四氧取代丁烷桥修饰的ndga衍生物，它们的合成方法和药学用途的制作方法

专利名称：：四氧取代丁烷桥修饰的ndga衍生物，它们的合成方法和药学用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及去曱二氢化愈创木酸(nordihydroguaiareticacid)书亍生物、它们的制备方法以及将它们用于治疗病毒感染、发炎性疾病、代谢性疾病、血管(包括心血管)疾病以及增殖疾病如癌症的使用方法。
背景技术：
：去曱二氢化愈创木酸(NDGA,式I)具有如下的化学结构，NDGA式I其中有两个邻苯二酚基团，和一个2，3-二曱基丁烷桥。所述丁烷桥通过一个4位连接两个邻苯二酚单元。NDGA是一种能够从一种生长于美国西南部和墨西哥的沙漠植物矮橡树(arrea)的叶子含有的树脂中分离出来的天然化合物，它有(2S,3R)的内消旋构象，该构象是对称结构，并且不是旋光活性的。关于NDGA和它的衍生物的研究最近吸引了不断增长的兴趣。大量NDGA衍生物已经被报道，并且可分类如下类型1:醚键4建合的NDGA,最普通的NDGA衍生物，在该衍生物中一个取代基与邻苯二酚片段的一个或多个羟基化学键合。类型2:酯键键合的NDGA衍生物，在所述衍生物中，一个取代基与邻苯二酚片段的一个或多个羟基共价键合。类型3:端环的NDGA衍生物，在所述衍生物中，邻苯二酚片段上的两个羟基通过醚键或碳酸酯键被连接在一起形成5-6元环。类型4:二取代的NDGA衍生物，在所述衍生物中，邻苯二酚片段的一个羟基被甲基化，另一个与一个取代基共价键合。类型5:苯环修饰，在所述修饰中，取代基化学地连接到所述苯环上。类型6:丁烷桥修饰，在所述修饰中，桥上的两个甲基基团被去除、或者被取代基修饰。NDGA及其合成衍生物具有很多特性。作为一种脂质加氧酶抑制剂，NDGA能够导致大鼠的嚢性肾病。、匕外，它显示出多种生物活性，包括蛋白激酶C的抑制，2细胞凋亡的诱发，3细胞膜的改变，4细胞0&2+水平的上升5和平滑肌肉细胞中0&2+通道的激活，6体外预形成的阿尔茨海默氏病(3淀粉纤维(Alzheimer'sbeta-amyloidfibrils)的石皮裂，7抗氧化，8等等。在世界上一些地方，这一天然产物NDGA在商业上作为一种食品添加剂使用，以使脂肪和黄油防腐。最近，植物木脂素NDGA的衍生物已经被用于通过抑制病毒转录来阻断病毒复制。9_16这些化合物能够通过使下述这些的Spl-依赖型启动子失活来抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)、9-13单纯疱渗病毒(HSV)、14'15和人乳头瘤病毒(HPV)转录因子"的生成。而且，(四氧曱基)去甲二氲化愈创木酸(M4N,式II，terameprocol)能够起到一种抗HIV前病毒转录抑制因子的作用，并且引起对多种在培养物和鼠体内转化的人和大鼠细胞的生长抑制。17_19化合物M4N目前处于治疗人癌症的临床试验中。虽然M4N(式II)是格外有效并且无毒的抗癌剂，M4N和一些其它曱基化的NDGA都显示出差的水溶性，这多少限制了它们在某些药物作用研究中的应用。为了解决这一问题，NDGA的一种水溶性衍生物，(四氧二甲基甘氨酸)去曱二氬化愈创木酸(G4N,式III)已经被设计和合成了。"'18<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>G4N是非常有效的对HIV-1、HSV-1和HSV-2突变不敏感的抑制剂.17'22然而，它多少是不稳定的，并且在水溶液中有一个相对短的半衰期，报道称，这是由于连接二曱基甘氨酸单元到NDGA主体结构上的酯键所导致的。18因此，需要这样的NDGA衍生物，它们中的一些具有改进的水溶性，以及良好的稳定性，作为水溶性化合物和疏水性化合物均具有需要的药学效果。本发明人已开发了新的NDGA衍生物，该衍生物具有这些优势，并且将能够用于治疗组合物和治疗方法中。
发明内容本发明涉及去曱二氢化愈创木酸衍生化合物、药物组合物、它们的制备方法、以及它们和包括它们的药剂盒的使用方法，所述使用方法用于治疗疾病和不适症，特别是那些由一种病毒感染导致或者伴有一种病毒感染的疾病、一种发炎性疾病、一种代谢性疾病、一种血管疾病或一种增殖疾病。本发明是基于从本发明人的认识开展的研究，所述发明人认识到1,4-二(邻苯二酚-4-基)-丁烷(式IV),—种二去曱基化的NDGA,作为H-69小细胞肺癌细胞的增殖抑制剂显示出10倍于NDGA的药效。(麦当奴，R.W.;本贾布旁，W;刘，T.;法斯勒，S.;帕多，0.E.;法瑞尔，I.K.A.;格拉瑟，M.;塞科，M.L;罗宾斯，D.L;《抗癌药物设计》(Anti-cancerDrugDesign),2001,16(6)，261—270)。本发明人发明了一种基于丁烷桥修饰标为BB-N的新的NDGA衍生物，其中BB表示丁烷桥修饰，并且N表示在下面式V的NDGA:1,4-二(邻苯二酚-4基)丁烷-桥修饰NDGA(BB-N)-丁烷式IV式V本发明的一个方面涉及标为"BB-N"具有前述的通式结构(式V)的丁烷桥修饰去甲二氢化愈创木酸衍生化合物，以及它的药学上可用的盐式V的化合物中，每个X选自由-CHO、-CN、-CH2C1、-CH2Br和-CH2F构成的组。然而，在其中所述BBK汙生物作为一种中间体使用以制造下面公开的"BB-Sb4N"衍生物的情况中，X同样可是H或-CH2CH3，其中标记"X"在适当的式中用"Z，，代替。本发明的另一个方面涉及一种标为"BB-Sb4N"的具有下面通式结构(式VI)丁烷桥修饰的四氧取代去甲二氢化愈创木酸衍生化合物，以及它的药学上可用的BB-Sb4N式VI在标记"BB-Sb4N，，中，"BB，，代表所述NDGA基本部分N的丁烷修饰部分并且"Sb4N，，代表本发明的桥修饰的四氧取代的去曱二氢化愈创木酸衍生化合物的四氧取代的去曱二氢化愈创木酸部分。所述化合物包括两个邻苯二酚单元、一种丁烷桥和在"Sb4N，，中被标为"Sb4"的一种四个基团Y,每个取代NDGA羟基基团的H(有时指"取代基Y")所述丁烷桥在1，4位通过所述邻苯二酚的苯基环的4位连接两个邻苯二酚。在所述丁烷桥的2,3位的取代基(Z)选自由H,-CHO、-CN、-CH2CH3、-CH2C1、-CH2Br和-CH2F构成的组。Y选自由下列基团构成的组-A-R;-咖Jkl,其中x是一个1到10的整数，并且Hal是一个囟原子，代表氯、氟、溴或碘的任意一种；-咖H20)yH,其中y是一个1到10的整数；和一个氨基甲酸酯键合的基团，所述基团选自由下列基团构成的组义『，义^^T2，义fT^、13和l口。r^C其中n是一个1到6的整数，L是有2-6个碳和任选地有1-3个卣原子的一种饱和线性烃链，L是任选地包括0-3个双4A和任选地包括任意0、N和S中的l-3个原子的一种5到7元环，和T3是甲基或乙基。当Y是-A-R时，R是端基，且A是带有任选的杂原子的一种线性饱和烃侧链，该侧链在一端通过醚键或氨基曱酸酯键键合在各自的羟基残余的0基团上，并且在另一端4建合到端基R的一个碳或一个杂原子上。所述侧链A选自由下面基团构成的组一种C广Cw线性饱和烃链，它任选地具有1-5个选自0、N和S的杂原子，并且它通过醚4建4建合到NDGA的各自羟基残余0基团上；以及l-5个单元的一种聚乙二醇(PEG)链。所述端基R选自由下列基团构成的组一种5到7元碳环，所述碳环选自由下面基团构成的组有1到3个N、0或S杂原子的一种完全饱和环；一种环，它含有用于形成一个6或7元环的1到3个双键和用于形成一个5元环的1到2个双键，且所述5到7元环带有1到3个N、0或S杂原子；包含氨基甲酸酯键、脲键、碳酸酯键或酰胺键的一种环；和一种水溶性基团，它选自由磺酸的一种碱金属盐；膦酸的一种碱金属盐；一种药学上可用的盐；一种糖和一种多羟基基团构成的组。本发明的另一个方面是一种组合物，它包括所述BB-N化合物或所述BB-Sb4N化合物和一种药学上可用的载体，任选地含有其它药学上可用的赋形剂。本发明的另一个方面是制备下文提到的所述BB-N化合物或所述BB-Sb4N化合物的方法。本发明的另一个方面是以有效量的所述BB-N化合物或所述BB-Sb4N化合物单独地或作为药物组合物的一部分对一受治疗者给药预防性地或者治疗一种病毒感染的方法。本发明的另一个方面是以有效量的所述BB-N化合物或所述BB-Sb4N化合物单独地或作为药物组合物的一部分对一受治疗者给药预防性地或者治疗一种增殖疾病的方法。本发明的另一个方面是以有效量的所述BB-N化合物或所述BB-Sb,N化合物单独地或作为药物组合物的一部分对一受治疗者给药预防性地或者治疗一种发炎性疾病的方法。本发明的另一个方面是以有效量的所述BB-N化合物或所述BB-Sb4N化合物单独地或作为药物组合物的一部分对一受治疗者给药预防性地或者治疗一种代谢性疾病的方法。本发明进一步的一个方面是以有效量的所述BB-N化合物或所述BB-Sb4N化合物单独地或作为药物组合物的一部分对一受治疗者给药预防性地或者治疗一种血管疾病的方法。本发明的另一个方面是药剂盒，该药剂盒包括含有所述BB-N化合物或所述BB-Sb4N化合物的一种药物组合物和用于预防性地或者治疗一种病毒感染、一种增殖疾病、一种发炎性疾病、一种代谢性疾病或一种血管疾病的使用说明。具体实施例方式如上所述，本发明涉及去曱二氢化愈创木酸衍生化合物，含有它们的药物组合物，制造它们的方法，以及它们和含有它们的药剂盒的使用方法，该使用方法用于治疗疾病和紊乱，特别地，病毒感染，例如，举例但不限于，人类免疫缺陷病毒(HIV)、人乳头瘤病毒(HPV)(所有亚型)、单纯疱疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、带状疱渗病毒、巨细胞病毒EB病毒(EpsteinBarrvirus)、痘病毒(小痘、牛痘(cowpox)、猴痘、牛痘(vaccinia))、正肝去氧核糖核酸病毒(orthohepadnavirus)、JC病毒、和BK病毒；发炎性疾病，例如，举例但不限于，各种类型的关节炎和炎症性肠病；代谢性疾病，例如，举例但不限于，糖尿病；血管疾病，例如，举例^旦不限于，高血压、心血管疾病和黄斑变性；和增殖疾病，例如各种类型的癌症。本发明基于如下考虑，包括使用用于治疗癌症和病毒包括HIV的试剂的经验；具有与NDGA相关的一种化学结构的衍生物；此类衍生物与(四氧曱基)去甲二氢化愈创木酸(M4N)(terameprocol)相比具有更强的药效，更好的PD/PK表现和更小或没有副作用，其中至少一些制剂是口服生混合物的内消旋形式，这使化学和生物学表征更加容易。用于NDGA母体化合物修饰所述取代官能团选自成功用于药物分子修饰的最普通的化学基团。它们已经能够被合成并且准备好以合理的水溶性被配制，作为HC1或其他盐的形式或游离^咸，它们有可观的水溶性。本发明其他NDGA衍生物是疏水的。本发明的NDGA衍生物具有良好的稳定性，无论它们是水溶性化合物还是疏水化合物。所述衍生物已经准备好放大到商业化生产。本发明的NDGA衍生物基于NDGA是具有广泛生物活性的天然化合物的事实被开发。NDGA有很多副作用，这些被本发明的衍生物克服。丁烷桥修饰的NDGA(BB-N)衍生物，如1,4-二(邻苯二酚-4-基)-丁烷，具有比NDGA更好的生物活性。所述衍生物具有改善的生物活性。引导本发明进展的研究同样显示NDGA衍生物的羟基修饰，如M孔阻止肿瘤细胞复制并且选纟奪性地诱导肿瘤细胞死亡(细胞凋亡)。这是通过阻止Spl-调节的cdc2(p34)和凋亡抑制蛋白(survivin)的生成而实现的。凋亡抑制蛋白是在癌症前期和癌症细胞中过度表达的凋亡蛋白的抑制剂(IAP)，并且很少在健康的成人细胞中被发现。M4N也阻止人类免疫缺陷病毒(HIV)、单纯疱渗病毒(HSV)和人乳头瘤病毒(HPV)的增殖。这是通过使病毒繁殖非常重要的病毒Spl依赖型启动子失活而实现的。本发明的BB-Sb4N衍生物将通过使用合适的官能团修饰NDGA的羟基来显著地改善它们的活性以阻止Spl-调节的cdc2和凋亡抑制蛋白的生成。定义本发明使用的"缓冲剂"包括任何本领域常规的緩冲剂，例如举例说明，三羟曱基氨基甲烷(Tris)、磷酸盐、咪唑和重碳酸盐。本发明使用的"环糊精"是指未改性环糊精或改性环糊精，并且包括但不限于a-环糊精、P-环糊精、Y-环糊精和任何含有额外修饰的改性环糊精，例如羟丙基-P-环糊精("HP-(3-CD")或磺丁基醚P-环糊精("SBE-e-CD")。环糊精典型地有6(ot-环糊精)、7((3-环糊精)和8(y-环糊精)糖，上至三个取代每糖，因而0到24个初级取代是可能的(初级取代被定义为取代直接连接到环糊精环上)。本发明使用的修饰或未修饰环糊精可有任何合适数量和位置的初级取代或其他修饰。本发明使用的本发明的"NDGA衍生物"是指下文中被标为"BB-N"或"BB-Sb4N"的NDGA的一种衍生物。"药学上可用的载体"是指非毒性的固体，半固体或液体填充物、稀释剂、胶嚢材料或任何常规类型的制剂辅料。"药学上可用的载体"是在使用的剂量和浓度上对于受试者是非毒性的，并且与制剂的其他配料相容。例如，用于包括本发明的儿茶酚丁烷(catecholicbutane)或NDGA衍生物的制剂的载体优选地不包括氧化剂和其他已知的对此类衍生物有害的化合物。合适的载体包括，但不限于，水、葡萄糖、丙三醇、生理盐水、乙醇、緩冲剂、二甲亚砜、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油(CremophorEL)及其组合。所述载体可包括额外的试剂如润湿剂或乳化剂或pH緩冲剂。如需要可加入其他材料如抗氧化剂、保湿剂、翁度稳定剂和类似试剂。本发明使用的"药学上可用的盐"包括酸加成盐(与多肽的游离氨基形成)和那些与无才几酸举例如盐酸或;粦酸，或有^L酸如乙酸、苯羟乙酸和乙二酸形成的。与游离羰基形成的盐可同样衍生于无机碱举例如钠、钾、铵、钩或氢氧化铁，以及此类有机碱如异丙胺、三曱胺、2-乙氨基乙醇和组氨酸。本发明的NDGA衍生物药学上可用盐的非限制性实施例包括例如下列通式的盐:k[酸]其中BB-N是丁烷桥修饰的NDGA,Sb是如下面表1和2所述的一种取代基，k是一个整数或非整数，并且酸是有机或无机酸，如下面非限定性表A所举的例子。表ASb酸k包括一个碱式氮原子HC1、HBr、HN03、MeS03H、H2S04、天门冬氨酸、柠檬酸、苯磺酸、樟脑酸、樟脑磺酸、乙磺酸、2-羟基乙石黄酸、曱酸、反丁烯二酸、半乳糖二酸、D-葡萄糖酸、乙醇酸、N-苯酰基氨基乙酸、L-乳酸、顺丁烯二酸、苹果酸、丙二酸、烟酸、棕榈酸、朴酸、磷酸、水杨酸、丁二酸、酒石酸、对曱基苯磺酸。1-4包括两个碱式氮原子HC1、HBr、HN03、MeS03H、H2S04、天门冬氨酸、柠檬酸、苯磺酸、樟脑酸、樟脑磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、曱酸、反丁烯二酸、半乳糖二酸、D-葡萄糖酸、乙醇酸、N-苯酰基氨基乙酸、L-乳酸、顺丁烯二酸、苹果酸、丙二酸、烟酸、棕榈酸、朴酸、磷酸、水杨酸、丁二酸、酒石酸、对甲基苯磺酸。1-8本发明使用的"药学上可用赋形剂"包括运输体、佐剂、或稀释剂或其他辅料物质，例如本领域常规的已经可公开获得的那些。例如，药学上可用的辅料物质包括pH调节和緩冲剂，张力调节剂、稳定剂、润湿剂等等。除非另有具体说明，一种"环"，如本发明使用的如"5元环"、"6元环"、"7元环"的词是指带有任意表明的杂原子的碳环。本发明可替换^使用的术语"受治疗者(subject)"、"宿主(host)"和"患者"是指被用本发明的组合物治疗的动物，包括但不限于，猿、人、猫、犬、马、牛、猪、羊、山羊、哺乳类农场动物、哺乳类运动动物、和哺乳类宠物。"基本上纯化的"化合物是指本发明的NDGA衍生物是基本没有不是本发明的NDGA衍生物化合物(下文中的"非NDGA衍生物")的化合物。基本上没有是指至少50°/。、优选地至少70%、更优选地至少80%、和甚至更优选地至少90%没有非NDGA衍生物。如本发明使用的，"治疗(treatment)","治疗(treating)"等词是指获得期望的药理学和/或生理学效果。所述效果可是预防性的指完全或者部分防止异常状况或疾病或其症状并/或可是治疗性的指部分或完全治愈异常状况或疾病和/或由该异常状况或疾病引起的不利的影响。"治疗"因此，举例说明，覆盖了动物、优选地哺乳动物、更优选地人的异常状况或疾病的任何治疗，包括(a)防止受治疗者中异常状况或疾病的发生，所述受治疗者可能是易患该异常状况或疾病但还未被诊断患有它；(b)抑制异常状况或疾病，例如抑制它的发展；和(c)摆脱、緩解或改善所述的异常状况或疾病，举例如，引起异常状况或疾病的消退。本发明仅通过实施例描述但并不以任何方式理解为限制本发明。因此，本发明不受限于描述的特定实施例，并且显而易见的有所变化。同样应被理解的是本发明使用的术语仅是为了描述特定实施例的目的，不理解为是限制性的，因为本发明的范围仅受基于本临时专利申请的非临时专利申请的附加的权利要求的限制。在有数值范围的情况中，应理解为在所述范围的上限和下限之间每个中间值，除非文字另有明确表示到下限的单位(unit)十分位，和在所述范围的任何其他的表述的或介于中间的值，被包含于本发明。这些更小范围的上限和下限可独立地包括在所述更小范围内，并且在所述范围任何具体地排除的端值也被包含于本发明。在所述范围包括一个或两个端值的情况中，范围不包括那些包括的端值的任一或两个同样也包括在本发明中。需要重视的是如本发明所用，单数形式"a"、"an"和"the"包括复数除非文字另有明确表述。因此，例如"一种衍生物(aderivative)"包括该衍生物的复数形式以及"所述NDGA衍生物(theNDGAderivative)"是指一种或多种NDGA衍生物及为本领域技术人员所知的它的等同物。本发明提到的所有出版物，包括专利、专利申请和杂志文章以全文作为引文并入本发明，包括它们引用的引文也作为引文并入本发明。本发明讨论的出版物仅为公开日在本发明申请的申请日以前的。本发明没此外，提供的出版日期可能会不同于实际出版日期，这可能要独立地证实如上所述，本发明的一个方面涉及标为"BB-N"的具有通式(式V)的丁烷桥修饰去曱二氢化愈创木酸衍生化合物，以及它的药学上可用盐丁烷-桥修饰跳A(BB-N)式V式V的化合物中，每个X选自由-CHO、-CN、-CH2C1、-CH2Bi^p-CH2F构成的组。然而，如上所述，在其中所述BB-N衍生物作为一种中间体使用以制造下面公开的"BB-Sb4N，，衍生物的情况中，X同样可是H或-CH2CH3，其中标记"X"在适当的式中用"Z"代替。本发明的另一个方面涉及标为"BB-Sb4N"的具有下面通式结构(式VI)的一种丁烷桥修饰的四氧取代去曱二氬化愈创木酸衍生化合物，以及它的药学上可用的盐BB-Sb4N式VI同样如上所述，Y选自由下列基团构成的组:_(CH2)xHal，其中x是一个1到10的整数，并且Hal是一个卣原子，代表氯、氟、溴或碘的任意一种；-(CH2CH20)yH,其中y是一个1到10的整数；和一个氨基曱酸酯键合的基团，所述基团选自由下列基团构成的组^^,义^^T2，J[T^、T3和l口。1^《e其中n是一个1到6的整数，L是有2-6个碳和任选地有1-3个囟原子的一种饱和线性烃链，L是任选地包括0-3个双4建和任选地包括任意0、N和S中1-3个原子的一种5到7元环，和L是曱基或乙基。当Y是-(CH》xHal时，x优选地是1到3,并且Hal是氯或氟；更优选地，在本例中，例如Y是一(CH2)2F。当Y是-(CH2CH20)yH时，y优选地是l到3，并且更优选地，例如在本例中，Y是-(CH2)2OH(当y是1时)；或-(CHJ厂O-(CH2)2-0H(当y是2时)。随着上述Y的限定，所述丁烷桥:f又代基Z和NDGA的BB-Sb4N^f汙生物的取代的Y基团的侧链A和端基R可选自在上面
发明内容中提出的那些并且也以表的形式在下面的表l中提出表l<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>合适的侧链A的非限制性实施例是C厂C4线性链，如乙烯、丙烯或丁烯，在一端通过醚4建键合到NDGA的各自羟基残余0基团；C2-C4线性链，如乙烯、丙烯或丁烯，有0或N杂原子，并且所述链在一端通过醚4定4建合到NDGA的各自羟基残余O基团；1-3个单元的聚乙二醇(PEG)链；或氨基甲酸酯键。所述侧链在另一端键合到R端基的碳或杂原子上。合适的Y和端基R的非限制性实施例在下面的表2中提出:表2<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>合成丁烷桥修饰的NDGA(BB-N)和标为(BB-Sb4N)的丁烷桥纟务饰的四氧取代的去甲二氢化愈创木酸衍生化合物在下面提出。合成l，4—二(邻苯二酚—4-基)-丁烷的几种方法，原料的一种再文献中被报道(如通过多步合成方法，参看《抗癌药物设计》(AnticancerDrugDesign),2001,16,261-270;和通过相应硼酸的自我偶联，参看《四面体通讯》(TetrahedronLett),2002,43,8149—8151)。然而，这些方法产生低产率的预期产物，并且一些原料不是直接获得的。为了克服现有合成方法的低效，本发明人开发了一种新的合成1，4-二(邻苯二酚-4-基)-丁烷方法以通过简化的步骤获得非常高的产率。麦克马瑞(McMurry)耦联一个乙醛以产生一种顺式和反式化合物的混合物，该混合物纟皮还原以产生期望的作为式V的BB-N彩于生物的一个前体的四氧曱基-BB-N:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>(羟曱基)-1,4-二(3,4.甲氧苯基)-丁烷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>2,3-二(羟曱基)-1,4-二曱氧苯基)-丁烷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>起始的2,3-二(羟甲基)-1,4-二(3,4-二甲氧苯基)丁烷嫩购才艮据文献合成(JACS，1957,79,3823-3827;《四面体副刊》(Tetrahedron:Ass.)1998,9，2827—2831;《四面体》(Tetrahedron)1996,52(39)，12799-12814;《四面体副刊》(TetrahedronAss.)1995,6(4),843—844)。从所述丁烷桥修饰NDGA衍生物BB-N(式V,如上解释的其中X基团被Z基团代替)合成醚键键合的丁烷桥修饰四氧取代的NDGA衍生物BB-Sb4N(式VI)的方法在下面提出。一般方法1:卣代烷和丁烷桥修饰NDGA(BB-N)在碱催化条件的反应Z=H;-CHO,-CN,-CH2CH3,-CH2F,-CH2CI，-CH2BrR'=CI,Br一般方法2:甲基苯磺酸活化的醇与丁烷桥修饰NDGA(BB-N)的反应<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>方法:Z=H;-CHO,-CN,-CH2F，-CH2CI,-CH2Br合成氨基甲酸酯键键合的丁烷桥修饰四氧取代的NDGA(BB-Sb4N)的一般方法1:异氰酸酯化合物与BB-N的反应BB-NR—NH2R-NCO:=H;陽CHO，-CN,-CH2F,-CH2CI,-CH2Br一般方法2:激活的氨基化合物和BB-N的反应:Z=H;-CHO，-CN,-CH2F，-CH2CI,-CH2BrH^BB-S4N21根据本发明的特定的NDGA衍生化合物BB-N和BB-Sb4N的制备方法的细节将在下面的实施例部分提出。在合适制剂中的本发明的NDGA衍生物，优选地但不专有地在药物组合物中作为活性成分或作为两种或多种活性成分中的一种在合适的情况下伴有药学上可用的载体或赋形剂，能够被安全给药至需要此类治疗的受治疗者，所述给药是通过鼻腔传输、吸入、通过静脉的举例如输注或注射至中央静脉、动脉内(伴有或没有阻塞)、腹膜内、间质内、皮下、透皮、皮内、目艮内、肌肉内、体表、颅内、脑室内、口服、或口腔、或植入给药。而且，所述NDGA衍生物能够安全地给药至需要此类治疗的受治疗者，所述NDGA是以溶液、悬浮液、半固体或固体的适当形式，或脂质体制剂、纳米颗粒制剂、或胶粒制剂用以通过上述一种或多种途径给药。更进一步，脂质体制剂、纳米颗粒制剂、或胶粒制剂中的所述NDGA衍生物能够包埋于生物降解高分子材料制剂并且安全地给药，如通过皮下植入。本发明用于给药的组合物可是任何合适的形式，例如但不限于，溶液，悬浮液、片剂、丸剂、胶嚢、緩释制剂或粉末、亲水或疏水的液体、粉末如冷冻千燥生成的粉末、气雾剂、水的或水溶性的组合物、疏水组合物、脂质体组合物、胶粒组合物如基于吐温⑧80或二嵌段共聚物的胶粒组合物、纳米颗粒组合物、聚合体组合物、环糊精配合物组合物、乳液、或基于称为"脂质核Uipocores)"的纳米颗粒的脂质。本发明进一步包括含有药物组合物的组合物，所述药物组合物包括所述NDGA衍生物和药学上可用的载体或赋形剂。这些组合物可包括根据所述NDGA衍生物的所需用途选择的緩冲剂，也可包括其他适于预期用途的物质。本领域技术人员已经能够根据本发明所公开的从本领域已知的种类繁多的緩沖剂中选择适用于预期用途的恰当的緩冲剂。在一些实施例中，所述组合物能够包括本领域已知的种类繁多的药学上可用的赋形剂。在很多出版物中描述了适于本发明使用的药学上可用的赋形剂，包括例如，杰纳罗(杰纳罗，A.,雷明顿《药学的科学与实践》，19版，利平科特，威廉姆斯&威金斯，(1995));安塞尔等(安塞尔，H.C.等，《药物剂型和药物运输系统》，第7版，利平科特，威廉姆斯&威金斯(1999));和凯比(凯比，A.H.,《药物赋形剂手册》，第三版，美国药品协会)。本发明的组合物是根据潜在的给药模式配制的。因此，例如如果所述组合物预期为鼻内或吸入给药，基于本
技术领域：
简便的目的所述组合物可被转化为粉末或者气雾剂形式。其他制剂，例如用于口服或肠胃外运输，因在其本
技术领域：
是常规的也可被使用。(catecholicbutane)的药物组合物用以治疗所述疾病，在所述组合物被与药学上可用的载体和其他可选的赋形剂配制的情况中，其中所述载体包括溶解剂和赋形剂的至少一种，所述助溶剂和赋形剂选自由(a)—种水溶性有机溶剂；(b)—种环糊精(包括一种改性的环糊精)；(c)一种离子、非离子或两亲表面活性剂；(d)—种改性纤维素；(e)—种非水溶性脂质和(a)-(e)的载体的任意组合构成的组。所述水溶性有机溶剂可优选地但不是必需的，是其他的而非二甲亚砜。非限制性实施例性的水溶性有机溶剂包括聚乙二醇("PEG")、例如，PEG300、PEG400或PEG400单月桂酸酯、丙二醇("PG")、聚乙烯吡咯烷酮("PVP，，)、乙醇、苯酚或二曱基乙酰胺。所述环糊精或改性环糊精，不限制于，是a-环糊精、(3-环糊精、Y-环糊精、HP-(3-CD或SBE-P-CD。所述离子、非离子或两亲表面活性剂可包括例如但不限于表面活性剂如非离子表面活性剂聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯(也称为聚山梨酯)，如聚山梨酯20和聚山梨酯80,作为吐温⑧20或吐温⑧80商业可得、d-a-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯("TPGS")、单油酸甘油酯(也称为甘油单油酸酯)、酯化脂肪酸(esterifiedfattyacid)或摩尔比为35:1的环氧乙烷和蓖麻油的反应产物，作为蓖麻油聚氧乙烯35醚(CremophorEL)商业可得。优选地，对于某些实施方案，当表面活性剂是非离子表面活性剂时，所述非离子表面活性剂在没有黄原胶下存在。改性纤维素的非限制性实施例包括乙基纤维素("EC")、羟丙基甲基纤维素("HPMC")、甲基纤维素("MC")或羧基曱基纤维素("CMC")。在本发明的一个实施方案中，所述儿茶酚丁烷(catecholicbutane)可溶解于能在使用前被乙醇("EtOH")稀释的改性纤维素。所述非水溶性脂质包^M"列如一种或多种油，如蓖麻油(castoroil)、芝麻油(Sesameoil)或椒样薄荷油(peppermintoil),—种或多种蜡,如蜂蜡或棕榈蜡，以及混合的脂肪乳液组合物如英脱利匹特(Intralipid)(法玛西亚普强，现在的辉瑞)，根据每制造商的推荐量使用。例如，推荐的成人剂量不超过2g脂肪/kg体重/天(20mL,10mL和6.7mL/kg的英脱利匹特10°/。、20°/。和30%,分别地)。英脱利匹特10%相信在1000mL中含有纯化的大豆油(SoybeanOil)100g、纯化的蛋黄卵磷酯12g、无水甘油22g、加足量注射(injectionq.s.ad)用水至1000mL。用氬氧化钠调节pH值至大约8。英脱利匹特20%相信在1000mL中含有纯化的大豆油(SoybeanOil)200g、纯化的蛋黄卵磷酯12g、无水甘油22g、加足量注射(injectionq.s.ad)用水至1000mL。用氢氧化钠调节pH值至大约8。英脱利匹特30°/。相信在1000mL中含有纯化的大豆油(SoybeanOil)300g、纯化的蛋黄卵磷酯12g、无水甘油16.7g、加足量注射(injectionq.s.ad)用水至1000mL。用氢氧化钠调节pH值至大约7.5。这些英脱利匹特产品存储于25。C以下的控温室并且不应^皮冷冻。本发明的一个实施方案中，所述NDGA衍生物溶解于或者溶解并稀释于不同载体以形成用于动物包括人口服给药的液体组合物。例如，在所述实施方案的一个方面，所述NDGA衍生物溶解于水溶性有机溶剂如PEG300、PEG400或PEG400单月桂酸酯(所述"PEG化合物，，)或PG中。在另一个实施方案中，所述NDGA衍生物溶解于改性环糊精，如HP-|3-CD或SBE-P-CD。在另一个实施方案中，本发明的NDGA衍生物在含有所述PEG化合物和HP-|3-CD的组合制剂中被溶剂化并/或稀释。在另一个实施方案中，本发明的NDGA衍生物被溶解于改性纤维素如HMPC、CMC或EC。在另一个实施方案中，本发明的NDGA^f汙生物;陂溶解于另一个组合制剂，所述组合制剂含有改性环糊精和改性纤维素，举例如HP-P-CD和HPMC或HP-I3-CD和CMC。在另一个实施方案中，所述NDGA衍生物溶解于离子、非离子或两亲表面活性剂如吐温⑧20、吐温⑧80、TPGS或酯化脂肪酸。例如，本发明的化合物能够溶解于单独的TPGS、或单独的吐温⑧20、或如TPGS和PEG400、或吐温⑧20和PEG400的组合。在另一个实施方案中，本发明的NDGA衍生物溶解于非水溶性脂质如蜡、脂肪乳液例如英脱利匹特、或油。例如，本发明的化合物能够溶解于单独的梯又样薄荷油、或椒样薄荷油和吐温⑧20和PEG400、或椒样薄荷油和PEG400、或椒样薄荷油和吐温⑧20、或椒样薄荷油和芝麻油的组合。当然，EC可取代HPMC或CMC或添加到上述实施例中；PEG300或PEG400单月桂酸酯能够耳又代PEG400或添加在上述实施例中；吐温⑧80可取代吐温⑧20或添加到上述实施例中；并且其它油如玉米油、橄榄油、大豆油、矿物油或甘油可耳又代椒样薄荷油或芝麻油或添加到上述实施例中。进一步地，可使用加热，例如，在配制这些组合物中的任一的过程得所述NDGA衍生物均匀分布的悬浮液。在另一个实施方案中，所述的NDGA衍生物可作为固体口服给药，有或没有任何相伴的载体。在一个实施方案中，所述NDGA书f生物如前述的实施例首先溶解于液体载体，然后制成固体组合物作为口服组合物给药。例如，所述NDGA书f生物溶解于改性环糊精如HP-p-CD，并且所述组合物被冷冻干燥生成适合口服给药的粉末。在进一步的实施方案中，所述NDGA衍生物溶解于或者悬浮于TPGS溶液，适当加热以获得均匀分布的溶液或者悬浮液。冷却后，所述组合物变成乳霜状并且适合口服给药。在另一个实施方案中，所述NDGA衍生物溶解于油并且添加虫奪蜡以产生蜡状固体组合物。通常，在制备口服制剂时，在添加其它赋形剂以产生更稳定的组合物前，本发明的NDGA衍生物首先被溶剂化。不稳定的制剂是不利的。不稳定的液体制剂往往形成晶体析出物或者两相溶液。不稳定的固体制剂往往出现颗粒和结块并且有时含有流质的液体。优化的固体制剂光滑、均一并且有窄的熔化温度范围。通常，制剂中赋形剂的比例可影响稳定性。例如，太少的硬化剂如蜂蜡可使所述制剂对于上乘的口服制剂而言过于流质。因此，通常，对于本发明的液体制剂，使用的赋形剂应当是本发明的NDGA衍生物的良好溶剂。换句话说，无需加热所述赋形剂应该能够溶解所述NDGA衍生物。所述赋形剂除了与NDGA衍生物彼此也应该相容以使它们能够形成稳定的溶液、悬浮液或乳液。同样地，通常，对于本发免结块和不均匀的制剂。为了避免固体制剂在质地上所不希望的太流质或不均一，所述赋形剂应该彼此相容以使它们形成光滑均一的固体，甚至在没有所述NDGA衍生物存在的情况下。本发明进一步涉及制造本发明的药物组合物的方法，所述方法涉及生产或提供基本纯化的所述NDGA衍生物，将所述组合物与药学上可用的载体或赋形剂组合，并且用适合预期给药模式的方法配制所述组合物。发现了本发明的化合物和组合物作为各种情况的治疗试剂的用途，例如，希望对患有如恶性的、癌前或前期肿瘤的增殖疾病、病毒疾病、发炎性疾病、代谢性疾病或血管疾病的受治疗者提供治疗的情况。本发明的化合物和组合物能够用于治疗多种胂瘤和癌症，包括但不限于，血液恶性肺瘤如白血病、例如急性或慢性淋巴细胞白血病、急性或慢性髓性白血病、急性或慢性粒细胞白血病、儿童急性白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、恶性皮肤T细胞、蕈样肉芽肿、非恶性纤维化皮肤T细胞淋巴瘤、淋巴瘤样丘渗、T细胞富集皮肤淋巴增生、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、大疱性类天疱疮、盘状红斑纟良疮、扁平苔藓、肾上腺皮质癌、肛门癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨/软组织恶性纤维组织细胞瘤、神经瘤和恶性肿瘤如神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、神经胶质瘤、脑干胶质瘤、脑肿瘤室管膜瘤、髓母细胞瘤、男性和女性乳l泉癌、胃肠道类阑尾癌(carcinoidtumorgastrointestinal)、肾上腺皮质癌、胰岛细胞癌、透明细胞癌、肌腱鞘透明细胞肉瘤、大肠癌、肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、子宫内膜癌、食道癌、尤文家族肿瘤、性腺外生殖细胞瘤、肝外胆管肿瘤、眼癌、眼内恶性黑色素瘤、导管癌、眼癌视网膜母细胞瘤、口腔黏膜增生、侵润口腔肿瘤、胆嚢癌、胃癌、胃肠道类肿瘤、性腺外生殖细胞瘤，生殖细胞瘤，妊娠滋养细胞肺瘤、肝癌、下咽癌、眼内恶性黑色素瘤、月夷岛细月包癌(内分泌胰腺)、卡波西氏肉瘤、喉癌、肝癌、肺肿瘤和癌症力。非小细l包肺癌和小细胞肺癌、恶性间皮瘤、黑色素瘤、梅克尔(Merkel)细胞癌、多发性内分泌肿瘤综合征、蕈样肉芽肺、多发性骨髓瘤、鼻腔肿瘤、副鼻窦癌、鼻咽癌、口腔和唇癌、口咽癌、胰腺癌、曱状旁腺癌、阴茎癌、嗜铬细胞瘤、松果体和幕上原始神经瘤、垂体瘤、胸膜肺母细胞瘤、前列腺癌、直肠癌、肾癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、视网膜母细胞瘤、横乡丈肌肉瘤、唾液腺肺瘤、成人软组织肉瘤、赛扎里(Sezary)综合征、皮肤癌、小肠肿瘤、睾丸肿瘤和癌症、胸腺、曱状腺癌、尿道癌、移行和鳞状细胞泌尿系肿瘤、妇科肺瘤和癌症如子宫颈癌、卵巢肺瘤和癌症、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞肿瘤、子宫癌、子宫内膜癌、阴道癌、外阴癌、原发性巨球蛋白血症、肾母细胞瘤、肝肺瘤包括肝癌("HCC，，)和胆管肿瘤、其他肺肿瘤包括小细胞和透明细胞癌、不同器官的肉瘤；以及其4也癌症和肺瘤。本发明的NDGA书f生物可有效治疗的病毒疾病的非限制性实施例其中举例包括但不限于由人类免疫缺陷病毒(HIV)、人乳头瘤病毒(HPV)(所有亚型)、单纯疱渗病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、带状疱渗病毒、巨细胞病毒、EB病毒(EpsteinBarrvirus)、痘病毒(小痘、牛痘(cowpox)、猴痘、牛痘(vaccinia))、正肝去氧核糖核酸病毒(orthohepadnavirus)、JC病毒、和BK病毒引起的病毒感染。本发明的NDGA衍生物可有效治疗的发炎性疾病的非限制性实施例其中举例包括但不限于类风湿关节炎、骨关节炎、牛皮癣、肉状瘤病、系统性红斑狼痴、斯蒂尔病、嚢性纤维化、慢性阻塞性肺病和炎症性肠疾病如溃疡性结肠炎和克罗恩病。发明的NDGA衍生物可有效治疗的代谢性疾病的非限制性实施例其中举例包括但不限于糖尿病(幼年型和成人型)、尿崩症、X综合征、高脂血症、高胆固醇血症、低血糖、动脉粥样硬化、酮症酸中毒、艾迪生病、库欣综合征、曱状旁腺功能尤进、甲状腺功能亢进症、白细胞无力症和卟啉症。发明的NDGA衍生物可有效治疗的血管疾病的非限制性实施例其中举例包括但不限于肺动脉高压、肺动脉高压、心血管病和黄斑变性。如上所述，有效剂量的所述NDGA衍生物给药至受治疗者，其中"有效剂量，，是指足以产生预期效果的剂量。在一些实施方案中，所述的预期效果是至少减少所述病毒感染或发炎、代谢、或增殖疾病的一种或多种症状。典型地，本发明的组合物含有从少于约0.1%上至约99%的活性成分，也就是本发明的NDGA衍生物；任选地，本发明含有约5%到约90%的所述活性成分。给药的合适剂量取决于被治疗的受治疗者、举例如受治疗者的基本健康状况、受治疗者的年龄、疾病或异常状况的状态、受治疗者的体重。通常，约0.1mg到约500mg可给药至儿童并且约0.1mg到约5g可给药至成人。所述NDGA能够以单剂量或更典型地多剂量给药。本领域技术人员可根据本发明所7>开的通过各种方法容易地确定对给定的试剂的优选剂量。本领域普通技术人员根据本发明所公开的通过路径试验建立剂量响应曲线能够容易地确定其他有效剂量。NDGA衍生物的量当然根据使用的特定的NDGA衍生物以及含有所述NDGA书f生物的制剂的性质和给药路径而变化。所述NDGA的给药频率和剂量将由照顾者根据年龄、体重、疾病状态、健康状态和病人的反应决定。因此，所述试剂可每天一次或多次或简便地决定的合适的所需时长给药。本发明包括有多剂量或单位剂量所述NDGA衍生物的药剂盒。在该药剂盒中，除了装有多剂量或单剂量含有所述NDGA衍生物的组合物的容器，还有它用于特定适应症的使用说明，如信息单或描述药品使用和治疗感兴趣的病理学状态如任何各种发炎、代谢、血管或增殖疾病或病毒感染的相伴效果的包装插入物。除了被注明是预测实施例的那些，本发明现在还被用下面具体的非限制性实施例进行更多细节描述。一般步骤除非另有说明，所有反应在烤箱干燥(120°C)的玻璃器皿中在氮气下进行。丙酮、二氯甲烷、1,4-二噁烷、乙酸乙酯、正己烷和四氢呋喃从迈克卡落迪特化工厂(MallinckrodtChemicalCo.)购得。丙酮用4A分子筛干燥并蒸馏。二氯甲烷、乙酸乙酯和正己烷用CaH2干燥并蒸馏。1，4-二噁烷和四氢呋喃在氮气氛下用钠和二苯甲酮蒸馏干燥。去甲二氢化愈创木酸从FlukaChemicalCo.购得。盐酸4-(2-氯乙基)吗啉、盐酸4-(3-氯丙基)吗啉、单盐酸1-(3-氯丙基)哌啶、单盐酸l-(2-氯乙基)哌啶、2-氯乙醇、(2-氯乙氧基)乙烯、盐酸l-(2-氯乙基)吡咯烷、N,N，-二环己基碳二亚胺(DCC)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)和碳酸钾从AldrichChemicalCo.购^寻。熔点由步琪(Buchi)535熔点仪测得。分析薄板色i普(TLC)在从默克公司(MerckInc.)购得的预涂板(硅胶60F-254)上进行。气相色谱分析在装有25米交联曱基硅橡胶毛细管柱(0.32mm直径)的惠普5890系列n仪器上进行。氮气作为载气使用并且流速在14.0mL/分钟保持恒定。保留时间h在下列条件下测量注射器温度260°C,恒温柱温度280°C。气相色谱和低分辨质"^普分析在装有安捷伦5973网络质量选才奪检测器和毛细HP-1柱的安捷伦科技6890N网络GC系统上进行。用重力柱色谱的纯化通过使用默克试剂硅胶60(颗粒尺寸0.063-0.200mm,70-230目ASTM)进行。所有化合物的纯度由HPLC或GC检测大于99.5%。紫夕卜(UV)光谱在日立IJ3300UV/VIS光谱仪上测量。红外(IR)光语在JascoFT-IR-5300傅立叶变换红外光谱仪上测量。才良道的波数参照聚苯乙烯1601cm—4V及收。吸收强度按照下列简写记录s，强；m,中；w,弱。荧光强度在日立F-450(T荧光光语仪上测量。质子丽R谱使用氘代氯仿作为溶剂和3-(三甲基硅基)丙酸钠作为内标在VarianMercury-400(400MHz)谱仪上测得。C"-丽R谱使用氖代氯仿或重水作为29溶剂在VarianMercury-400(400固z)谙仪上测得。C"化学位移参照CDC13的三重峰的中心(577.Oppm)。多重性按照下列简写记录s,单峰；d，二重峰；t,三重峰；q,四重峰；m,多重峰；J,耦合常数(hertz)。高分辨质谱由JEOLJMS-HX110质谱仪测得。电喷雾离子化质谱(ESI-MS)分析在装有菲尼根-MAT公司菲尼根LCQ的电喷雾离子化源的四级杆离子阱质量分析仪上进行。计算机计算在硅谷图形公司02+工作站上进行。软件ChemofficeUltra10.0^皮用于画化学结构和合成线^^。软件PCModel7.5^皮用于用一致的价力场(CVFF)最小化能量直到最大衍生物小于1.OkcalmolT。实施例11，4-二(3，4-甲緣苯基)-丁烷(C2。H2604，FW=330.42)"化合物A"的合成方法1.Mg/THF2.化学式:C8H9Br02分子量:217.0643%化学式C2oH2g04分+量330.42使用中村等2°的涉及1,4-二碘丁烷和衍生自3,4-二曱氧基溴苯的格氏试剂(Grignardreagent)耦联的^f务饰方法合成所述化合物，产率43%。熔点93-94°C(文献21熔点91-92°C)。HPLC纯度99.25%。'HNMR(CDC13,300MHz):5=1.58-1.68(m，4H)、2.55-2.65(m,4H)、3.85(s，6H)、3.86(s,6H)、6.69(s,2H)、6.70(dd，J=7.9,1.6Hz，2H)、6.78(d,J=7.9Hz，2H)卯m，与所示结构一致。"C雨R(CDC13,75MHz):5=31.1、35.3、55.7、55.9、111.2、111.7、120.1、135.2、147.0、148.7卯m;与所示结构一致。分析C2。H2604,计算值C:72.70,H:7.95;实验值C:72.51,H:7.82。MS(EI)，m/e=331(M+l);与(:2()112604—致。实施例21,4-二(3，4-羟基苯基)丁烷(也称为1，4-二(邻^i酚-4-基)T烷CwIU)4，FW=274.31)"化合物B"的合成方法BBr3100%化学式C2oH2e04分子量330.42化学式c16Hi804分子量274.31通过使用三溴化硼"切断实施例1的产物1,4-二(3，4-甲氧基苯基)丁烷的芳香基的甲氧基合成定量产率的这个化合物。用TLC发现粗产品是纯的，因此它无需进一步纯化用于衍生物的制备。分析用的样品用二氯曱烷和甲醇(95:5,V/V)作为洗脱液的^圭胶柱纯化。熔点140-142°C。HPLC纯度98.5%。4NMR(DMSO—d6,300MHz):5=1.60(t,J=6.5Hz,4H,2CH2)、2.65(t，J=6.5Hz,4H，2CH2)、6.65-6.85(m，6H,6Ar-H)、9.56(brs，4H,40H)ppm;与所示结构一致。13C丽R0)MS0-d6,75MHz):5=31.5、36.3、114.5、115.8、120.1、136.5、143.5、145.5ppm,与所示结构一致。MS(EI),m/e=275(M+l),与d晶A结构一致。分析C16H1804,计算值C:70.06,H:6.61;实验值C:70.31,H:6.82。实施例31，4-二(3，4-乙猛苯基)丁烷(C24H3404，FW=386.52)"化合物C"的合成方法C2H5l/K2C0370%化学式Cl6H1804分子量274.31化学式C24H3404分子量386-52向实施例2的1,4-二(3，4-羟基苯基)丁烷(700mg,2.56mmol)的丙酮溶液(26ml)中添加碳酸钾(2.39g，16.9mmol,6.6当量)和石典乙烷(2.40g,15.4mmol,6.0当量)，并且该混合物加热回;危24小时。反应的TLC表明反应的完成。该反应混合物冷却到室温，过滤并且所得固体用丙酮洗涤。所得合并的滤液减压浓缩。所得残留物用乙酸乙酯(lOOmL)溶解并且用水(50mL)洗涤。所得水层用乙酸乙酯(50mL)再萃取。所得合并的有机萃取液用无水Na2S04干燥，并且减压浓缩得到粗产品(1.06g)，所得粗产品用乙酸乙酯-异丙醇(1:1，6mL)结晶得到纯的晶体产物(700mg,70%产率)。熔点113-115°C。HPLC纯度98.50%。力NMR(CDC13，300MHz):5=1.43(t,J=6.8Hz,6H)、1.44(t,J=6.8Hz，6H)、1.61-1.65(m,4H)、2.40-2.60(m，4H)、4.06(q,J=6.8Hz,4H)、4.07(q,J=6.8Hz，4H)、6.63-6.72(m，4H)、6.79(d,J=8.2Hz,2H)ppm;与所示结构一致。13CNMR(CDC13,75MHz):5=14.9、31.1、35.3、64.5、64.7、113.9、114.2、120.4、135.5、146.8、148.6ppm;与所示结构一致。分析C2AA计算值C:74.57，H:8.88;实一验值C:74.78,H:8.75,与所示结构一致。实施例41,4-二{3，4-二[3-(哌啶-1-基)丙氧基]苯基}-丁烷(C"H7SN404，FW=775.16)"化合物D"的合成方法本化合物可用至少两种方法合成。方法l:使用碳酸钾作为一种催化剂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>向1,4-二(3，4-羟基苯基)丁烷(1.10g,4.0mmol)的丙酮(40mL)溶液中添加碳酸钾(13.25g,96mmol,24当量)和N-(3-氯丙基)哌啶盐酸(9.5g，48mmol，12当量)和石典化钠(2.4g，16mmol,4当量)，并且该混合物纟皮加热回流40小时。TLC监测该反应的完成。反应混合物被过滤并且所得固体用丙酮洗涤。所得合并滤液真空浓缩。己烷(200mL)寻皮加到所得残留物中，并且所得混合物在一台Rotavapor装置中在60。C加热15分钟。所得己烷层被移出并且对所剩残留物的该才乘作再重复两次。所得合并的己烷萃取液减压浓缩以得到粗产品。所得粗产品用己烷乙酸乙酯三乙胺(5:5:0.5)到乙酸乙酯曱醇三乙胺(9:1:0.5)作为梯度洗脱液的硅胶(250g)纯化，以产生白色固体的纯的产物(1.56g,产率50.4%)。它进一步用乙酸乙酯-己烷结晶以得到一种晶体产物(1.03g)。熔点91-93°C。HPLC纯度99.43°/。。力丽R(CDCh，100MHz):5=1.38-1.50(m，8H)、1.53-1.68(m,20H)、1.95-2.07(m,8H)、2.35-2.60(m,28H)、3.9(t,J=6.4Hz，4H)、4.0(t，J=6.4Hz，4H)、6.63-6.72(m,4H)、6.77(d,J=8.0Hz,2H)ppm,与所示结构一至丈。13CNMR(CDC13,75MHz):5=24.5、27.0、31.3、35.4、54.7、56.2、67.9、68.1、114.4、114.7、120.6、135.7、147.1、149.0ppm，与所示结构一致。分析C4SH78N404,计算值C:74.37,H:10.16，N:7.23;实验值C:74.07，H:10.06,N:7.13。MS(ESI):m/z=803.7(M+H)+、802.7(M)、678.6、402.4、126.0,与所示结构一致。方法2:^^用氢化钠作为一种催化剂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>向1，4-二(3,4-二羟基苯基)丁烷(13.0g,45.78mmol)的无水DMF(1L)溶液中添加60。/。的氢化钠石蜡悬浮液(9.9g，248mmol,5.4当量)，并且该混合物在65。C加热1小时。然后该混合物冷却到室温，加入N-(3-氯丙基)哌啶盐酸(37.0g,229腿o1,5.0当量)和碘化钠(6.9g,46mmol,1等量)，并且该混合物在室温搅拌120小时。TLC监测完全转化成该产物。反应的后续操作通过将该反应混合物緩慢加入水(3L)和二乙醚(2.5L)中进行。水层再次用二乙醚(2L)萃取。合并的有机萃取物用浓盐水(750mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并且减压浓缩。粗产物用硅胶柱色谱纯化。该柱用硅胶(500g)和混合溶剂乙酸乙酯甲醇三乙胺(93:2:5)填柱，并用乙酸乙酯曱醇三乙胺(93:2:5到91:4:5)梯度洗脱以产生白色固体的产物(26.7g，产率75.4°/。)。该产物用乙酸乙酯己烷结晶以产生晶体化合物(21.4g)。分析数据与方法1制备的样品获得的分析数据相同。实施例51,4-二{3，4-二[3-(哌啶-1-基)丙氧基]苯基}-丁烷四盐酸盐(C48H78N4044HC1，FW=921.00)"化合物E"的合成方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>向水冷却的(0-5°C)的浓HC1水溶液(7.0mL11NHC1，77mmol,24mol当量)的95%乙醇(21mL)溶液滴加1,4-二{3，4-二[3-(派咬-l-基)丙氧基]苯基)-丁烷(2.50g，3.225mmol)的95%乙醇(21mL)*的溶液。该溶液在0-5。C搅拌三小时并且在水浴温度保持在45。C的旋转蒸发器中除去溶剂。所得盐酸盐高真空干燥48小时。所得粗产品用乙醇:乙醚结晶在72小时高真空干燥后得2.46g产品(83.2%产率)。*注原料1，4-二{3，4-二[3-(哌啶-l-基)丙氧基]苯基}-丁烷室温下不完全溶于95%乙醇，所以该混合物加热到45。C使l,4-二(3,4-二[3-(哌咬-1-基)丙氧基]苯基}-丁烷溶解。溶液冷却到室温并且添加到乙醇的HC1溶液中。该产品的分析数据如下。熔点270-280°C(分解)。HPLC纯度98.5°/。。卡尔'费^f木库仑法测定水分(MoisturecontentbyKarlFishermethod):2.4974%。元素分析C48H82N404C14,要求值C:62.59，H:8.97,和N:6.08;实-验值C:62.38，H:9.30,和N:5.89滴定法测定氯元素(无水基底)理论值15.40%;实验值15.44%(理i仑值的100.3%)。^NMR(D20，300MHz):5=1.25-1.50(m，8H)、1.55-1.75(m，12H)、1.82(d，J=14.4Hz，8H)、2.06—2.10(m，8H)、2.39(s，4H)、2.76(t,J=12.1Hz，8H)、3.11(q,J=7.8Hz，8H)、3.39(d,J=11.6Hz，8H)、3.98-4.00(m，8H)、6.64(dd,J=1.8，8.0Hz，2H)、6.79(d,J=1.8Hz，2M)、6.84(d，J=8.0,2H)ppm;与所示结构一致。13CNMR(D20，100MHz):5=24.5、27.0、31.3、35.4、54.7、56.2、67.9、68.1、114.4、114.7、120.6、135.7、147.1、149.0ppm;与所示结构一致。MS(ESI),m/z=777(M++2),775(M+);与游离碱C48H78N404(775.16)结构一致。实施例61，4-二{3，4-二[2-(1-甲基-哌嚷-4-基)乙氧基]苯基}-丁烷(C44H74N804，FW=779.21)"化合物F"的合成方法35分子量779.11化学式C7H15CIN2分子量162.66步骤l:N，-甲基-N-2-氯乙基哌嚷从它的二盐酸盐的合成方法N，-曱基1-2-氯乙基哌溱二盐酸(10.0g,45.4mmol)緩慢加到50%碳酸钾水溶液(200mL)和乙醚(200mL)的一种混合液中，并且该混合物搅拌30分钟，分层，水层用乙醚(2x200mL)萃取。合并的有机萃取液用无水硫酸钠干燥并且浓缩得到N，-甲基-N-2-氯乙基哌嗪(6.2g)。步骤2:1，4-二{3，4-二[2-(1-甲基-艰嚷-4-基)乙氧基]苯基}-丁烷的合成方法向化合物2(1.0g，3.65mmol)的丙酮(40mL)溶液中添加无水碳酸钾(2.52g，18.25mmo1,5当量)和N，-甲基-N-2-氯乙基哌溱(2.90g,18.25mmol)，并且该混合物被加热回流。36小时后，添加额外量的碳酸钾(2.528g)和N，-曱基-N-2-氯乙基哌。秦(2.90g)并且再继续回流36小时。反应混合物冷却到室温，过滤，用丙酮(200mL)洗涤并且浓缩。所得粗产品用分别地85:10:5到65:30:5的CH2C12:MeOH:Et3N作为梯度洗脱液的硅胶(250g)纯化，以得到所需产物(0.88g,产率31.1%)。它进一步用乙酸乙酯-己烷结晶纯化。HPLC纯度99.67%.力丽R(CDC13，300MHz):5=1.55-1.63(m，4H)、2.28(s,6H)、2.29(s，6H)、2.33-2.63(m，36H)、2.81(t,J=6.0Hz，4H)、2.82(t,J=6.0Hz，4H)、4.10(q，J=6.0Hz，8H)、6.67(dd，J=8.2Hz和1.7Hz,2H)、6.70(d,J=1.7Hz，2H)、6.78(d,J=8.2Hz，2H)36ppm;与所示结构一至丈。13C丽R(CDC13,75MHz):5=31.2、35.3、46.1、53.7、55.1、57.3、67.3、67.4、114.4、114.7、120.9、146.0、147.9、148.7ppm;与所示结构一致。分析C44H74Ns04，计算值C:67.83,H:9.59和N:14.39;实验值C:67.53，H:9.71和N:14.03。实施例71，4-二{3，4-二(2-曱基-噻唑-4-基-甲氧基)苯基}丁烷四盐酸盐(C36H3SN404S4'4HC1，FW=718.97)"化合物G"的合成方法化学式C36H幼N404S4分子量718.97首先，4-氯甲基-2-甲基噻唑由它的盐酸盐制备。这通过将4-氯甲基-2-甲基p塞唑盐酸盐(2.5g,13.5mmol)加入50。M灰酸钾水溶液和乙醚(每种30mL)完成。该混合物在室温搅拌15分钟。分离所述有机层，用无水K2C03干燥并且浓缩得到4-氯曱基-2-曱基噻唑(2.01g)。它被用于下面的1,4-二{3,4-二(2-甲基-噻唑-4-基-甲氧基)苯基)丁烷四盐酸盐向一种冰冷的实施例2的1，4-二(3，4-羟基苯基)丁烷(616mg,2.25mmol)的DMF(15mL)溶液中添加60%的氢化钠石蜡(541mg,13.5mmol,6mol当量)悬浮液。该混合物在0。C下搅拌30分钟然后在室温下搅拌30分钟。然后加入4-氯甲基-2-甲基噻唑(2.01g,13.5mmol,6mol当量)的DMF(5mL)溶液并且该反应混合物在室温搅拌16小时。向该反应混合物加入饱和NH4C1水溶液(150mL)和乙醚(350mL)。摇匀后，分离有机层，并且用乙醚(150mL)萃取水层。合并的有机层和萃取液用水(50mL)和浓盐水(50mL)洗涤，用无水Na2S04干燥并减压浓缩得到粗产物。所得粗产物以己烷乙酸乙酯(50:50到0:100)作为洗脱液用硅胶(250g)的硅胶柱色谱纯化以产生白色固体产物(0.88g,54.3%产率)。该产物进一步用乙酸乙酯-己烷结晶纯化。熔点96-98°C。HPLC纯度:99.99%。4丽R(CDC13)1.51-1.61(m，4H)、2.48-2.60(m，4H)、2.71(s，6H)、2.72(s,6H)、5.20(s，4H)、5.22(s，4H)、6.69(dd,J=8.2Hz，1.8，2H)、6.80(d，Jl.8Hz,2H)、6.88(d，J=8.2Hz，2H)、7.18(s,4H)ppm;与所示结构一致。13C丽R(CDC13)19.1、30.9、35.2、67.8、68.0、115.3、115.4、115.6、115.7、121.5、136.4、146.8、148.5、152.4、152.5、166.1ppm;与所示结构一致。分析(:361138仏0434计算值:C:60.13,H:5.34，和N:7.79。实验值C60.07，H5.22,和N:7.70。实施例81，4-二{3，4-二(2-(N，N，-二曱基氨基)-乙氧基]苯基}-丁烷(C32H54N404，FW=558.41)"化合物H"的合成方法isCI化学式CwH，s04分子量274.31化学式C4H10CINHf:107.58化学式C32Hs即4分子f:558.80向1,4-二(3，4-二羟基苯基)-丁烷(1.096g,4醒ol)的丙酮(40mL)溶液中添加无水碳酸钾(6.64g,48腿ol)和二甲氨基氯乙烷盐酸盐(3.46g,24mmol)，并且该混合物被加热回流。12小时后，添加额外量的碳酸钾(6.g)和二甲氨基氯乙烷盐酸盐(3.46g)并且反应混合物加热回流64小时。反应混合物的TLC表明反应完成。反应混合物冷却到室温，过滤，用丙酮(150mL)洗涤并且浓缩。所得粗产品用分别地94:1:5到85:10:5的CH2C12:MeOH:Et3N作为梯度洗脱液的珪胶(250g)柱层析纯化，以得到所需产物(1.28g,产率57.8%)。这种原料用乙酸乙酯-己烷结晶得到进一步更纯的产物(300rag)。熔点65-67°C。HPLC纯度99.04%。力丽R(CDCh,300MHz):5=1.59-1.63(m,4H)、2.33(s，12H)、2.34(s,12H)、2.50-2.56(m,4H)、2.73(t，J=6.lHz,4H)、2.74(m,J=6.lHz,4H)、4.07(q,J=6.lHz,8H)、6.68(dd,J=7.9Hz,1.9Hz,2H)、6.71(d，J=1.9Hz，2H)、6.80(d,J=7.9Hz，2H)ppm;与所示结构一致。13C丽R(CDCh，75MHz):5=31.1、35.3、45.9、46.1、58.3、67.8、67.191、4.6、114.9、120.9、136.0、147.1、148.9ppm，与所示结构一致。分析C32H5404N4,计算值C:68.78，H:9.76,和N:10.03;实验值:C:69.82，H:9.85,和N:9.83。如下列预测实施例A-R显示的，额外的化学反应能够实现以根据本发明的实施方案合成化合物。预测实施例A1，4-二_3，4-幾基苯基)丁烷(或者称为1，4-二(邻苯二酚-4-基)-丁烷)在实施例2中的"化合物B，，的另外的合成方法预测实施例B391，4-二{3，4-二[2-(哌咬-l-基)乙氧基]苯基}丁烷四盐酸盐；游离碱(C44H7。N404，FW=719.05)和4HC1盐(d线MHCl，FW=864.89)的合成方法i-(2-氯乙基)哌啶2、04HCI化学式C"H74Cl4N404分子量864.89预测实施例c1，4-二{3，4-二[3-(C44H7。N408，FW=783.合成方法(吗啉-1-基)丙氧基]苯基}-丁烷四盐酸盐游离碱05);4HC1盐(C44H7。N408'4HC1，FW=928.89)的NCIO、4-(3-氯丙基)吗啉4HCI化学式0^74，408:928.89预测实施例D1，4-二{3，4-二[2-(C4。H62线，FW=726合成方法(吗啉-l-基)乙*1&]苯基}-丁烷四盐酸盐游离碱94);4HC1盐(C40H62N408'4HC1，FW=872.79)的,,ci4-(2-氯乙基)吗啉o.化学式C恥H66CI4n!^C分4"量872.7940预测实施例E1，4-二{3，4-二[2-(吡咯-l-基)乙氧基]苯基}-丁烷四盐酸盐游离碱(C4。H62N404，FW=662.94);4HC1盐(C4。H62N404MHC1,FW=808.79)的合成方法分子量808.79预测实施例F1，4-二{3，4-二[2-(1-甲基-p底溱-4-基)乙氧基]苯基}-丁烷四盐酸盐游离碱(。41174&04，FW=779.11);4HC1盐(C44H74N804'4HC1，FW=924.95)的合成方法化学式C44H78CI4N804分子量924邻5预测实施例G1，4-二{3，4-二(2-羟基乙緣)苯基}-丁烷游离碱(C24H3408，FW=450.23)的合成方法方法l广OH分子量450.52预测实施例H1，4-二{3，4-二(2-(N，N，-二(2-羟乙基)乙氧基)苯基}-丁烷四盐酸盐游离碱(C4。H7。N4012，FW=799.00);4HC1盐(C4。H7。N4012MHC1,FW=944.85)的合成方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage43</formula>预测实施例I1，4-二{3，4-二[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]苯基}-丁烷游离碱(C32H5。012，FW=626.73)的合成方法化学式分子量626-73预测实施例J1，4-二{3，4-二[2-(哌咬-l-基)乙基氨甲酰氧]苯基}-丁烷四盐酸盐游离碱(。7肌FW-890.15);4HC1盐(C48H74N808'4HC1，FW-1036.99)的合成方法方法l43<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>预测实施例K1，4-二{3，4-二[2-(吗啉-l-基)乙基氨甲酰氧]苯基}-丁烷四盐酸盐游离碱(04411661^012，FW=899.04);4HC1盐(C44H66N8012'4HC1，FW=1044.89)的合成方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>化学式C48H78CI4N808分子量1。36,99H4HCI化学式C44H70CI4N8O12分4"量1044.89预测实施例L1，4-二{3，4-二[(2-N，N-二曱基絲乙基)氨甲酰氧]苯基}-丁烷游离碱(C36H58Ns08，FW=730.89)的合成方法。hA2-异氰酸-N,N-二曱基乙胺化学式-CseHggNsOB分子量730.89预测实施例M1，4-二{3，4-二[(呋喃-2-基)曱基-氨甲酰氧]苯基}-丁烷游离碱(C4。H38N4012，FW=766.75)的合成方法预测实施例N1，4-二(3,4-二曱氧苯基)-2，3-二(氯曱基)-(2S，3R)-丁烷(C22H28C1204，FW=427.36)的合成方法2,3-二(羟曱基)-l，4-二(3,化学式C22H28a2044-二曱氧苯基)-丁烷分子量427.36预测实施例o1，4-二(3，4-(C22H28Br2()4，FW=二曱氧苯基)-2，3-二(溴甲基)-(2S，3R)-丁烷516.26)的合成方法2，3-二(羟曱基)-1，4-二(3，4-二甲氧苯基)-丁烷化学式C22H28Br204分子量516.26预测实施例P1，4-二(3，4-二甲氧苯基)-2，3-二(氟曱基)-(2S，3R)-丁烷(C22H28F20FW=394.45)的合成方法2，3-二(鞋甲基)—1,4-二(3,化学式C22H28F2044-二曱氧苯基)丁烷分子量394.45<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>预测实施例Q1，4-二(3，4-二曱氧苯基)-2，3-二甲絲-(2S，3R)-丁烷((^HmO,FW=386.44)的合成方法分子量386.44<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>预测实施例R1，4-二(3，4-二甲氧苯基)-2，3-二^J^(2S，3R)-丁烷(C22H24N204，FW=380.44)的合成方法化学式C22H24N204分子量380.44<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>根据进行的一般实验，下面涉及体外细胞毒性和有效性研究的具体的非限定性实施例将进一步描述本发明。细胞毒性和有效性研究本发明的具体化合物已经进行体外研究。所述的体外研究已表明本发明的各种类型的NDGA衍生物能安全有效地用于病毒感染或增值、发炎、代谢或血管疾病的预防或患后治疗。下列实施例解释该测试涉及的所述研究。细胞毒性研究针对细胞毒性进行的研究包括已知的MTS、台盼蓝(TrypanBlue)和MTT实验。MTS实验使用CellTiter96⑧AQ，us单溶液细胞增殖检测(普洛麦格生物技术有限公司，麦迪逊，威斯康星，美国)完成。有代谢活性即存活的细胞使MTS,四唑化合物(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑，内盐)变为可溶于组织培养基的有色甲暨。所述甲暨的吸收的测量在490nm读取。待用试剂被直接加至96孔板的基质中的细胞，培养1-4小时并且通过板读取器记录结果。IC5。通过对采集数据作图获得。IC5。是与空白实验比较能够抑制测试材料的生长或存活的50°/。的测试材料的浓度。在台盼蓝测试中，细胞被胰蛋白酶化并且样品被添加到台盼蓝染料和生理盐水的溶液中。存活的细胞能够保持该染料在它们的细胞膜外，而受损或者死亡的细胞则不能。计数存活和非存活(蓝色)的细胞，并且计算存活百分比。增殖率使用来自安慰剂处理过的细胞的值计算，并且比较处理过的细胞和未处理过的细胞的存活率。MTT测试是一种用以决定存活细胞的数目的比色法。有代谢活性的细胞使MTT试剂，(3-(4，5-二曱基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物)变为可溶于二甲亚砜(DMSO)的紫色甲暨晶体。所述MTT试剂被添加到MTT(无色)介质中。将该介质加到细胞并且培养4小时。将DMSO加到细胞并混合。然后有色溶液在540nm读值，在630mn处校正。ICs。通过采集的数据作图获得。抗病毒活性SEAP测试抗病毒活性使用SEAP(分泌型碱性磷酸酶)测试决定，所述测试中细胞与SEAP和TAT质粒共转染。TAT是人类免疫缺陷病毒(HIV)基因表达的反式激活因子并且是两个或者多个对于HIV基因表达必需的病毒调节因子(TAT和REV)之一。TAT通过与TARRNA元件结合并且激活长末端重复序列(LTR)启动子的转录来起作用。TAT蛋白稳定转录的延伸并且也已显示与转录开启有关。之前的研究已经显示TAT是抗体-依赖型T细胞增殖减少的媒介，基本上导致免疫反应的失败。TAT也直接刺激卡波希细胞(Kaposi"cell)生长。因为TAT没有明显的细胞同系物，这一强正性调节因子已经成为用于抗AIDS药物发展的非常有吸引力的目标。与现有HIV逆转录抑制因子(AZT,DDI)或阻止新一轮感染的潜在蛋白酶抑制因子相比，遏制病毒基因TAT调节的完整前病毒DNA表达的抑制因子将在早期抑制病毒(苏(Hsu)等，《科学》(Science)254:1799-1802,1991)。意于阐明在宿主真核细胞内转录和转录后水平控制基因表达的因子的努力最近已经使TAT功能的定量评估成为可能(山姆，《纽约科学学院年报》(Ann.N.Y.Acad.Sci.)616:64-70，1990)。为了筛选TAT调节的转录激活(TAT-TRS)的抑制因子，SEAP报告基因,皮置于质粒pBC12/HIV/SEAP中HIV-1LTR启动子的控制下。TAT-编码的活性通过第二质粒构建pBC12/CMV/t2提供。COS-7细胞和这两种质粒的瞬间共转染导致碱性磷酸酶分泌到通过简单比色测试分析的培养基中(伯格等，《基因》(Gene)66:1-10,1988)。因此，SEAP测试提供了TAT转录激活的间接测定。在SEAP测试中，抑制因子应当通过TAT蛋白(TAT-TRS)引起通过HIV-1LTR启动子的转录激活降低SEAP报告基因表达。TAT蛋白在巨细胞病毒启动子的控制下表达，并且诱导非内源性的抗热型的分泌型碱性磷酸酶的表达。如果TAT转录激活被药物阻止，SEAP报告因子将不会分泌到基质。由对硝基苯磷酸底物在405nm处对SEAP进行比色检测。参看Gnabre13。由MTT测试分析细胞以比较对于SEAP抑制作用的细胞毒性。目的是所述药物能够抑制SEAP,而没有太大的毒性。抗增殖活性使用涉及基于DNA片段的细胞凋亡的TiterTACS⑧凋亡检测试剂盒(安迪生物科技有限公司U&DSystemsInc.),明尼阿波利斯，明尼苏达，美国)和ELISAVEGF(血管上皮生长因子)和凋亡抑制蛋白(survivin)测试来测定抗增殖活性。在DNA片段测试中，细胞凋亡原位检测特别地由TiterTACS⑧96-孔凋亡检测试剂盒,批次号TA600(R&DSystemsInc.)完成。TiterTACS测试在无需使用比色检测直接计数标记细胞下提供培养的细胞的凋亡定量分析。细胞经测试化合物处理，未处理的作为实验阴性对照，或者经TACS核酸酶处理作为阳性对照。TACS核酸酶允许对每个实验系统产生阳性对照在标记前用TACS核酸酶简要处理细胞在每个细胞内产生DNA分裂，以提供特别针对所研究体系的适当的阳性对照。催化dNTPs添加到DNA片段的TdT酶允许使用辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(streptavidin-HRP)溶液及随后的TACS-蓝宝(TACS-Sapphire)底物在450nm的比色检测。在450nm处的强吸收表明细胞的凋亡。处理过的细胞与未处理的细胞和核酸切开的细胞相比较以判断凋亡的程度。ELISA(酶联免疫吸附试验)VEGF研究按照制造商的使用Endogen人VEGFELISA试剂盒，批号EHVEGF(皮尔斯生物科4支/>司(PierceBiotechnology,Inc.),罗克福德，伊利诺伊，美国)的说明完成。通过用去铁敏(DFO)处理细胞创造用于该细胞的低氧状态，该状态螯合离子并引起细胞分泌VEGF到基质。上清液(基质)被移除并且冷冻用以测试，并且细胞被用台盼蓝试验计数以致所得结果能够被正态化到细胞数。VEGF由三明治ELISA测量，所述三明治ELISA能够捕获在抗体覆盖的微板上基质中的蛋白，然后使用生物素化的抗体试剂检测该蛋白。由标准曲线获得的结果能够使使用者量化每个样品中蛋白的数量。ELISA-凋亡抑制蛋白测试凋亡抑制蛋白是在很多人的癌中但不在正常成人组织中大量表达的凋亡抑制因子，并且被认为是可能的细胞死亡/存活的终结效应期的调节因子。凋亡抑制蛋白以细胞循环依赖方式在G2-M中表达，直接与有丝分裂纺锤体微管结合。已显示的是在细胞分裂阶段保持细胞存活可能需要Thr34的凋亡抑制蛋白磷酸化作用，磷酸化作用缺陷的凋亡抑制蛋白突变体的表达已经显示出在几种人黑色素细胞系引起凋亡。磷酸化的凋亡抑制蛋白对半胱天冬酶通路起作用以抑制半胱天冬酶-3和半胱天冬酶-9的形成，因而抑制凋亡。因此，减少凋亡抑制蛋白表达的化合物预期将提高凋亡和细月包死亡率。按照制造商的使用SurveyorIC人全凋亡抑制蛋白免疫测试，批号SUV647(R&DSystems,Inc.)的说明研究测试的化合物对凋亡抑制蛋白的效果。为了凋亡抑制蛋白蛋白含量分析细胞溶胞产物。所述试剂盒包括覆有特别针对凋亡抑制蛋白的抗体的板和可识别结合到板上的凋亡抑制蛋白的生物素化的抗体试剂。所述板在板读取器设定的450nm处读取和在540nm处校正。根据布拉德福德(Bradford)方法(布拉德福德，M.1976,分析生物化学(AnalBiochem)72:248-254)的蛋白实验被用于根据全蛋白含量量化和正态化样品。由标准曲线获得的结果能够使使用者量化每个样品中凋亡抑制蛋白蛋白的数量。抗发炎活性基于测试的化合物对初级人表皮细胞(PHKs)的效果测定抗发炎活性。PHKs在发炎过程中具有重要的作用，合成大量细胞因子、粘合分子和生长因子。研究被完成以测定测试化合物是否能够抑制表皮细胞从而阻止或减少y干扰素(IFN-y)、白细胞介素-8(IL-8)、肺瘤坏死因子oc(TNF-a)、粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、细胞间翁附分子-1(ICAM-l,也是CD54)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的产生。PHKs首先由TNF-a处理以诱导致前炎症状态和前炎症细胞因子的释放。随后按照制造商的使用R&DSystems,Inc.的蛋白测试(QuantikineELISA试剂盒；批号MCP-I试剂盒DCPOO，GM-CSF试剂盒:DGM00,和IFN-y:DIF50)的说明测试特异性细胞因子。涉及抗病毒和抗增殖活性的细胞毒性研究的一般实验测试从ATCC获得并且根据ATCC指示保存的三个细胞系HeLa(宫颈腺癌)、A549(肺癌)、和C0S-7(SV40移植的猴肾)。这些细胞系的研究被认为是测试的物质对哺乳动物包括人的疾病的效果的指示物。所有化合物溶解于DMS0并且DMS0作为安慰剂使用。所述样品首先溶于DMS0成为lOmM稀释液，然后进一步稀释为5、1、0.5、0.1、0.05、51和0.01mM溶液。这些溶液以1%浓度(1|u1比100ju1基质)被加到基质用以以IOO、50、10、5、1、0.5和0.1juM化合物来处理细胞。净皮发现有低IQ的化合物进一步用DMS0稀释。溶液特别是IOraM溶液在使用前检查沉淀。如果有沉淀物，所述溶液被加热到65。C并且加到加热的基质。100pl基质的L5-8xl04细胞被接种在96-孔板的孔中，并且过夜培养。所述板的孔的外侧孔填有200jal无菌去离子(DI)水以抑制基质挥发。24小时后，测试化学品在基质中以1%基质体积的浓度制备。所述测试样品基质在加入100jul每孔前纟皮用移液管混合。基质纟皮加到"仅基质"孑L。所述孔板和它的内容物被培养24-72小时，取决于所进行的研究。在MTS测试的日子，MTS试剂被从冷藏拒取出并且放至室温。使用多通道移液管，20ju1的MTS试剂被加到每个孔并且培养一到四小时。从培养器内一小时后直到空白孔是约0.20D,该板参照690nm波长在490nm读取。所得结果随后扫描到设计用于在数据输入后进行所有需要的计算的MicrosoftExcel⑧才莫板。4全查所得数据的统计4晉误；包括在所该组数据点的中间值的10%以内数据点。空白("仅基质")的平均值被扣除并且所得数据插入代表处理/未处理的生长响应的表格。SEAP实验下述SEAP实验作为报告系统用以测量HIV转录的TAT-介导转录激活的活性。MTT测试测量细胞增殖并且用于证实SEAP活性的水平不单取决于细胞毒性。这些测试被用于筛选可作为抗病毒剂尤其是抗HIV候选物的潜在的药物化合物。C0S-7(绿猴肾)细胞使用Fugene6试剂(罗氏应用科学，批号11815091001,印第安纳波利斯，印第安纳州，美国)和两种质粒共转染pHIVSEAP(在HIVLTR促进因子控制下SEAP表达媒介)和pCTAT(在CMV(细胞巨大型病毒)促进因子控制下HIVTAT转录因子表达媒介)。在测试化合物处理48小时后，在添加对-硝基苯磷酸底物后在405nm测试样品SEAP活性。SEAP活性抑制的百分比根据安慰剂对照进行计算。实施例9SEAP/MTT和MTS研究-细胞毒性和抗病毒有效性基于上面提到的一般实验，对上述实施例指示的化合物的SEAP/MTT和MTS研究结果在下面的表3中给出，其中左边的一栏是测定的测试化合物并且ECs。显示有对照组的效果的50%的该化合物的浓度。ICs。如前述定义。表3化合物SEAPEC5()C0S-7IC5。A549IC5。HeLaIC5。A>100jaM>100ijM>100jaM>100juMC>100jaM>100juM>100iaM>100iuMD0.7-0.8juM0.8-0.9iuM1-2juM5_6jliME9juM5-10jaMF>100jaM>100iuMG>100juM>100jaMH30-40juM20-30iaM20-40juM20-30iaM表3显示了使用作为细胞存活性指示物的MTS测试所测定的在两个细胞系中具有生物活性的化合物的结果。IC"农度显示了这些化合物对细胞存活的抑制作用的不同程度。以剂量依赖型方式所有化合物能够减少细胞存活性因而导致凋亡。化合物D在A549和HeLa细胞中显示最强的细胞存活性抑制作用，而它的盐酸盐(化合物E)在两种细胞系中显示第二强的抑制作用。由SEAP测试决定的TAT转录激活的抑制作用的程度同样在化合物间变化，如表3所示。化合物D在O.7-0.8pM之间的E"显示出了其明显的抗病毒活性。通过MTT测试的测试细胞(C0S-7)中细胞存活性的抑制浓度通常与TAT-转录激活的有效浓度类似。实施例10基于TiterTACS,VEGA和凋亡抑制蛋白凋亡研究的抗增殖活性基于上面的一般实验，关于上面实施例指示的化合物的TiterTACSDNA片段,ELISAVEGA和ELISA凋亡抑制蛋白凋亡研究的结53果在表4中给出。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>阳性=诱导凋亡阴性-未诱导凋亡测试的化合物在低的微摩浓度下已经显示出明显降低凋亡抑制蛋白蛋白的水平。所以，它们在DNA片段实验中也显示出强凋亡诱导作用。化合物H减少凋亡抑制蛋白蛋白表达因而能够诱导凋亡。化合物D也是凋亡的诱导因子。这些化合物能够以剂量依赖型方式减少凋亡抑制蛋白并且诱导凋亡。化合物H是凋亡抑制蛋白蛋白生产的最强蛋白抑制剂，其对于凋亡抑制蛋白生成的ICs。在25mM左右。VEGF蛋白的释放同样被这些化合物减弱。VEGF蛋白生成的抑制对于化合物D在低的微摩浓度范围内。观察到所有化合物以剂量依赖型方式的抑制作用。化合物D显示出的对VEGF生成的ICs。在约4jaM,而化合物H显示出的对VEGF生成的ICs。高于60jaM。表4的结果表明本发明的化合物在测试的细胞系中在抑制病毒活性和导致细胞死亡(凋亡)方面是有效的。在测试的化合物中，化合物D、E和H由于它们更低的ECs。和ICs。值显示出比其他化合物更为有效。化合物D表现的最为有效。实施例11美国国家癌症中心DTP人肺瘤细胞系筛选美国国家癌症中心(NCI)提供发展治疗项目(DTP)(http://dtp.nci.mh.gov/branches/btb/ivclsp.himl)来筛选提交的物质以支持癌症药物发现。体外细胞系筛选项目(IVCLSP)是为DTP抗癌药物发现项目提供直接支持的专门服务并且被设计用于筛选上至每年3000化合物的潜在抗癌活性。这一筛选的运作利用60中不同的人胂瘤细胞系，代表白血病、黑色素瘤、肺癌、结肠癌、脑癌、卯巢癌、乳腺癌、前列腺癌和肾癌。目的在于为了进一步评估优先考虑显示出选择性生长抑制作用或特定肿瘤细胞系的细胞杀死的合成化合物或天然产物样品。这一筛选独特于由给定化合物产生的60细胞系剂量响应的复杂性导致能够用于模式识别算法的生物学响应模式(COMPARE项目，参看http://dtp.nci.nih.gov/docs/compare/compare.html)。使用这些算法，可能将推定的作用机制赋予测试化合物，或者确定响应模式是独特的并与包含在NCI数据库里的任何标准原型化合物不相似。此外，随着各种细胞分子靶在60细胞系的表征，选择最可能与特定分子靶作用的化合物是可能的。所述篩选是两阶段过程，始于所有化合物以10pM单剂量对抗60细胞系的评估。从该单剂量篩选的结果被报告作为中间值图并且可用于使用COMPARE项目的分析。显示明显生长抑制作用的化合物^L以五个浓度水平对抗60细胞系进行评估。体外癌症筛选方法学癌症筛选板的人肿瘤细胞系在含有5%胎牛血清和2mML-谷氨酰胺的RPMI1640基质中生长。对于典型的筛选试-验，细月包以在5000到40000细胞每孔范围的平板密度被接种到100iaL的96孔微升板，取决于每个细胞系的倍增时间。在细胞接种后，该微升板在加入试验药物前在37°C、50线、95%空气和IOO財目对湿度下培养24小时。在24小时后，每个细胞系的两个板被用三氯乙酸(TCA)原位固定，以进行在药物添加时间(Tz)对每个细胞系的细胞数目的测量。试验药物以需要的最终最大测试浓度的400倍溶于DMSO并且使用前冷冻存储。在添加药物的时候，一等份的冷冻浓缩液被解冻并且用含有50jag/ml庆大霉素(gentamicin)的完全基质稀释到两倍于需要的最终最大测试浓度。额外四倍、IO倍或者1/21og的系列稀释液被制造以提供完全的五种药物浓度还有对照。这些不同药物稀释液的100ul等份被加到适当的已经含有100ja1的基质的微升孔，产生需要的最终药物浓度。随着药物的加入，该板在37。C、5%C02、95%空气和100°/。相对湿度下培养48小时。对于贴壁细胞，测试通过添加冷的CTA终止。细月包用50ja1冷的50%(w/v)TCA(最终浓度，IO订CA)温和的添加原位固定并且在4。C培养60分钟。除去上清液，该板用自来水洗涤五次并且空气千燥。以0.4%(w/v)在1%乙酸中的磺酰罗丹明B(SulforhodamineB)(SRB)溶液(IOOial)被添加到每个孔，并且该^反在室温培养10分钟。染色后，用1°/。乙酸洗涤五次移除未结合的染料并且空气干燥该板。结合的染料随后溶解于10mM的三(羟曱基)氨基曱烷，并且吸收值在515nm波长由自动板读取器读取。对于悬浮细胞，其方法学是一样的，除了通过温和添加50ju1801TCA(最终浓度，16°/TCA)将固定细胞固定在孔底部终止测试之外。使用七个吸收测量[时间0、(Tz)、控制生长、(C)、和在五种浓度水平的药物存在下的测试生长(Ti)]计算在每个药物浓度水平的生长百分比。生长抑制作用百分比如下计算xi00对于Ti〉/^z的浓度[(Ti-Tz)/Tz]x100对于Ti〈Tz的浓度。对于每种实验药剂计算三种剂量响应参数。50%(GI5)的生长抑制由[(Ti-Tz)/(C-Tz)]xi00=50计算，这是导致在药物培养期间对照细胞在净蛋白增加上50°/。的降低(由SRB染色测得)的药物浓度。导致全生长抑制(TGI)的药物浓度由Ti=Tz计算。LC5。(与药物处理初期比较，导致在药物处理末期测量的蛋白的50%的降低的药物浓度)表示由[(Ti-Tz)/Tz]x100=-50计算得出的在处理后细胞的净损失。如果达到活性的水平计算这三个参数的每个的值；然而，如果效果没有达到或者超过，该参数的值被表达为大于或小于最大或最小测试浓度。对IOpM化合物A的上述NCIDTP研究结果的总结在表5中给出。<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table>NSCLS(9)62.773.39E-67.31E--62.84E-5结肠癌(6)40.492.36E-66.45E--62.28E-5乳腺癌(8)59.721.00E-52.11E--53.08E-5卵巢癌(6)66.186.23E-61.46E--53.53E-5白血病(6)12.311.09E-64.28E--61.34E-5肾癌(8)82.548.OOE-61.70E--53.70E-5黑色素瘤(8)16.464.09E-67.74E--61.59E-5前列腺癌(1)2.841.41E-52.76E--55.39E-5CNS(5)78.881.90E-64.13E--61.10E-5所述结果表明化合物D在10yM浓度对抗所述60细胞系的许多类型有广泛基础活性。显示的对细胞生长降低最强抑制效果是对抗前列腺癌细胞系，紧随其后是白血病细胞系，最不剧烈的效果是对抗肾癌。GI5。、TGI和L"值在白血病和CNS癌症细胞系中全部最低，表明化合物D对抗这些类型的癌症的最强的药效。实施例12抗发炎和抗血管疾病活性PHK研究基于测试化合物对上述人原代角质形成细胞(PHKs)的效果并且按照各种研究使用的试剂盒的使用说明测定之前描述的实施例的一些化合物的抗发炎活性。虽然这些研究更典型地用于抗发炎研究，^f旦它们同样适用于血管疾病，因为由人原代角质形成细胞的测试结果可推断到血管内皮。仅PHKs的MCP-l数据是剂量依赖型的，所以MCP-l的I"。能够被计算，但其他细胞因子则不能。多种化合物的MCP-l的研究结果在下面的表6中显示。表6化合物MCP-lIC5。A>100juMC>100juM57D3|aMH75juM通过MCP-1蛋白生产所测试的化合物在TNF-a-处理的PHK中的抗发炎活性的结果在表6中显示。MCP-1蛋白的ICs。浓度显示出不同程度的发炎细胞因子的抑制作用。在这些测试的其他结果中，所有被测试的化合物均能以剂量依赖型的方式减少MCP-1蛋白生成。化合物D在TNF-a-处理的PHK中显示出最强的MCP-1抑制作用。实施例13口腔生物利用度指示性的渗透性研究渗透性研究由本发明和申请的受让人的外界合同商完成以通过Caco-2细胞单层测定化合物D和G的渗透性。口服生物利用度的一个重要因素是化合物在小肠被吸收的能力。通过细胞单层的药物表观渗透性(Papp)的测量与人肠吸收密切相关，并且几个哺乳动物细胞系包括Caco-2、LLC-PK1和MDCK适于这一测量(阿特森，P.等，在人肠上皮(Caco-2)细胞中人口服药物吸收和表观药物渗透系数的相互关系。《生物化学和生物物理研究通讯》(BiochemBiophysResComm)175:880-885(1991);斯图尔特，B.H.等，在体外和原位才莫型中多种肠渗透的比寿交与人的吸收的关系。《药物研究》(PharmRes)12:693(1995))。P-糖蛋白(P-gp,由MDR1编码)是ABC转运体超级家族的一员并且在人肠、肝和其他组织中表达。P-gp的肠表达可影响作为该转运体底物的药物分子的口服生物利用度。与P-gp的相互作用能够使用极化细胞系统如Caco-2细胞单层和人P-gpcDNA-表达LLC-PK1和MDCK细胞单层中药物运输的直接测试法进行研究。Caco-2细胞(人腺癌结肠细胞系Caco-2,ATCC批号HTB-37,在段落18和45之间使用)被植于BDFalconHTS24-Multiwell上，1jliM培养插入物(BD批号351180)(BD生物科学发现实马IS殳备，渥本，MA，USA)。伴随每3-4天替换基质，所述细胞培养21到25天。单层完整性通过预实-验^争上皮细胞电阻(TEER)测量和实-验后萤黄(LuciferYe11ow)A到B通量测试法而进行评定。转运緩沖剂是力口入10mMHEPES(N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸)緩冲的HBSS(汉克斯平衡盐溶液)并且用NaOH调pH值至7.4。受体溶液通过将r/。DMSO加至转运緩冲剂制成。测试溶液是在转运緩冲液中1°/。的最终DMSO浓度的化合物D和H的DMSO溶液。对于两种渗透性比较物化合物(50iaM作为"高，，的卩H]-普萘洛尔(propranolol)和50jaM作为"低，，的["C]-甘露醇)以及阳性对照P-dp底物(5juM卩H]-地高辛(digoxin))的供体溶液通过稀释等份的辐射标记和非辐射标记的存储液至1%最终DMS0浓度的转运緩冲剂来制备。测试物品化合物D和H以单浓度(1|uM)在A到B和B到A方向观'J试。供体和受体溶液被添加到单层的顶点或基底腔(取决于被测量的转运的方向)。所述单层在37。C环境湿度和C02下在环形摇床(50rpm)上培养。90分钟后，供体和受体腔的样品被取出用于分析。为了测定样品和实验样品盘的非特异性结合的程度，所述样品溶液在上述条件下在一个24孔测试板的单孔中培养。90分钟后，样品从每个孔中取出用于分析。所有样品采集后，萤黄溶液以100nM的最终浓度被加到每个单层。插入物被置于含有转运緩冲剂的新受体板。30分钟在37。C环境湿度和C02下在环形摇床(50rpm)上的培养后，样品被从受体腔取出用于测量萤黄通量百分数。两种渗透性比较物化合物代表高渗透性(50nM[力]-普萘洛尔)和低渗透性(50jaM["C]-甘露醇)在A到B的方向测试，伴随样品从供体和受体腔在90分钟的一个时间点取出。对照P-gp底物是5juM[3H]_地高辛(digoxin)在A到B和B到A方向测试，伴随样品从供体和受体腔在90分钟的一个时间点取出。复制单层在每个培养中使用。使用与内标的峰面积比由LC/MS/MS分析样品。测试物品浓度基于峰面积比计算，所述峰面积由在转运緩冲剂中含有标称浓度的测试物品的供体溶液的适当的稀释液获得。样品适当地稀释以保证响应在质量检测器的线性范围内。比较物和对照样品由液相闪烁计数分析。萤黄浓度使用荧光板读取器测定。59预实验跨上皮细胞电阻(TEER)测量(中间值411Dcm2)和实验后萤黄A到B通量(中间值0.1%)确认了单层完整性。阳性对照地高辛的极化确认了功能性P-gp转运模型。渗透比较物甘露醇和普萘洛尔的Papp值(中间值，对于甘露醇4.lxl(T±SD2.4x10—7,对于普萘洛尔1.5x1(T士4.2xl(T5)在该测试系统的测试设施中观察到的历史范围内，这表明合适的功能模式。渗透比较物甘露醇和普萘洛尔以及阳性对照P-gp底物地高辛的结果在下面表7中报道。表7化<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>n,d.-未检测获得的在Caco-2细胞单层中测试化合物的双向渗透数据以及极化比在表8中报道。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>测试物品从顶点和基底腔(质量平衡)以及在培养的最后从没有细胞(非特异性结合)的24孔培养板的单孔的回收在表9中报道。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>*>100°/。的质量平衡/回收值典型地归结于在培养过程中升高的溶解性。结论结果非常具有鼓舞性。在Cac。-2细胞单层的透过性研究作为肠吸收体外模型证明了化合物H属于由BCS透过性分类体系测定的高渗透等级，化合物D属于中到高渗透等级。单层TEER结果以及实验后萤黄通量结果表明通过整个实验功能型细胞单层的存在。P-gp转运阳性对照，地高辛，显示极化转运(极化率5.4，表7)表明合适的功能性测试体系。化合物H在所述测试后从所述顶点和基底腔中以及从没有细胞的测试板(表9)中的回收是完整的，表明化合物H对细胞或者塑料样品盘的非特异性结合的程度不影响所述测试。然而，质量平衡和非特异性结合测定实验显示化合物D被结合在塑料板和/或细胞到可能已经减少可用于扩散和转运的化合物的数量的程度。结果，表观P,值和导致的极化率(表8)可低估化合物D的渗透性并且在将它划至BCS渗透性等级如表10所示时应该伴有警告使用。表IO<table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>观察到的化合物H在Caco-2细胞单层中的A-B渗透性(表8)高于甘露醇的A-B渗透性。基于BCS渗透性等级(表10)，化合物H应被视为高度渗透性的化合物。观察到的化合物D的A-B渗透性值在那些观察到的甘露醇和普萘洛尔的A-B渗透性之间。基于BCS渗透性等级(表10),化合物D应被视为中到高度渗透性的化合物。如上所述，然而，这些分级应当根据这些化合物观察到的结合程度加以警告地解释。化合物D和H显示出0.1-0.2的极化比，表明这些化合物A-B渗透性超过B-A渗透性。这一发现与P-gp介导的B-A外向通量相悖，并且表明涉及了由转运体而非P-gp的主动的A-B通量。上述研究证明了本发明的NDGA衍生物的代表性化合物是有用的药用化合物。本领域的技术人员可以意识到在未离开本发明广泛的发明概念下能够做出对上述实施例的改变。因此，应被理解的是本发明不限于公开的特定实施例而应覆盖附加的权利要求限定的本发明的主旨和范围内的变化。参考资料1.德朗，T.;斯图塔克，M.;奎利恩，R.;贾哈马达斯，K.Br.《药理学杂志》(J.Pharmacol.)2003，140，295-304。2.中馆，T.《日本药理学杂志》(Jpn.LPharmacol.)1989,49,1-9.3.豪斯特，B.;格雷格，H.;玛丽安，B.《癌症研究和临床肺瘤学杂志》(J.CancerRes.Clin.Oncol.)2003，129，569—576。4.藤原，T.;三角，Y.;池原，Y.《生物化学和生物物理研究通i孔》(Biochem.Biophys.Res.Commum.)2003，301,927—933。5.(a)程，J.S.;简，C.R.《体外毒理学》(Toxicol.InVitro)2002,16，485-190。(b)王，J.L.;常,H.J.;郑,L.L.;刘，C.P.;李，K.C;周，LJ.;盛，J.S.;罗，Y.K.;苏，W.;罗，Y.P.;陈，W.C;陈，R.C;简，C.R.《药理学和毒理学》(Pharmacol.Toxicol.)2001，89，301-305。(c)苏，W.;郑，L.L.;林，M.C;常，H.L;李，LC;周，LJ.;罗，Y.K.;盛，LS.常，H.T.;王，J.L.;刘，C.P.;陈，W.C;简，C.R.《神经化学国际版》(Neurochem.Int.)2002，40，249-254。(d)黄，LL;陈，W.C;黄，C.J.;苏，S.S.;陈，J.S.;程，H.H争;常，H.T.;简，B.P.;简，C.R.《生命科学》(LifeSciences)2004,75,2341-2351。6.山冲于，H.;长野，N.;平野，M.;;H"木，L;渡边，M.今泉，Y.《药理学与实验医疗学报》(LPharmacol.Exp.Ther.)1999,291，140-146.7.大野，L;长谷川，K.;吉池，Y.;高岛，A.;山田，M.;内木，H.《神经化学杂志》(J.Neurochem.)2002，81,434-440。8.李，C.H.;张，Y.S.;何，S.J.;木恩，Y.M.;朴，S.J.;厄令，T.《实验细胞研究》(Exp.Cell.Res.)2003，289，335-341。9.胡，J.R.;郑，W.N.;才各纳比，L;吉扎，P.;黄，R.C.《医学化学杂志》(J.Med.Chem.)1998,41,2994-3000。10.黄，R.C;李，Y.;吉扎，P.E.;格纳比，J.N.;爱德尔阿泽姆，I.S.;金，LY.;胡，J.R.《抗病毒研究》(AntiviralRes.)2003,58，57-64。11.金，LY.;哈奇米拉伊，G.H.;黄，R.C;胡，J.R.《基因微生物学杂志》(J.GeneticsMol.Biol.)2002，13,248-257。12.格纳比，LN.;布雷迪，LN.;克兰顿，D.J.;伊托，Y.;迪特默，J.;贝茨，R.B.;黄，R.C.《美国国家科学学会进展》(Proc.Natl.Acad.ScLUSA)1995,92,11239-11243。13.格纳比，J.;伊托，Y.;马，Y.;黄，R.C.《色谱分析杂志》(LCh腦atogr.A.)1996，719，353-364。14.陈，H.;滕，L.;李，J.;帕克，R.;默德，D.E.;格纳比，J.;胡，J.R.;郑，W.N.;黄，R.C.《医学化学杂志》(J.Med.Chem.)1998，41，3001-3007。15.帕克，R.;吉扎，P.E.;默德，D.E.;黄，R.C.《抗病毒63研究》(AntiviralRes.)2003，58，35-45。16.克拉格，J.;卡拉汉，M.;黄，R.C;德卢西娅，A.《抗病毒研究》(AntiviralRes.)2000,47,19—28。17.常，C-C;海勒，J.D.;郭，J.;黄，R.C.《美国国家科学学会进展》(Proc.Natl.Acad.ScLUSA)2004，101，13239-13244.18.海勒，J.D.;郭，L;吴，T.C;卡斯特，W.M.;黄，R.C.《癌症研究》(CancerRes.)2001，61,5499-5504。19.(a).帕克，R.;常，CC;梁，Y.C.;钟，Y.;亨瑞，R.A.;林，E.;,默德，D.E.;黄，R.C.《临床癌症研究〉XCIin.CancerRes.)，2005,11(12)，4601-4609。(b).常，CC;梁，Y.C.;库特则，A.;胡，C.I.;林，C.F.;默德，D.E.;周，T.C.;李，Y.C.;黄R.C.网上发表于2006年3月17日，《癌症化学疗法和药理学》(CancerChemotherapyandPharmacology)。20.中村M，松尾K.,和中村E.《美国化学学会杂志》(J.Am.Chem.Soc.)2004,126，3686。21.《化学学会杂志》(J.Chem.Soc.)1934，142322.尼卡斯S.P.等，《AAPS杂志》2004:6(4)文章30(http://www.aapsj.org)。权利要求1.一种丁烷桥修饰去甲二氢化愈创木酸衍生化合物(BB-N)，它具有下面的通式结构(式V)，以及它的药学上可用的盐其中每个X选自由-CHO、-CN、-CH2Cl、-CH2Br和-CH2F构成的组。式V2.—种组合物，包括权利要求1所述的BB-N化合物和一种药学上可用的载体，任选地包括其它药学上可用的赋形剂。3.—种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗病毒感染的有效量的一又利要求1所述的BB-N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。4.一种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗增殖疾病的有效量的权利要求1所述的BB-N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。5.—种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗发炎性疾病的有效量的一又利要求1所述的BB-N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。6.—种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗代谢性疾病的有效量的4又利要求1所述的BB-N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。7.—种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗血管疾病的有效量的权利要求1所述的BB-N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。8.—种药剂盒，所述药剂盒包括含有权利要求1所述的BB-N化合物的一种药物组合物和关于它的预防性地或治疗性地用于一种病毒感染、一种增殖性疾病、一种发炎性疾病、一种代谢性疾病和一种血管疾病中的至少一种的使用说明。9.一种丁烷桥修饰的四氧取代去甲二氢化愈创木酸衍生化合物(BB-Sb4N),它具有下面的通式结构(式VI),以及它的药学上可用的盐其中每个Z选自由H,-CH0、-CN、-CH2CH3、-CH2C1、-CH2Br和-CH2F构成的组；其中Y选自由下列基团构成的组-A-R;-(CH2)xHal，其中x是一个1到10的整数，并且Hal是一个卣原子，代表氯、氟、溴或碘的任意一种；-(CH2CH20)yH,其中y是一个1到10的整数；和一个氨基甲酸酯键合的基团，所述基团选自由下列基团构成的组;[TT1，义K^^2，义E!^^、T3和ltj0K^"e其中n是一个1到6的整数，L是有2-6个碳和任选地1-3个卤原子的一种饱和线性烃链，L是任选地包括0-3个双键和任选地包括任意0、N和S中1-3个原子的一种5到7元环，和L是曱基或乙基；其中当Y是-A-R时，R是端基，且A是带有任选的杂原子的一种线性饱和烃侧链，该侧链在一端通过醚键或氨基曱酸酯键键合在各自的羟基残余的0基团上，并且在另一端键合到端基R的一个碳或一个杂原子上；所述侧链A选自由下面基团构成的组一种C广d6线性饱和烃链，它任选地具有1-5个选自0、N和S的杂原子，并且它通过醚4建4建合到NDGA的各自羟基残余0基团上；以及l-5个单元的一种聚乙二醇(PEG)链；BB-Sb4N式VI所述端基R选自由下列基团构成的组一种5到7元碳环，所述碳环选自由下面基团构成的组有1到3个N、0或S杂原子的一种完全^fe和环；一种环，它含有用于形成一个6或7元环的1到3个双H和用于形成一个5元环的1到2个双4建，且所述5到7元环带有1到3个N、0或S杂原子；包含氨基甲酸酯键、脲键、碳酸酯键或酰胺键的一种环；和一种水溶性基团，它选自由磺酸的一种碱金属盐；膦酸的一种碱金属盐；一种药学上可用的盐；一种糖和一种多羟基基团构成的组。10.—种组合物，包括片又利要求9所述的BB-Sb4N化合物和一种药学上可用的载体，任选地包括其它药学上可用的赋形剂。11.一种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗病毒感染的有效量的权利要求9所述的BB-Sb4N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。12.—种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗增殖疾病的有效量的权利要求9所述的BB-Sb4N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。13.—种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗发炎性疾病的有效量的;f又利要求9所述的BB-Sb4N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。14.一种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗代谢性疾病的有效量的权利要求9所述的BB-Sb4N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。15.—种向受治疗者给药的方法，用预防或者治疗血管疾病的有效量的权利要求9所述的BB-Sb4N化合物单独地或者作为一种药物组合物的一部分给药。16.—种药剂盒，所述药剂盒包括含有权利要求9所述的BB-Sb4N化合物的一种药物组合物和关于它的预防性地或治疗性地用于一种病毒感染、一种增殖性疾病、一种发炎性疾病、一种代谢性疾病和一种血管疾病中的至少一种的使用说明。全文摘要本发明涉及去甲二氢化愈创木酸衍生化合物，即丁烷桥修饰的去甲二氢化愈创木酸(NDGA)化合物和丁烷桥修饰的四氧取代NDGA化合物，也公开了含有它们的药物组合物、它们的制备方法、以及它们和含有它们的药剂盒的使用方法，所述使用方法用于治疗疾病和紊乱，特别是那些由病毒感染如HIV感染、HPV感染、或HSV感染导致的或者与其有关的疾病、一种发炎性疾病如各种类型的关节炎和炎症性肠道疾病、代谢性疾病如糖尿病、血管疾病如高血压和黄斑变性、或一种增殖疾病如各种类型的癌症。文档编号A01N37/02GK101547602SQ200780044510公开日2009年9月30日申请日期2007年10月2日优先权日2006年10月2日发明者乔纳森·D.·赫勒,罗西奥·A.·洛佩斯,阿曼达·琼·莫里斯,陈庆奇申请人:埃里莫斯医药品有限公司