专利名称：杀菌能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，更进一步涉及一种在单过硫酸氢钾复合物(potassium monopersulfate)及苹果酸中包含柠檬酸及酒石酸从而消毒能力提高的杀菌及杀病毒组合物。
背景技术：
近几年，在蓄牧业中成为问题的病原体有鸟类流感病毒，口蹄疫病毒、猪霍乱病毒、沙门氏菌、链球菌等。
尤其，主要给鸡、火鸡等家禽类带来危害的鸟类流感病毒，根据病原性可分为高病原性、弱病原性、非病原性3类，国际兽疫事务局(OIE)将其中的高病原性列为A等级，在韩国列为第1类家畜传染病。病原体是A型病毒，具有H血清型和N血清型。根据这两类的蛋白质可存在共135种的病毒血清型，不过到2004年现今报道为止在全世界有15种HA、9种NA。感染主要是在直接接触鸟类分泌物时发生，还可以通过飞沫、水、人的脚、饲料车、器具、设备、沾在蛋壳上的粪便等传播。虽然症状根据被感染病毒的病原性有所不同，但大部分会出现呼吸器官症状和腹泄、产蛋率的急剧减少。根据情况，在鸡冠等头部出现青色症，还出现面部发生浮肿或长毛向一方聚集的现象。
根据病原性，死亡率在0～100％之间，不过由于和新城疫、传染性喉气管炎、支原体感染症等症状类似，因此需要正确的诊断。
虽然在1930年代以后世界上没有发生过，但在1983年在比利时、法国等欧洲国家开始发生以来，到2004年在世界各国都发生了包括弱病原性在内的高病原性鸟类毒感。在高病原性的情况下，人类也会被感染，从而1997年在香港6人死亡，2004年在越南16人死亡。在韩国也从1996年到2003年12月间在忠清北道阴城发生鸟类毒感并扩散到全国，但由于是弱病原性，因此确认为没有传染到人体上。
如果发生鸟类毒感，则全世界大部分国家将进行全部数量的扑杀处理，且发生国家将不能出口养鸡产品。
因此，可以说鸟类流感病毒是危害畜牧业发展的罪魁祸首。
口蹄疫是当家畜被口蹄疫病毒感染时发生，2000年也曾发生在韩国、日本，从2001年开始发生在英国等全世界范围内。主要发生地区为非洲、南美、亚洲、东欧等，2001年8月30日现有OIE认可的非发生国有，美国、加拿大、巴拿马等北中美国家和挪威(西欧)、澳洲、新西兰(大洋州)和印度尼西亚、日本(亚洲)等50多个国家，地区性的被认可的有哥伦比亚北西部、菲律宾的棉兰老岛地区等，施行疫苗的国家有，巴拉圭和巴西、哥伦比亚的部分地区，就韩国的情况而言，原来仅认可济舟岛地区，而在2001年9月19日与法国、荷兰、爱尔兰等一同被认可为施行疫苗的非发生国(清症国)，从而恢复了原来的地位。
上述口蹄疫会使动物的生产性低下，导致经济损失，故将口蹄疫列为国际贸易上的限制对象疾病，在国际兽疫事务局(OIE)归为A级的15种疾病中，也作为首屈的恶性传染病，一旦发生口蹄疫，则难以根治，也没有特别的治疗方法。
为了畜牧业的发展，需要开发一种不仅对上述罗列的病原体而且对成为各种疾病的病原菌和病毒具有高消灭力，并且可以自由地对畜体、饮水等进行消毒的安全、适用范围宽的消毒剂。
天然物意味着未经加工的原自然状态，归为GRAS(GenerallyRecognized As Safe)的天然物的使用量或适用食品不受限制，在韩国国内是将其归为天然添加物，作为食品添加物使用。
在韩国以外的国家，天然物作为没有特别的限定而根据使用者的意图可以自由利用的物质，其功能性优异，因而被应用为健康食品和医药品。
苹果酸作为富含于天然水果中的物质，是被美国食品医药安全厅(FDA)认证为一般来说安全的物质(generally recognized as safe，GRAS)。苹果酸还被注册为食药厅的医药品公告物质，因此还可作为医药品的原料使用，在清凉饮料、果蔬罐头、果汁、糖/口香糖等中作为添加物使用已久。
目前，全世界为了利用天然物质开发出消毒剂而付出了很大的努力，在市售的类似的消毒剂中，作为代表有将苹果酸、单过硫酸氢钾复合物等作为主原料的Bayer Korea的VIRCON-S。
上述VIRCON-S是作为口蹄疫消毒剂最畅销的、pirbright研究所鉴定的消毒剂，被认为不仅对病毒、细菌、霉等各种病原体显示出卓越的消灭效果，而且对幼狗、初生雏、乳猪、乳牛等需要安全性的幼家畜也可以直接进行喷雾的安全的消毒剂。在每1kg上述消毒剂中含有单过硫酸氢钾复合物500g、氯化钠15g、苹果酸100g，且消毒时用50～300倍的水稀释后再使用。
但是，当考虑到因化学制剂的长期使用及环境污染等众多因素，病原体的抵抗性随时间增强的情况时，就应持续开发和发展天然物质。因而，在本领域中，需要开发一种不仅与可以消灭各种疾病的病原菌及病毒的市售的消毒剂相比，具有高的杀菌能力和牲口圈消毒，而且可以自由进行畜体、饮水消毒等的天然消毒剂。
因此，本发明者等为了制备对于各种病原体具有高的杀菌能力和畜体消毒能力的天然消毒剂而进行潜心研究的结果发现，在苹果酸及单过硫酸氢钾复合物中以特定比率含有柠檬酸及酒石酸的组合物，与目前市售的VIRCON-S相比，其消毒能力明显提高且维持稳定性，以至完成了本发明。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种在苹果酸及单过硫酸氢钾复合物中以特定比率含有柠檬酸及酒石酸的杀菌及杀病毒组合物。
为达到上述目的，本发明提供包含单过硫酸氢钾复合物、六偏磷酸钠、苹果酸、柠檬酸及酒石酸的消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物。
下面，详细地说明本发明。
就本发明的杀菌及杀病毒组合物而言，优选上述组合物包括单过硫酸氢钾复合物(potassium monopersulfate)30～50重量份、六偏磷酸钠1～20重量份、苹果酸1～10重量份、柠檬酸1～10重量份、酒石酸1～10重量份。
作为本发明必需组分之一的单过硫酸氢钾复合物(potassiummonopersulfate)作为potassium peroxymonosulfate、potassium sufate及potassium bisulfate的三合盐，是作为商品名“
的玉手”广为人知的物质，其作为消毒剂的主要成分使用，且易溶于水，是非氯系氧化剂。与氯系氧化剂相比，没有刺激性气味，且通过强氧化作用而显示出很强的消毒效果。
优选上述单过硫酸氢钾复合物的含量为30～50重量份。如果上述单过硫酸氢钾复合物的含量低于30重量份，则存在杀菌及消毒能力微弱的问题，如果高于50重量份，则存在因毒性过强而给人体或家畜带来危害的问题。
作为本发明必要成分之一的六偏磷酸钠，具有易溶于水，且在高温水溶液中可水解为正磷酸盐，在聚合磷酸盐中，其水溶液唯一显示中性。已知其通常用于维持香肠的保水性、防止果汁的变色、pH缓冲剂、果胶防凝固剂、蛋白质分散剂和蔬菜、水果、豆加工品等相关制品的稳定剂中，还可抑制由金属离子失活引起的微生物的生长。还有，当家畜牲口圈或畜产器具及其周边设施为金属时，起到预防或消除金属腐蚀的作用，且保护铁质体的表面而起到预防铁质体的腐蚀的作用。
在本发明中，优选上述六偏磷酸钠的含量为1～20重量份。如果上述六偏磷酸钠的含量低于1重量份，则存在预防及消除铁质体腐蚀的效果微弱的问题，如果高于20重量份，则存在妨碍抑制金属的腐蚀的作用的问题。
本发明的必要成分之一苹果酸，是通过酸性其杀菌及杀病毒效果被广为人之的物质，美国食品医药安全厅(FDA)已认证(Generally RecognizedAs Safe，GRAS)为通常安全，也被称为马来酸(maleic acid)。苹果酸(DL-Maleic acid)的化学式为C4H6O5、分子量134.09、比重1.601、熔点133℃、沸点150℃(分解)。苹果酸没有潮解性，且其酸味度比柠檬酸约强20％，并富含于苹果和葡萄等天然水果中。如果酸性的苹果酸投入到微生物中，则微生物为了维持pH提高性而将有机酸拉进微生物内。因这一动作，微生物的细胞质成酸性化，对酶促反应和物质传递过程带来影响，还为提高pH而消耗能量，从而微生物被消灭。还有，苹果酸具有缓和杀菌消毒剂的气味和刺激的作用。
在本发明中，优选上述苹果酸的含量为1～10重量份。如果苹果酸的含量低于1重量份，则存在缓和作用微弱的问题，如果高于10重量份，则存在反而杀菌及消毒剂的药效下降的问题。
柠檬酸作为本发明的必要组分之一，是在众多植物的核或果汁中以游离态酸含有的酸，其主要以水果香保存剂、保存性增效剂、pH调节剂等多种用途广泛使用。还有，酒石酸包含于酿造葡萄酒时所沉淀的酒石中，作为清凉饮料广泛用于糖浆、果汁等，作为医药品用于制剂、缓冲剂、pH调节剂等的混合中，但没有作为消毒剂用途的报告。这些是被收录于FDA认定的通常被认为安全的食品添加物(GRSA)目录中的安全物质，它们起到防腐剂的作用而具有防止由各种有机物引起的腐败的功效，且与杀菌及消毒剂成分一同渗透时发挥更强的药效。因而，通过将这些以适当量添加到单过硫酸氢钾复合物中，起到通过酸性增进单过硫酸氢钾复合物的消毒能力的作用。
在本发明中，优选上述柠檬酸及酒石酸的含量分别为1～10重量份。如果柠檬酸及酒石酸的含量低于1～10重量份，则几乎没有消毒效果及防止腐败的效果，如果高于10重量份，则存在杀菌及消毒剂的药效下降的问题。
在本发明的杀菌及杀病毒组合物中，为了将杀菌及消毒剂的各种成分均匀地乳化分散于上述组合物中，可以再添加十二烷基磺酸钠，这时，优选上述十二烷基磺酸钠含量为1～35重量份。
在本发明的杀菌及杀病毒组合物中，为了改善色香，可以向上述组合物进一步添加色素、酯等。
本发明的杀菌及杀病毒组合物，通过向单过硫酸氢钾复合物(potasiummonopersulfate)、六偏磷酸钠及苹果酸中添加柠檬酸及酒石酸，与由六偏磷酸钠、十二烷基苯磺酸钠、苹果酸、氯化钠及氨基磺酸(sulfamic acid)构成的、目前广泛使用的消毒剂VIRCON-S的杀菌能力相比，显示出增加了约2～4倍的杀菌能力(参照表1～表9)。因而，由于本发明的杀菌及杀病毒组合物由天然物质制备而成，故可以进行微生物的生物降解，因此几乎不会导致环境污染，且在进行有机物大量处理的条件下，也对于广泛围的细菌及病毒的消毒效果优异，因此不仅适用于牲口圈消毒，而且还可以适用于畜体、饮水消毒等。
本发明的杀菌及杀病毒组合物，可以消灭沙门氏菌、布鲁氏菌、大肠菌、巴斯德菌、葡萄球菌等细菌，可以消除新城疫病毒、鸟类流感病毒、猪奥叶兹基氏病毒、猪霍乱病毒、口蹄疫病毒等病毒。
具体实施例方式 下面，通过实施例进一步详细说明本发明。上述实施例只是为了例示本发明，本发明的范围并不限定于实施例。
<实施例1>杀菌组合物的制备1 用单过硫酸氢钾复合物500g、苹果酸100g、柠檬酸15g、酒石酸10g、六偏磷酸钠50g及十二烷基苯磺酸钠319g、少量红色素及柠檬香粉末，基于大韩药典制剂总则中的散剂制法，制备了消毒剂。
<实施例2>杀菌组合物的制备2 除了单过硫酸氢钾复合物500g、苹果酸100g、柠檬酸100g、酒石酸50g、六偏磷酸钠125g及十二烷基苯磺酸钠25g以外，通过与实施例1同样的方法制备了消毒剂。
<实验例1>杀菌效果 <1-1>测定沙门氏菌的杀菌效果 从韩国微生物保存中心(KCCM)获取作为普通细菌的代表菌株的沙门氏菌(Salmonella cholearsuis，KCCM41598)并用于试验。
利用已进行高压灭菌的营养培养基，将试验菌株在37℃下进行22～26个小时的继代培养后，根据McFaland方法测定浊度而测出了菌数，并使用了细菌的浓度为108CFU/mL以上的样品。
将上述实施例1的组合物分为处理区1、处理区2、处理区3、处理区4、处理区5，并将处理区1设为蒸馏水条件(有机物无)，将处理区2设为硬水条件(有机物低浓度)，将处理区3设为有机物/硬水条件(有机物高浓度)，将处理区4设为处理区2及3的对照区，将处理区5设为处理区1的对照区，且与各处理区相对应地利用蒸馏水、硬水、5％有机物稀释液进行了稀释。这时，以1/100、1/150、1/200、1/250、1/300、1/350、1/400、1/800、1/900、1/1000、1/1100、1/1200及1/1400的稀释倍数进行了稀释。
就硬水而言，将CaCl20.305g和MgCl26H2O 0.139g溶于蒸馏水1L后，进行高压灭菌，再保管于4℃，就细菌用有机物稀释液而言，溶于硬水以使含有20％(w/v)酵母提取物后，进行高压灭菌，再保管于4℃。在稀释消毒剂及稀释细菌时，分别用蒸馏水、硬水、5％有机物进行稀释调制后，利用1N的NaOH及1N的HCl调节pH，使pH为7。就病毒用有机物稀释液而言，溶于已灭菌的硬水后再使用，以使含有5％的胎牛血清。
接下来，将在37℃下培养的4ml细菌，与处理区相对应地和96ml的蒸馏水、硬水、5％有机物稀释液进行混合，之后取2.5ml混合液，滴加到分别用蒸馏水、硬水、5％有机物稀释液稀释的4℃的消毒剂稀释液中，并以1∶1混合。消毒剂和病原体的反应是在各试管按顺序以1分钟的间隔进行，并在4℃下准确反应30分钟，每10分钟混合一次，以使充分地发生反应。
准确反应30分钟后，为了中和消毒剂的效能，立即取出1.0ml，加入到37℃、9.0ml的中和培养基中进行混合，之后按照各消毒剂的稀释倍数，向装有营养培养基的5个试管各加入0.1ml进行混合，之后在37℃培养箱中培养48个小时。用于中和消毒剂成分的中和培养基使用了在营养培养基中含有5％灭活马血清的培养基。
对于每一个消毒剂稀释倍数，分别在5个营养培养基进行实验而测定了细菌被发现的营养培养基数目。
就细菌繁殖与否的判定而言，在上述5个相同消毒剂稀释倍数的营养培养基中，将被认定为2个以上没有发生繁殖的最终消毒稀释阶段作为稀释倍数。
通过上述方法测定本发明的组合物的杀菌效果并表示在表1中。
[表1] 对于沙门氏菌的杀菌效果
如表1所示，可见本发明的组合物对于沙门氏菌来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1100的稀释倍数，一直具有杀菌效果，当有机物浓度高时(处理区3)，直到1/200的稀释倍数，一直具有杀菌效果。
<1-2>测定葡萄球菌的杀菌效果 为了评价对于特定细菌的消毒效力，从韩国微生物保存中心获取葡萄球菌(Staphylococcus aureus，KCCM40050)并用于试验中。
与<1-1>同样的方法进行试验，并将其结果表示在表2中。
[表2] 对于葡萄球菌的杀菌效果
如表2所示，可见本发明的组合物对于葡萄球菌来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1200的稀释倍数，一直具有杀菌效果，当有机物浓度高时(处理区3)，直到1/250的稀释倍数，一直具有杀菌效果。
<1-3>测定大肠菌的杀菌效果 为了评价对于特定细菌的消毒效力，从韩国微生物保存中心获取大肠菌(Escherichia coli，KCCM11234)并用于试验中。
与<1-1>同样的方法进行试验，并将其结果表示在表3中。
[表3] 对于大肠菌的杀菌效果
如表3所示，可见本发明的组合物对于大肠菌来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1000的稀释倍数，一直具有杀菌效果，当浓度高时(处理区3)，直到1/150的稀释倍数，一直具有杀菌效果。
<1-4>测定巴斯德菌的杀菌效果 为了评价对于特定细菌的消毒效力，从国立兽医科学检疫院获取巴斯德菌(Pasteurella multocida type D4)并用于试验中。
将巴斯德菌接种到已进行高压灭菌的由脑和心脏的浸液制成的培养基(brain hear infusion broth，BHI broth)中，并在37℃下进行22～26个小时的继代培养，之后根据McFaland等方法测定浊度而测出菌数，并使用了细菌的浓度为108CFU/mL以上的培养基上的细菌。
在试验方法中，反应结束后为了中和消毒剂的效能，立即取出1.0ml，加入到37℃、9.0ml的中和培养基中进行混合，之后按照各消毒剂的稀释倍数，向装有BHI broth的5个试管中各加入0.1ml进行混合，之后在37℃培养箱中培养48个小时，除了用于中和消毒剂成分的中和培养基使用了在BHI broth中含有5％灭活马血清的培养基之外，与<1-1>同样的方法进行试验，并将其结果表示在表4中。
[表4] 对于巴斯德菌的杀菌效果
如表4所示，可见本发明的组合物对于巴斯德菌来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1100的稀释倍数，一直具有杀菌效果，当有机物浓度高时(处理区3)，直到1/250的稀释倍数，一直具有杀菌效果。
<1-5>测定布鲁氏菌的杀菌效果 为了评价对于特定细菌的消毒效力，从国立兽医科学检疫院获取布鲁氏菌(Brucella ovis ATCC25840)并使用，将菌株接种到已进行高压灭菌的含5％牛血清的布鲁氏培养基(5％bovine serum contained brucellabroth)中，之后在37℃、5％CO2培养箱中进行72个小时的继代培养，之后根据McFaland等方法测定浊度而测出了菌数，并将细菌的浓度为108CFU/mL以上的用于试验。
在试验方法中，反应结束后为了中和消毒剂的效能，立即取出1.0ml，加入到37℃、9.0ml的中和培养基中进行混合，之后按照各消毒剂的稀释倍数，向装有布鲁氏培养基的5个试管各加入0.1ml进行混合，之后在37℃、5％CO2培养箱中培养72个小时，除了用于中和消毒剂成分的中和培养基使用了在布鲁氏培养基中含有5％灭活马血清的培养基之外，与<1-1>同样的方法进行试验，并将其结果表示在表5中。
[表5] 关于布鲁氏菌的杀菌效果
如表5所示，可见本发明的组合物对于布鲁氏菌来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1000的稀释倍数，一直具有杀菌效果，当浓度高时(处理区3)，直到1/200的稀释倍数，一直具有杀菌效果。
<实验例2>杀病毒效果 <2-1>测定鸟类流感病毒的杀病毒效果 为了评价消毒剂对于病毒的消毒效力，使用了从国立兽医科学检疫院获取的病毒H9N2(MS96 strain)。
将病毒株接种到10日龄的SPF含胚卵的尿囊内，进行继代培养。在已繁殖的病毒的活力最大的时点(病毒效价107.0/mL以上)采病毒并使用于试验。
将上述实施例1的组合物分为处理区1、处理区2、处理区3，在处理区1准备蒸馏水条件(有机物无)，在处理区2准备硬水条件(有机物低浓度)，在处理区3准备有机物/硬水条件(有机物高浓度)，且与各处理区相对应地利用蒸馏水、硬水、5％有机物稀释液进行了稀释。这时，以1/200、1/400、1/600、1/800、1/1000、1/1200、1/1400、1/1600、1/1800及1/2000的稀释倍数进行了稀释。
接下来，将含有病毒的尿囊液1.0ml，与处理区相对应地和24ml的蒸馏水、硬水及5％有机物稀释液(5％胎牛血清)进行混合，之后每隔一分钟取2.5ml，加入到装有用蒸馏水、硬水、5％有机物稀释液进行稀释的4℃的消毒剂稀释液的试管中并进行混合，之后在4℃下准确反应30分钟，每隔10分钟混合一次，以使充分地发生反应。消毒剂的反应结束后，为了中和消毒剂的效能，立即将1份量的消毒液与1份量的50％的非同化胎牛血清混合并使其中和。接下来，利用PBS将上述中和液作为原液、以及稀释为10-1、10-2、10-3、10-4及10-5，对于每一个消毒剂稀释倍数，将中和液0.2ml接种到5个10日龄SPF含胚卵的尿囊内，并在37℃的孵化箱内培养了5天。每天进行检卵，将接种之后在24小时之内死亡的含胚卵作为事故死亡而从试验成绩中除去。通过红细胞凝集反应最终判定了病毒的存在与否及病毒效价。利用下述数学式1的Karber法计算了病毒含量。
[数学式] (这时，L1是所测定的最低稀释液的Log值， L是稀释液之间Log值的差， S是各稀释液中病毒的自然死亡％之和。) 重复进行了3次试验，测定结果表示在表6中。
[表6] 对于鸟类流感病毒的杀病毒效果
如表6所示，可见本发明的组合物对于鸟类流感病毒来说，当没有有机物或浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1000的稀释倍数，一直具有杀病毒效果，当浓度高时(处理区3)，直到1/400的稀释倍数，一直具有杀病毒效果。
<2-2>测定新城疫病毒的杀病毒效果 为了评价对于病毒的消毒效力，从国立兽医科学检疫院获取新城疫病毒(Lasota strain)并用于试验。
除了反应后稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5及10-6以外，与<2-1>同样的方法进行试验，并将其结果表示在表7中。
[表7] 对于新城疫病毒的杀病毒效果
如表7所示，可见本发明的组合物对于新城疫病毒来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1000的稀释倍数，一直具有杀病毒效果，当浓度高时(处理区3)，直到1/400的稀释倍数，一直具有杀病毒效果。
<2-3>测定猪奥叶兹基氏病毒的杀病毒效果 为了评价对于病毒的消毒效力，从国立兽医科学检疫院获取猪奥叶兹基氏病毒(Yangsan strain)并用于试验。
使用了在PK-15细胞株中继代培养而有活力的猪奥叶兹基氏病毒，预先试验空时病毒的含量，并将含量为107.0/ml以上的培养基中的病毒用于试验，反应后使用PK-15细胞培养用培养基，将中和液稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5及10-6，对于每一个稀释倍数，将已中和的反应液100μl接种到已形成PK-15单层细胞的有96个加样孔(well)的组织培养平板上的5个加样孔中，接种后在37℃下培养5天，每天用显微镜观察CPE的形成与否，除了最终判定病毒的存在与否以外，与<2-1>同样的方法进行试验，并将其结果表示在表8中。
[表8] 对于猪奥叶兹基氏病毒的杀病毒效果
如表8所示，可见本发明的组合物对于猪奥叶兹基氏病毒来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1000的稀释倍数，一直具有杀病毒效果，当浓度高时(处理区3)，直到1/400的稀释倍数，一直具有杀病毒效果。
<2-4>测定猪霍乱病毒的杀病毒效果 为了评价对于病毒的消毒效力，从国立兽医科学检疫院获取猪霍乱病毒(LOM strain)并用于试验。
使用了在PK-15细胞株中继代培养而有活力的猪霍乱病毒，预先试验空时病毒的含量，并将含量为107.0/ml以上的培养基中的病毒用于试验，将病毒液1.0ml，如<2-1>，与各处理区相对应地和19ml的蒸馏水、硬水及有机物稀释液(5％胎牛血清)进行混合，之后每隔一分钟取2.5ml，与各处理区相对应地加入到装有用蒸馏水、硬水、5％有机物稀释液进行了稀释的4℃的消毒剂稀释液的试管中并进行混合，之后在4℃下准确反应30分钟，每隔10分钟混合一次，以使充分地发生反应。就对照组而言，代替消毒液使用了蒸馏水。接下来，如果反应结束，则为了中和消毒剂的效能，立即向37℃的中和用溶液(含有10％FBS的细胞培养液)加入同量的反应液并混合。
将中和液利用细胞培养液稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5及10-6后，对于每一种稀释倍数，将已稀释的溶液50μl接种到5个已形成PK-15单层细胞的有96个加样孔(well)的组织培养平板上，在37℃的CO2培养箱中培养5天。除去培养液后固定细胞，就病毒存在与否及病毒效价而言，利用已接合(conjugate)FITC的CSFV E2单克隆抗体(monoclonal antibody)，评价猪霍乱抗原的存在与否，并最终进行了判定。
试验重复三次进行，并将其结果表示在表9中。
[表9] 对于猪霍乱病毒的杀病毒效果
如表9所示，可见本发明的组合物对于猪霍乱病毒来说，当没有有机物或有机物浓度低时(处理区1或处理区2)直到1/1000的稀释倍数，一直具有杀病毒效果，当浓度高时(处理区3)，直到1/400的稀释倍数，一直具有杀病毒效果。
因而，本发明的杀菌及杀病毒组合物，由于在消毒时，如果存在的有机物多，则以400倍的稀释倍数消毒，如果有机物少，则可以稀释为1000倍以上再使用，因此与广泛地作为现有消毒剂使用的VIRCON-S的消毒能力(50～300倍的稀释倍数)相比，显示出更优异的杀菌及杀病毒效果，从而适用于各种动物用消毒剂、牲口圈消毒剂、口蹄疫、鸟类毒感预防消毒剂等。
如上面所述，由于本发明的杀菌及杀病毒组合物由天然物制成，故可以进行微生物的生物降解，因此几乎不会导致环境污染，且在进行有机物大量处理的条件下，也比起以往广泛使用的VIRCON-S，对于广泛的细菌及病毒的消毒效果更加优异，从而不仅可以适用于牲口圈消毒，而且还可以适用于畜体、饮水消毒等中。
权利要求
1.一种消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，其中包含单过硫酸氢钾复合物、六偏磷酸钠、苹果酸、柠檬酸及酒石酸。
2.根据权利要求1所述的消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，其特征在于，
上述组合物包括单过硫酸氢钾复合物30～50重量份、六偏磷酸钠1～20重量份、苹果酸1～10重量份、柠檬酸1～10重量份、酒石酸1～10重量份。
3.根据权利要求1所述的消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，其特征在于，
还包含十二烷基磺酸钠。
4.根据权利要求3所述的消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，其特征在于，
上述十二烷基磺酸钠的含量为1～35重量份。
5.根据权利要求1所述的消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，其特征在于，
上述菌是从沙门氏菌、布鲁氏菌、大肠菌、巴斯德菌及葡萄球菌选择的任意一种。
6.根据权利要求1所述的消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，其特征在于，
上述病毒是从鸟类流感病毒、新城疫病毒、猪奥叶兹基氏病毒及猪霍乱病毒、口蹄疫病毒中选择的至少一种。
全文摘要
本发明涉及一种消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物，更进一步涉及包含单过硫酸氢钾复合物、六偏磷酸钠、苹果酸、柠檬酸及酒石酸的消毒能力得以提高的杀菌及杀病毒组合物。由于本发明的杀菌及杀病毒组合物由天然物质制成，故可以进行微生物的生物降解，因此几乎不会导致环境污染，且在进行有机物大量处理的条件下，也比起以往广泛使用的VIRCON-S对于广泛的细菌及病毒的消毒效果更加优异，从而不仅适用于牲口圈消毒，而且还可以适用于畜体、饮水消毒等。
文档编号A01N59/02GK101347126SQ20071018161
公开日2009年1月21日 申请日期2007年10月19日 优先权日2007年7月20日
发明者李海旻, 吴优铉, 申任澈, 柳洙连 申请人:东部高科技株式会社