专利名称：一种淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法
技术领域：
本发明涉及一种淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法。
背景技术：
淡水鲨鱼学名为苏氏圆腹鱼(Pang sing、sutchi)。属于鱼科， 种，主要分布于东南亚一带，是泰国、马来西亚等地的优良淡水养殖鱼类，目前我国引进的品种体色为白鲨和蓝鲨。该鱼体表面光滑无鳞，体形长而侧扁，具有第二脂鳍，为热带鱼类，适温范围为12-36℃，生长最适水温为22-32℃。由于具有食性杂、生长快、耐低氧，病害少、产量高，适应性强等优点，加之肌间刺少，肉质细嫩、鲜美，营养价值高等特点，养殖一年个体可达1-2千克，较大的可达2-3千克，因而具有广泛的推广养殖价值。但推广这条鱼苗种主要靠进口，大大提高了养殖成本，而且受到一定的局限性，到目前为止，国内还没有关于该鱼人工繁殖成功的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法。
本发明的技术方案是一种淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，主要包括下列步骤，(1)亲鱼来源 1999年7月份从马来西亚引进的3cm苗种5000尾，当年养成商品鱼，一部分上市，部分留做亲鱼，截止2001年1O月份，亲鱼平均个体达3.5-4千克，最大个体达5.5千克。
(2)亲鱼培育 亲鱼培育地为50米2水泥池，水深1.7米，保持水质清新，水的溶氧较高，应保持在4-6mgO2/L；PH6.8-7.4；水温保持在12-36℃，饲料喂养保证新鲜，不变质，产前培育除配制的专用亲鱼饲料外，另再加部分麦芽，新鲜野杂鱼等，以促进亲鱼的性腺发育。
(3)人工催产 3-11月份进行人工催产，操作形式采用挑选成熟的亲鱼，催产后放于一个50米2的水泥池或网箱中，进行流水刺激；催产形式采用二针注射，第一针为总剂量的1/3，第二针剩余量，个别发育不好的再补3-4针；人工受精采用干法受精，挤出的卵呈圆球形，浅黄色，具有粘性，卵径大约0.95-1mm，产卵量3.5-5.5千克的亲鱼每次产卵在650-1500g之间；催产药物采用催产合剂。注射后流水刺激，观察繁殖行为，纪录效应时间，产卵后粘于网片和棕片上进行流水孵化。
(4)孵化 采用流水池进行孵化，孵化时用水药棉过滤，在水温27-32℃的情况下大约需要18-22小时破膜，破膜后的幼体呈上下串动，很活跃，刚破膜仔鱼呈透明状，个体很小，长度大约1.7-2mm，幼鱼经48-56小时开始逐渐平游，待大部分鱼体平游后开始投喂蛋黄和奶粉。
(5)苗种培育 鱼苗孵出后第二天即开始平游，到第三天仔鱼的腹部卵黄便会吸收完毕，仔鱼开口摄食，此时应及时投喂适口饲料，由于鱼体个体太小，投喂方法第一次开口料为蛋黄和奶料，随后逐渐开始投加丰年虫，每天投喂六次，经18-20天的精心培育当苗种长到2-3cm，即可转池或出售。
还包括下列步骤(6)催熟处理亲鱼在催产前一月进行一次催熟处理，具体方法为用花生油加热后，再加促排卵2号(LKH-A2)2.5微克/千克，进行研磨制成乳剂，乳化后肌肉注射，部位在第一背鳍下侧肌肉注射，每尾注射2-3毫升。
所述步骤(2)中养鱼池的水质调配要求是井水2/3，纯净水1/3。
所述步骤(2)中的专用亲鱼饲料为鲨A-I号，其50000克中的主要原料为鱼粉15000克、豆粕23000克、麸皮7000克，米糠3500克、磷酸氢钙1000克、盐500克、维生素E。
所述步骤(3)中的催产合剂是催鲨-A号，它由脑垂体PG、绒毛膜促性腺激素HCG、促排卵2号LRH--A2组成，其配比为每千克鱼苗需PG 2-5个，LRH--A2 6-10微克，HCG 400-600国际单位。
所述步骤(2)中的最佳水温保持在22-32℃试验结果经过一年多的试验，基本达到了我们的试验目的。无论是亲鱼培育、人工催产孵化，苗种培育均都达到了较好的生产性水平，亲鱼培育成熟率达85％，催产率达96％以上，孵化率达60-80％，从而已验证了该项技术工艺的可靠性和稳定性，总结出了一套完整的系统的人工繁殖技术资料，使淡水鲨鱼在国内人工繁殖及育苗技术得到突破。共计催产亲鱼52批，累计孵化水花1980.5多万尾。培育后推广到河北、河南、北京、天津等地。
具体实施例方式
为解决人工繁殖问题，我们在养殖的基础上，于2001所10月份开始对淡水鲨鱼探讨性的人工繁殖试验，经先后一年多的反复试验、论证，取得了成功，共计催产52批，累计孵化水花1980.5万尾，培育2-3cm苗种29.8万尾。现将亲鱼培育、人工催产、苗种培育的试验情况报告如下一、材料与方法1、亲鱼来源1999年7月份从国外引进3cm苗种5000尾，当年养成商品鱼，一部分上市，部分留做亲鱼，截止2001年10月份，亲鱼平均个体达3.5-4千克，最大个体达5.5千克。
2、亲鱼培育及管理亲鱼培育地为50米2水泥池，水深1.7米，由于是电厂热水，水质较好，水的硬度为8-9，水体交换量很大，溶氧也较高，时常能保持在4-6mgO2/L；PH7.2-7.4；水温保持在27-34℃。饲料喂养保证新鲜，不变质，产前培育除配制的专用饲料外，另再加部分麦芽，新鲜野杂鱼等，以促进亲鱼的性腺发育。
3、雌、雄鉴别亲鱼在繁殖季节，成熟的亲鱼外部形态、特征比较明显，雌鱼腹部膨大，松弱，卵巢轮廓明显，生殖孔扩张、红润、圆纯，雄鱼轻挤生殖孔有成熟乳白色精液流出。另雄鱼比雌鱼早成熟一年，该批鱼雄鱼在2000年3月份就能挤出精液，而在解剖雌鱼几次卵巢均在III期初，加强培育均无进展，直到2001年的10月份再次检查卵巢时，已达生理成熟期，卵粒明显游离，即开始准备催产。
4、人工催产(1)催产时间催产时间是从2001年8月17号开始到11月4号结束，2002年3月30号开始到11月底结束，具体催产情况见附表一。
(2)催产方法因属探讨性的摸索试验，没有可参考和借助的催产模式，所以在试验期间做了大量的实验工作和催产形式的摸索，每组一个剂量、每批一个催产药物组合，每做一批都认真观察每组鱼性腺变化情况以及性腺对药物的敏感程度。操作形式采用挑选成熟的亲鱼，催产后放于一个50米2的水泥池或网箱中，进行流水刺激；催产形式采用二针注射，第一针为总剂量的1/3，第二针剩余量，个别发育不好的再补3-4针；人工受精采用干法受精，挤出的卵呈圆球形，浅黄色，具有粘性，卵径大约0.95-1mm，产卵量3.5-5.5千克的亲鱼每次产卵在650-1500g之间；催产药物采用催产合剂。注射后流水刺激，观察繁殖行为，纪录效应时间，产卵后粘于网片和棕片上进行流水孵化。
5、孵化孵化采用本场50米2流水池进行孵化，孵化用水药棉过滤，在水温27-32℃的情况下大约需要18-22小时破膜，破膜后的幼体呈上下串动，很活跃，刚破膜仔鱼呈透明状，个体很小，长度大约1.7-2mm。由于孵化经验的不足，前期孵化率仅有10-40％；随着批数的增加，操作的熟练，使得后期孵化率增加到60-80％；孵化水深30-40cm，孵出仔鱼后逐渐增加到60cm左右，幼鱼经48-56小时开始逐渐平游，待大部分鱼体平游后开始投喂蛋黄和奶粉。
6、苗种培育鱼苗孵出后第二天即开始平游，到第三天仔鱼的腹部卵黄便会吸收完毕，仔鱼开口摄食，此时应及时投喂适口饲料，由于鱼体个体太小，投喂方法我们第一次开口料为蛋黄和奶料，随后逐渐开始投加丰年虫，每天投喂六次，具体时间分别为8时、12时、14时、18时、22时、2时，尽管如此，仔鱼从孵出的第四天开始便相互残杀，一直到第10天苗种长到1cm左右后才有好转，经18-20天的精心培育苗种可长到2-3cm，即可转池或出售。
二、试验结果经过一年多的试验，基本达到了我们的试验目的。无论是亲鱼培育、人工催产孵化，苗种培育均都达到了较好的生产性水平，亲鱼培育成熟率达85％，催产率达96％以上，孵化率达60-80％，从而已验证了该项技术工艺的可靠性和稳定性，总结出了一套完整的系统的人工繁殖技术资料，使淡水鲨鱼在国内人工繁殖及育苗技术得到突破。共计催产亲鱼52批，累计孵化水花1980.5多万尾。培育后推广到河北、河南、北京、天津等地。
亲鱼培育试验报告亲鱼培育是人工繁殖的首要工作，对提高产卵率、受精率、孵化率、减少鱼苗培育过程中的死亡率等都有直接的影响。所以，亲鱼培育工作是淡水鲨鱼人工繁殖的关键所在，必须做到严抓细管，加强饲养，把好饲料质量关，为亲鱼创造一个良好的生活环境，使之做到最好。该批亲鱼是1999年7月份从马来西亚引进的2-3cm的苗种自己培养的，截止2001年8月份，亲鱼平均个体已达到3.5-4千克，最大个体5.5千克。早在2000年3月份雄鱼已成熟，雌鱼解剖卵巢均在III期初，已具备亲鱼条件，且必须加强培育，创造条件尽快促进性腺发育，现将具体的亲鱼培育情况报告如下一、亲鱼池条件1、亲鱼培育池为50米2的水泥池，水深1.7米。
2、水源条件水源为电厂循环热水，水体交换量大，水质较好，PH7.2-7.4，硬度5.5-9；溶氧时常能保持在4-6mgO2/L以上，水温控制在27-34℃。
二、亲鱼放养模式与密度1、亲鱼放养模式与雌雄混养。
2、亲鱼放养密度为50平方米投放亲鱼420尾，即每立方米水体8.4尾，鱼体重为每立方米33.6千克，总体鱼重量为1680千克。
三、饲料与投喂饲料是培育亲鱼的物质基础，满足鱼体所需的营养要求，将对其性腺发育起到决定性作用。培育亲鱼使用的饲料配方为鲨A-I号，其主要原料为鱼粉、豆粕、麸皮、盐、米糠、磷酸氢钙及添加剂等，含粗蛋白34.8％，动物蛋白占30-40％，另在产前两个月再添加部分麦芽、新鲜野杂鱼等，对亲鱼进行强化培育。投饲量为鱼体重的3-4％，每天投喂三次，分别为上午8时，中午12时、下午18时，通过上述精心管理，严把饲料质量关，使亲鱼性腺发育良好，性腺成熟率达90％以上，达到了预期目的。
四、亲鱼池的管理与防病1、亲鱼池的管理，必须做到昼夜巡塘，一是控制好水温，不能使水温过高或过低，二是不能让亲鱼池出现缺氧，一旦遇到特殊情况发生缺氧，马上开动氧气泵进行充气。
2、做好防病亲鱼池定期做好防病工作。我们始终坚持每半月用二氧化氯0.5-1ppm进行消毒一次；每月用敌鱼虫0.5-1ppm进行全池泼洒一次，防治寄生虫病的发生。
五、亲鱼成熟度的鉴别成熟的亲鱼从外形上很好鉴别，雄鱼体形较小，腹部没什么变化，而雌鱼体形较大，腹部变化较大，腹部膨大而圆。从生殖器官也很好鉴别雄鱼生殖器类似乳头状，肥厚而突起，膨胀而僵硬；雌鱼生殖器类似圆形，通常微红扩张，卵巢轮廓明显，腹部向上抬起有跳动现象。在选择做催产亲鱼时，一般雌鱼腹部膨大，生殖孔红润开放者，催产率能达到100％。
六、催熟处理亲鱼在催产前一月进行一次催熟处理，具体方法为用花生油加热后，再加促排卵2号(LKH-A2)2.5微克/千克，进行研磨制成乳剂，乳化后肌肉注射，部位在第一背鳍下侧肌肉注射，每尾注射2-3毫升。
高密度集约化孵化与胚胎发育和育苗试验报告淡水鲨鱼人工繁殖虽已取得成功，获得了大量的受精卵。但受精卵需要在一定的环境条件下，才有可能完成胚胎发育，孵化出正常鱼苗。两年来，我们进行了大量的探索和试验研究，寻求解决鲨鱼人工繁殖孵化最佳工艺和技术，并完整解决了这一难题，从而使淡水鲨鱼技术全面完成。
两年来，采用高密度集约化孵化技术，已孵化仔鱼1980.5万尾，其中白鲨鱼苗1450万尾，蓝鲨530.5万尾，孵化率已达60-80％，增育2-3cm鲨鱼苗29.8万尾。
该项技术主要包括孵化用水的调制、高密度集约化孵化设施的研究、孵化技术、胚胎发育和苗种培育等四个部分。
(一)孵化用水的调制淡水鲨鱼孵化对水质要求比较严格，特别对水的硬度、酸碱度、清新度。在此期间做出大量的试验对比工作，因试验场地为电厂循环水水源，经严格过滤，孵化才能成功，用纯井水、硬度、酸碱度太高孵化同样不成。在这样情况下，我们想到了用纯净水与井水去调节水质，在鱼缸中一批鱼卵分成几个比例组合逐渐摸索，使之找出一条既经济又能孵化出仔鱼的水质组合，通过反复试验论证，水质组合为井水2/3，纯净水1/3，难题得到了解决，为批量生产鲨鱼苗得到实现打下了基础。
(二)高密度集约化孵化设施及孵化技术1、孵化设备水泥池，面积(7米×7米)49米2，加水30-40cm，水体约15米3。
2、充气设备利用空气压缩泵(空气流量60升/分，压力0.15千克/厘米)。
3、供热设备电加水，用电热棒2个(每个为2500W)，水温控制在27-30℃，用棚布把水泥池覆盖保持室温。
4、水质净化用太空棉分三层过滤。
(三)孵化技术及工艺1、采用高密度静水充气法，49米2水泥池，加水15米3，用气头12个。
2、受精卵为粘性卵，待充分受精后，均匀泼洒于自制的长方型钢筋架网布上，均匀摆放。
3、放卵前，孵化用水充分曝气，放卵后5-6小时检查受精率，整个孵化过程溶氧保证在4-6mgO2/L以上。PH值6.8-7.4。水的硬度为8-9。
4、放卵密度，每个板块放卵5-10万粒(板块的规格为30-150cm)。
5、孵化水温26-32℃，以27-30℃最宜。
6、受精率高，质量好的卵在孵化过程中不需换水，但受精率低，卵质较差的卵在孵化过程、因坏卵多、中间破膜多、易造成水质恶化，所以要及时补充新水，以防因水质氨氮高而影响孵化效果，一定要注意观察。
四、胚胎发育及苗种培育(一)胚胎发育淡水鲨鱼体形较大，但卵粒较小，卵径为1-1.2mm，卵中有8-12个小油球，透明，水温在27-30℃，胚胎发育18-22小时完成。(因受条件及设备的限制，鲨鱼的胚胎发育分期表及胚胎发育图谱未能完成，有待以后有条件时再弥补)。
(二)苗种培育刚孵化出的仔鱼全长为1.7-2mm，经48-56小时仔鱼大部分开始平游，在此要及时投喂适口饵料。第一天开口投喂蛋黄和奶粉，从第二天开始投喂人工孵化的丰年虫或轮虫，每天投喂5-6次，以充足的饵料促使鱼体快速生长。从投饵开始逐渐增加冲水，我们采用的是以纯井水加温至27-30℃时昼夜加水，始终保持池水新鲜，从而达到在培苗期间尽量减少疾病发生的目的。
据观察，仔鱼从孵出第四天开始出现相互残杀的现象，并且相当严重，饵料充足也控制不住，一至到1cm时才明显减少。但在鱼体0.6-0.8cm时，也就是仔鱼的第7-8天是个死亡高峰。
经10-20天的精心培育，鱼体可长2-3cm，在此要及时分池暂养，煅炼，可上市出售或转入成鱼养殖。
2-3cm的鲨鱼苗可以吃料沫，但要求蛋白比较高的饲料(粗蛋白要求达到32以上)。如鲤鱼小鱼料或鮰鱼小鱼料、甲鱼成鱼料等。在此期间，水温在27-32℃之间生长速度非常快，经一个朋精心培育，鱼体全长可达10cm以上。
通过2002年的苗种推广，成活率普遍反映很高，大部分都在60-85％以上。毕竟是在国内繁殖的苗种，气候及地理条件适宜，与国外进来的苗种成活率提高了几倍到十几倍。该项技术研究均已达到了我们试验的预期目的。
催产技术试验报告采用外源药理学方法，使鲨鱼在电厂热水池这个小环境中，克服种种不利因素，创造并完全替代自然环境习性，达到雌雄鱼卵巢精巢性成熟。但在人工繁殖中仍存在排卵机制的障碍，同时由于国内与东南亚一带环境条件有很大差异，因此仍需要研究有效的人工催产技术，才有可能获得催产成功和大量的受精卵。
本研究从2001年-2002年两年进行各种方案试验，筛选出各种生理论证重复试验，获得稳定效果，催产率达96％以上，达到了较好的生产性水平。
(一)亲鱼的成熟度鉴别淡水鲨鱼3-4龄可自然达到性成熟，其雄鱼提早一个成熟。雌鱼实验组达到成熟时其外观形态特征腹部膨大柔软，富有弹性，卵巢轮廓明显，生殖孔开放发红。
成熟的卵母细胞呈米黄色或杏黄色，卵粒在水中分散，但属粘性卵。
(二)人工催产技术前已阐述，成熟的淡水鲨鱼在自然条件下，没有特定的环境不会自然产卵，在人工催产中我们采用外源药理学的方法来达到产卵的目的。
1、催产药物试验2001-2002年共催产52组，以纯药理学催产药物“催鲨-A”它由脑垂体PG、绒毛膜促性腺激素HCG、促排卵2号LRH--A2组成，其配比为每千克鱼苗需PG 2-5个，LRH--A2 6-10微克，HCG 400-600国际单位。经反复催产试验论证，从中筛选出一组最佳催产方案，使之催产率达96％以上，具体催产情况见表一。
2、注射方法(1)、腹腔注射(2)、雌、雄比例1∶1(3)、两针注射第一针1/3剂量 第二针2/3余量(4)、注射针距12小时(5)、效应时间8-10小时详见表二。
(三)卵子成熟时间水温27-34℃时，卵母细胞从滤泡膜排出，在卵巢腔中保持受精能力约1.2-2小时。
(四)人工受精人工受精采用干法，效应时间一到要特别注意，每半小时检查一次，当卵能挤出后尽快进行镜检，达到受精时间一定要抓紧，不然错过受精时间就会影响受精率。卵子成熟后，用金属脸盆、先挤卵，然后挤入精液，完成受精时用羽毛轻轻搅拌均匀泼洒在棕片网布上，即可转入孵化阶段。
受精卵吸水后卵径在1-1.2mm，卵子内集中有8-12个小油球。如卵子中央完全透亮即就失去了受精时间，6小时后全部为白卵。
淡水鲨鱼人工催产试验情况表表一 注产卵量指平均每尾产卵g数。11月2号两组鱼为4月份催产用过的亲鱼当年又发育成熟的。
人工催产技术试验表表二
权利要求
1.一种淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，其特征是主要包括下列步骤，(1)亲鱼来源 1999年7月份从马来西亚引进的3cm苗种5000尾，当年养成商品鱼，一部分上市，部分留做亲鱼，截止2001年10月份，亲鱼平均个体达3.5-4千克，最大个体达5.5千克。(2)亲鱼培育 亲鱼培育地为50米2水泥池，水深1.7米，保持水质清新，水的溶氧较高，应保持在4-6mgO2/L；PH6.8-7.4；水温保持在12-36℃，饲料喂养保证新鲜，不变质，产前培育除配制的专用亲鱼饲料外，另再加部分麦芽，新鲜野杂鱼等，以促进亲鱼的性腺发育。(3)人工催产 3-11月份进行人工催产，操作形式采用挑选成熟的亲鱼，催产后放于一个50米2的水泥池或网箱中，进行流水刺激；催产形式采用二针注射，第一针为总剂量的1/3，第二针剩余量，个别发育不好的再补3-4针；人工受精采用干法受精，挤出的卵呈圆球形，浅黄色，具有粘性，卵径大约0.95-1mm，产卵量3.5-5.5千克的亲鱼每次产卵在650-1500g之间；催产药物采用催产合剂。注射后流水刺激，观察繁殖行为，纪录效应时间，产卵后粘于网片和棕片上进行流水孵化。(4)孵化 采用流水池进行孵化，孵化时用水药棉过滤，在水温27-32℃的情况下大约需要18-22小时破膜，破膜后的幼体呈上下串动，很活跃，刚破膜仔鱼呈透明状，个体很小，长度大约1.7-2mm，幼鱼经48-56小时开始逐渐平游，待大部分鱼体平游后开始投喂蛋黄和奶粉。(5)苗种培育 鱼苗孵出后第二天即开始平游，到第三天仔鱼的腹部卵黄便会吸收完毕，仔鱼开口摄食，此时应及时投喂适口饲料，由于鱼体个体太小，投喂方法第一次开口料为蛋黄和奶料，随后逐渐开始投加丰年虫，每天投喂六次，经18-20天的精心培育当苗种长到2-3cm，即可转池或出售。
2.根据权利要求1所述的淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，其特征是还包括下列步骤(6)催熟处理亲鱼在催产前一月进行一次催熟处理，具体方法为用花生油加热后，再加促排卵2号(LKH-A2)2.5微克/千克，进行研磨制成乳剂，乳化后肌肉注射，部位在第一背鳍下侧肌肉注射，每尾注射2-3毫升。
3.根据权利要求1所述的淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，其特征是所述步骤(2)中养鱼池的水质调配要求是井水2/3，纯净水1/3。
4.根据权利要求1所述的淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，其特征是所述步骤(2)中的专用亲鱼饲料为鲨A-I号，其50000克中的主要原料为鱼粉15000克、豆粕23000克、麸皮7000克，米糠3500克、磷酸氢钙1000克、盐500克、维生素E。
5.根据权利要求1所述的淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，其特征是所述步骤(3)中的催产合剂是催鲨-A号，它由脑垂体PG、绒毛膜促性腺激素HCG、促排卵2号LRH--A2组成，其配比为每千克鱼苗需PG 2-5个，LRH--A2 6-10微克，HCG 400-600国际单位。
6.根据权利要求1所述的淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，其特征是所述步骤(2)中的最佳水温保持在22-32℃。
全文摘要
本发明公开了一种淡水鲨鱼人工繁殖及育苗方法，主要包括下列步骤，(1)亲鱼来源，(2)亲鱼培育，(3)人工催产，(4)孵化，(5)苗种培育。经过一年多的试验，基本达到了我们的试验目的。无论是亲鱼培育、人工催产孵化，苗种培育均都达到了较好的生产性水平，亲鱼培育成熟率达85％，催产率达96％以上，孵化率达60－80％，从而已验证了该项技术工艺的可靠性和稳定性，总结出了一套完整的系统的人工繁殖技术资料，使淡水鲨鱼在国内人工繁殖及育苗技术得到突破。共计催产亲鱼52批，累计孵化水花1980.5多万尾。培育后推广到河北、河南、北京、天津等地。
文档编号A01K61/00GK1565174SQ03126219
公开日2005年1月19日 申请日期2003年6月23日 优先权日2003年6月23日
发明者岳保生, 潘惠宇 申请人:漯河市金源创业有限公司