专利名称：一种微生物农药及其制备方法
技术领域：
本发明属于微生物发酵工程技术领域，涉及一种微生物农药及其生产方法。
背景技术：
病虫害每年给农业生产造成巨大损失，为了实现稳产高产，人们一直主要采用化学农药给予控制。化学农药具有防效高、速度快、杀虫抗菌谱广、成本低、使用简单等优点，因而得到了迅速发展，并成为防治病虫害夺取农业生产丰收的一个重要手段。据统计，我国1985～2002年间化学防治面积占总防治面积的比率高达95％左右。由于化学农药的长期、大量和反复使用，带来了对土壤、水体和大气的污染；农副产品中农药残留增加，也直接危害了人类的健康及生存；同时，害虫和病菌的抗药性不断加深和扩大，全世界至少已有504种害虫对农药产生了抗性，有的害虫抗性高达几万倍；此外，化学农药在杀灭害虫的同时，也杀伤了天敌及其它有益生物，破坏了生态平衡，引起害虫更加猖獗。这样，不得不加大农药的施用量和频度，从而造成化学农药应用的恶性循环。对于人地关系非常紧张的地区，其唯一出路是大力发展生物农药。
发明内容
本发明目的是要克服现有农药的缺点，提供一种微生物农药及其生产方法，这种农药具有高效、安全、无公害和生产成本低等特点。
该微生物农药，其活性菌株(有效成份)是苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种(Bacillustharingensis subsp.morrisoni)的新菌株Ba9808-2-3，防治对象是鞘翅目瓢虫科害虫酸浆瓢虫、叶甲科害虫小猿叶虫和黄条跳甲等。
该微生物农药的制备方法如下1.活性菌株鉴定菌株Ba9808-2-3血清型为H8a8b.通过形态学特征鉴定，营养体是能产生芽孢的直杆状菌体细胞，菌端稍园，大小1.1～1.5微米×2.8～4.5微米，菌体周身鞭毛，运动，革兰氏染色阳性。经生化反应测定、鞭毛抗原分析、菌体抗原分析、酯酶电泳图分析等鉴定对比，均与苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种相似。但在某些形态特征等方面又有明显不同，在生长繁殖过程中，伴孢晶体在孢子囊中形成时不易看到，是该菌株一个重要特征；且释放后的伴孢晶体不规则，近小正方形，大小0.5～0.6×0.7微米；菌落形态，乳白色、小、圆、边缘光滑。该菌株的毒杀对象也有特殊性，主要为鞘翅目瓢虫科害虫酸浆瓢虫、叶甲科害虫小猿叶虫和黄条跳甲等。故Ba9808-2-3菌株为苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种(Bacillus tharingensis subsp.morrisoni)新菌株。
2.制备工艺(1)生产菌种本发明所用的微生物菌种为苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种新菌株Ba9808-2-3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC No0920，保藏日期为2003年4月6日。
(2)培养基培养基中的营养源采用碳源和氮源。其中碳源可为淀粉、糊精、葡萄糖、饴糖等；氮源可为蛋白胨、黄豆饼粉、牛肉膏、玉米浆等。在此基础上再添加一些其它营养成份，如食盐、磷酸盐、钾盐、钙盐等。
(3)培养方法本发明所述的微生物农药，可通过液体深层发酵方法培养。培养温度为27～30℃，PH7～9，培养时间为25～40小时。
(4)产品后处理培养液调制成一定的含孢量，再添加适量的防腐剂、乳化剂及紫外保护剂等即为产品。
具体工艺流程见说明书附图。
3.杀虫谱将产品稀释成含孢量106cfu/ml的溶液，进行杀虫谱试验，结果见表1。从表1可以看出，对蔬菜上的重要鞘翅目害虫小猿叶虫、酸浆瓢虫及黄条跳甲的低龄幼虫具有强毒性，采用106cfu/ml的溶液，三天后校正死亡率均为100％。
表1为本微生物浓药的杀虫谱测定供试 处理对照 校正死亡昆虫 死虫 死亡率 死虫死亡率 率数 /％数 /％叶甲科Chrysomelidae小猿叶虫 45 1003 6.7 100黄条跳甲 45 1001 2.2 100象甲科Curculionidae稻水象甲 16 33.3 5 11.1 25.0玉米象 16 35.6 2 4.4 32.6瓢虫科Coccinellidae酸浆瓢虫 45 1004 8.9 100长蠹科Bostrychidae谷蠹 19 42.2 5 11.1 35.0拟步行虫科Tenebrionidae赤拟谷盗 18 40.0 3 6.7 35.7注供试虫数处理和对照均为45头本发明的优点1.特效早期苏云金芽孢杆菌制剂大部分是杀鳞翅目害虫的，近年来报导和开发了一些杀鞘翅目等其它害虫的制剂，但对酸浆瓢虫和黄条跳甲这二种蔬菜重要害虫有强毒性的苏云金芽孢杆菌制剂未见报导。
2.安全杀虫作用通过晶体蛋白实现，该蛋白系毒素原，本身无毒性，采食后先被昆虫肠道中的强碱性(PH9-10)消化液消化，打开晶体结构，然后被肠道中的活化酶分解形成毒蛋白(毒肽)，作用于中肠细胞。人和哺乳动物消化液不具强碱性，天敌及水生动物没有害虫具有的专一性活化酶，均不能使晶体蛋白活化。所以该制剂对人、畜、昆虫天敌及水生动物是非常安全的。
3.价廉产生菌产孢量高，生产原料均为普通农副产品，简单易得，适于大规模工业化生产，而且生产设备可与其它微生物产品通用，因而成本较低。
附图为工艺流程示意图
具体实施例方式
实施例一含孢量100亿/ml本农药制剂的制备在70L发酵罐中，按黄豆饼粉2.5％、番薯淀粉锈1.0％、葡萄糖1.0％、硫酸镁0.05％、碳酸钙0.5％配成50L培养基。按常规方法灭菌后冷却至30℃，按5％比例接种生产菌种，经30℃±1通气培养30小时，即得含孢量62亿/ml的发酵液。该发酵液经沉淀浓缩后稀释成含孢量100亿/ml的悬液，再加0.1％苯甲酸钠作防腐剂，10％皂素作乳化剂，即得产品。该产品含孢量＞100亿/ml，悬浮率60-90％，PH4.5-6.0，细度为95％过100目筛，孢晶比1∶0.5。
实施例二应用本微生物农药制剂防治茄子酸浆瓢虫应用试验试验在浙江宁波某地进行，采用其100亿/ml制剂200倍稀释液，化学农药对照为50％辛硫磷乳油3000倍稀释液，另设清水空白对照，共3个处理。每处理面积15m2，各重复4次，随机排列。喷药后7天调查，每处理查10个点，每点查10株，统计虫口基数，计算防治效果，结果见表2。由表2可知，100亿/ml本制剂200倍稀释液对酸浆瓢虫的田间防治效果为60.0％，与化学农药辛硫磷乳油3000倍稀释液效果相近。
表2为本微生物农药制剂对茄子酸浆瓢虫的田间防治效果稀释 药前虫口基数/10株7天后虫口基数/10株处理防治效果倍数 幼虫卵成虫 幼虫卵成虫本微生物农1∶200 20 155 7 5 4 60.0％药1∶300028 9 5 8 5 2 64.3％辛硫磷清水 / 45 162 45 0 10/
权利要求
1.一种微生物农药，其特征在于活性菌株为苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种新菌株Ba9808-2-3。
2.一种专用于权利要求1所述微生物农药的制备方法，采用微生物发酵技术生产，其制备工艺的特征步骤如下(1)生产菌种本发明所用的微生物菌种为苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种新菌株Ba9808-2-3；(2)培养基培养基中的营养源采用碳源和氮源，其中碳源可为淀粉、糊精、葡萄糖、饴糖等；氮源可为蛋白胨、黄豆饼粉、牛肉膏、玉米浆等，在此基础上再添加一些其它营养成份，如食盐、磷酸盐、钾盐、钙盐等；(3)培养方法本发明所述的微生物农药，可通过液体深层发酵方法培养，培养温度为27～30℃，PH7～9，培养时间为25～40小时；(4)产品后处理培养液调制成一定的含孢量，再添加适量的防腐剂、乳化剂及紫外保护剂等即为产品。
全文摘要
一种微生物农药及其制备方法，其特征是该微生物农药的活性菌株是苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种的新菌株Ba9808－2－3；其制备工艺为(1)生产菌种本发明所用的微生物菌种为苏云金芽孢杆菌莫里逊亚种新菌株Ba9008－2－3。(2)培养基营养源采用碳源和氮源。其中碳源可为淀粉、糊精、葡萄糖、饴糖等；氮源可为蛋白胨、黄豆饼粉、牛肉膏、玉米浆等。在此基础上再添加一些其它营养成分，如食盐、磷酸盐、钾盐、钙盐等。(3)培养方法本发明所述的微生物农药，可通过液体深层发酵方法培养。培养温度为27～30℃，pH7～9，培养时间为25～40小时。(4)产品后处理；培养液调制成一定的含孢量，再添加适量的防腐剂、乳化剂及紫外保护剂等即为产品。它是一种无公害的农用杀虫剂，对蔬菜生产上的重要害虫酸浆瓢虫、黄条跳甲及小猿叶虫等有特效。
文档编号A01N63/00GK1513327SQ0311643
公开日2004年7月21日 申请日期2003年4月14日 优先权日2003年4月14日
发明者施跃峰, 竺利红, 李孝辉, 吴吉安, 桑金隆 申请人:浙江省农业科学院