,用NaOH或HCl调PH值7-7.5左右,装置为罐容积的70%。
2、发酵培养条件搅拌速度180-200转/min,罐压0.05MPa;通气量移种后4h内通气量有1∶0.7-0.8(每分钟进出体积之比),以后逐淅增大至1∶1。一般发酵培养周期为12-18小时,在芽孢70%形成,个别芽孢开始脱落时,即可放罐。
七、放罐指标芽孢含量>70% ②杂菌污染<0.3% ③含菌量>30亿个菌体/ml。
八、后处理操作规程
1、仪器设备搅拌机、板框、干燥机(装置)、超细度粉碎机等。
2、吸附剂一般采用的粒度为0.09mm的轻质碳酸钙为吸附填加剂,加入量按下列公式计算 发酵液体积×发酵液含菌量
吸附剂的量=------------------------×80%-1/2固体投料量
150亿/g
3、压滤按2规定加入吸附剂后,机械搅拌3-6h,使菌体和芽孢全部被吸附,然后再用板框压滤。
4、干燥将板框压滤后的滤饼捣碎后,置于烘干机或烘干装置内进行烘干,烘干温度不超过65℃,要不断翻动,使受热均匀。当含水率≤5%时,即可进行粉碎、包装。
5、粉碎利用高细度粉碎机粉碎,100%通过0.09mm孔径筛。
九、成品检验
检验标准。具体方法见粉剂标准;含水率用干燥失重法(重量法)测定,含水率≤5%为合格,细度采用湿筛法测定,100%通过0.09mm筛为合格,具体方法按HG2-896标准的湿筛法测定。
用上述方法制得的产品即为本发明的脐橙专用SOD制剂
实施例2 SOD脐橙的生产过程
生产地点中国重庆市奉节县
1.春季树盘基施每棵树施用20克脐橙专用SOD制剂,将SOD制剂均匀撒在树盘内,然后用耙使SOD制剂与树盘内的土充分混匀。时间在2月下旬到3月上旬。
2.树冠喷雾从3月到9月,每月中旬喷一次SOD制剂1000倍液,每亩喷稀释液50公斤;10月上旬和下旬各喷1次,11月上、中、下旬各喷1次,稀释液浓度和用量同前。从3月到11月共喷12次SOD制剂。
表2 SOD脐橙的质量标准
SOD的测定
SOD的测定方法采用NBT光化学法,具体如下
(1)设备752型分光光度计;台式离心机;光照培养箱;冰箱;10ml小烧杯等。
(2)试剂氯化硝基氮蓝四唑(NBT)——上海前进制剂厂生产
L-甲硫氨酸(L-Met)——上海康达氨基酸厂生产
乙二胺四乙酸(EDTA)——北京化工厂生产
核黄素(VB2)——北京西中化工厂生产
(3)反应液的配制
NBT反应液的制备配制pH7.8,50mmol/L的磷酸缓冲液1000ml,加入1.933mg的L-Met,待完全溶解后,放入45.8mg NBT,0.47mg核黄素(配成0.47mg/ml溶液,吸取1ml加入)和29.0mgEDTA,溶液终浓度Met为13mmol/L;NBT为6.3×10-3mmol/L;核黄素为1.3×10-3mmol/L;EDTA为0.1 mmol/L,置于棕色试剂瓶中,用黑布罩遮光,于4℃冰箱中可保存1个月。
(4)材料的预处理
脐橙果肉用研钵研碎,按照果肉∶50mM磷酸缓冲液=1∶2的比例加入缓冲液,10000rpm离心10分钟,取上清液进行SOD酶活测定。
(5)测定方法
吸取30μl样品,放入10ml透明玻璃小烧杯中,加入3mlNBT反应液,混匀,在28℃SOD光化反应室中,2×15W日光灯光照20分钟(光照为4000勒克司),在560nm处测定吸光度,以NBT反应液作空白对照,每组设3次重复,整个测定过程除光化反应外,均在避光或弱光条件下进行。同时测试过程中以美国"Sigma"公司、上海宝安公司的标准酶和贵州老来福药业公司生产的SOD口服液作为测试对照。
(6)计算
式中CK——空白对照透光度 n——样品稀释倍数A——样品透光度酶活单位IU/g
SOD脐橙中SOD酶活的测定
严格按照SOD脐橙的栽培生产过程,以仅用清水处理,不用SOD制剂处理为对照,其他栽培管理均一致。根据上述给出的SOD测定方法,测定SOD脐橙和对照脐橙的SOD酶活性(表3)。
由表3可知,SOD脐橙中SOD酶活显著高于普通脐橙,且在a=0.05水平差异显著,酶活提高136.1%。说明通过该项技术可以生产出具有高含SOD酶活的SOD保健脐橙。
表3 SOD脐橙的SOD活性测定
SOD脐橙中SOD的抗热性测定
严格按照SOD脐橙的栽培生产过程,以仅用清水处理,不用SOD制剂处理为对照,其他栽培管理均一致。根据已给出的SOD测定方法,只是将所测试的样品在100℃中保持20分钟,测定SOD脐橙和对照脐橙的SOD酶活性(表4)。
由表4可知,经过热处理后,SOD脐橙中仍保持较高的SOD酶活,但对照含有的SOD酶活极低。说明通过该项技术生产的SOD脐橙,适于在常温下保存和进行深加工,仍能保持较高的SOD活性。
表4 SOD脐橙中SOD的抗热性测定
实施例3SOD脐橙汁的生产方法
将上述方法得到的SOD脐橙经过下述处理可制得SOD脐橙汁。
1.选果洗涤原料果经选果(一般选φ70mm以下及残次果用于加工橙汁)后,进入一级果池浸泡40分钟,并冲入臭氧以清除果皮中的残留农药。经二级果池洗净后,再进入三级果池,经浮洗机洗涤后榨汁。
2.榨汁原料果经破碎机破碎进入果浆受槽。果浆经带式榨汁机榨汁后进入卧式螺旋沉降离心机粗滤,然后进入振动筛分过滤机精滤。精滤过的果汁经果汁受槽进入果汁贮罐并送至脱油脱气处理。
3.脱油脱气带皮取汁的甜橙汁,常含有较多的橙皮油,需进行真空脱油处理,脱油机类似小型真空蒸发器,果汁喷入真空度达680-700毫米汞柱的脱油机中,并被加热到51℃左右,多余的橙皮油被挥发随蒸汽逸出并冷凝,果汁中有3%-6%的水分被蒸发出来,冷凝液通过6000转/分钟离心机分离出橙皮油,留下的下层水回到果汁内。
脱气是除去果汁中的空气,其目的是减少或避免果汁中的色素、维生素及其它物质的氧化,避免果汁中悬浮粒吸附气体上浮,保持良好外观,减少装罐和杀菌时产生泡沫。由于真空脱油机可同时脱气,不需要另行用脱气机脱气处理。
4.均质经脱油脱气的果汁进入压力为25兆帕的均质机均质处理。
5.高温瞬间灭菌经均质后的果汁进入145℃高温瞬间杀菌器灭菌处理,145℃杀菌时间为5秒,迅速冷却至90℃-95℃。
6.包装上述处理后的SOD脐橙汁经冲瓶、罐装、封口、装箱、检测、包装等步骤即制得本发明的SOD脐橙汁产品。
(1)冲瓶
玻璃瓶使用消毒液冲洗后,再用90℃-100℃热水在4kg/m2压力下进行短时冲洗以进行补充消毒。本发明的消毒液为氯溶液。
(2)罐装
橙汁温度在90℃-95℃进行罐装,瓶内真空度<70cm汞柱。
(3)封口
(4)装箱
罐装并封好口的果汁,经90℃的热水喷淋冲洗干净,任其自然冷却,即装入周转箱,送入恒温室。
(5)检测
恒温35℃存放5天,经抽检无涨罐等不合格产品即进行贴标和包装。
(6)贴标和包装
SOD脐橙汁的外观指标
橙黄色悬浮状汁液,允许有少量果汁沉淀。不允许有外来杂质和悬浮物。
表5 SOD脐橙汁的理化指标
SOD脐橙汁的卫生指标参照GB2759.2《碳酸饮料卫生标准》执行。
SOD脐橙汁的标识符合GB7718《食品标签通用标准》的规定。
SOD的测定SOD的测定方法采用NBT光化学法,(同前)。
权利要求
1、一种微生物,其特征在于保藏号为CGMCC NO.0760CGMCC NO.0761。
2、一种脐橙专用SOD制剂,其特征在于该制剂含有权利要求1中所述的微生物。
3、根据权利要求2所述的SOD制剂,其特征在于所述微生物含量为2.5×1010cfu/g-3.5×1010cfu/g。
4、一种应用权利要求2所述的脐橙专用SOD制剂生产SOD脐橙的方法,其特征在于下述步骤
(1)树盘基施脐橙专用SOD制剂,每棵结果脐橙施用15-25
克脐橙专用SOD制剂,将SOD制剂均匀撒在树盘内,
然后使用SOD制剂与树盘内的土充分混匀。
(2)树冠喷雾脐橙专用SOD制剂,基施后的脐橙树每月中
旬,收获前二个月每10-15天树冠喷雾脐橙专用SOD
制剂,每亩每次用量为40-60g,全生产过程中喷次为
10-12次。
5、一种SOD脐橙汁的生产方法,其特征在于其原理采用权利要求3所述方法生产的脐橙。
全文摘要
本发明属于食品加工领域。本发明公开了一种微生物及其用该微生物生产脐橙专用SOD制剂的方法,本发明还提供了一种利用脐橙专用SOD制剂生产SOD脐橙的方法以及利用SOD脐橙生产SOD脐橙汁的方法。试验证明,利用本发明可开发出品质优、SOD酶含量高的脐橙汁。
文档编号A01N63/04GK1397637SQ02124268
公开日2003年2月19日 申请日期2002年7月15日 优先权日2002年7月15日
发明者王 琦, 李维宁, 宋庆生 申请人:北京金绿维科技发展有限公司
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