常见滩涂贝类的家系建立方法

文档序号:387440阅读:354来源:国知局

专利名称::常见滩涂贝类的家系建立方法
技术领域
:本发明涉及一种常见滩涂贝类的良种选育方法,具体的说是一种常见滩涂贝类的家系构建的方法。
背景技术
:家系选择育种是新品种培育的有效方法,已经在动植物的育种中取得广泛的成功,通过建立家系并进行系统选择是遗传育种的重要手段。利用家系选择技术对贝类经济性状进行改良已有成功的报道。在国外,InnesandHaley(1977)建立了食用贻贝家系,并分析了幼体生长率的遗传变异。Beattie等(1978)对长牡蛎抗夏季死亡的亲本进行选择,建立了7个全同胞家系,其中几个家系的耐高温能力明显提高。Hedgecock等(1991)建立了太平洋牡蛎的杂交家系,通过不同家系间的比较,分析了杂种优势的原因。Langlon(2000)建立了太平洋牡蛎的全同胞家系,指出家系选择有效地提高产量。在国内,张国范等(2004)建立了海湾扇贝自交家系并研究了自交效应;郑怀平等(2003)以壳色作为标记,建立了不同壳色的海湾扇贝家系,对生长发育进行了比较;并利用两个地理群体的海湾扇贝建立了杂交家系和自交家系,对杂交产生的杂种优势进行了分析;闫喜武等(2005)建立了菲律宾蛤仔家系,对其早期生长发育进行了比较;喻达辉等(2005)用RAPD标记了合珠母贝家系F,的分离方式;中国科学院南海海洋研究建立了IO多个马氏珠母贝家系,并成功选育出一个红壳家系——"南科珍珠红"。何毛贤等(2007)对构建的7个马氏珠母贝家系的生长进行了比较,发现一个生长快,个体人的家系。张跃环等(2007)采用'双列杂交法建立不同壳型的菲律宾蛤仔杂交家系,从中筛选出一个生长快、存活率高的F,家系1.5万粒,并成功的获得该家系的F2代3亿粒,有效的提高了菲律宾蛤仔的产量。霍忠明等(2007,2008)采用巢式方法建立100多个了菲律宾蛤仔的同胞家系,计算了菲律宾蛤仔的遗传力,并得到了产量高的家系。本发明根据常见的滩涂贝类的繁殖生物学,制定了一套适用于滩涂贝类家系建立的方法技术路线,为滩涂贝类的家系育种奠定了良好的基础。
发明内容本发明是一种常见滩涂贝类的家系建立方法,适用于各种高密度埋栖的滩涂贝类,本方法具体包括亲本繁殖最小群体数量的确定、亲本繁殖时间的确定、单体精卵的获得、精卵放置有效时间的确定、建立家系。下面详细叙述常见滩涂贝类的家系建立方法,具体步骤如下第一步、确定亲本繁殖最小群体的数量为20~30枚。对于高密度埋栖的滩涂贝类,单独放置性腺成熟的个体不会产卵,繁殖时具有群体效应,这不同于其它的贝类,即繁殖时存在最小繁殖翁体数量,如果少于该群体数量,即使亲本性腺成熟的再好,也不能产卵。第二步、在第一步的基础上,当亲本性腺成熟后,经过阴干升温的刺激,通过预实验,确定亲本的繁殖时间以及雌雄产卵排精的时间差。在这种条件下,贝类集中繁殖的时间一般是相对固定的。第三步、单体精卵的获得,在第一、二步的基础上,当群体繁殖时,将正在产卵排精的个体抓取出来,利用淡水冲洗干净后,单独放置在事先准备好的容器中,经过530min,抓取出的个体可以继续产卵或排精,即可获得单体精卵。第四步、由于贝类精卵失活时间不仅与种类有关,而且还与温度密切相关,根据其品种与水温,通过精卵的失活时间,确定精卵放置的有效时间。一般来说,随着水温的升高,精卵的放置时间縮短,在2025。C时,卵子的放置有效时间约为4h。在收集精卵不同步的时候,尽量縮短时间差,保证精卵的亲和力,提高受精率。第五步、在以上步骤基础上,采用巢式方法或双列杂交法构建常见滩涂贝类的家系。在构建家系前,检査卵子、精子是否被污染,被污染的个体弃掉,选用未受污染的个体建立家系。为了提高孵化率,可以选择降低孵化密度来保证子代的存留数量。本发明的优点在于能够成功的构建常见滩涂贝类的家系,克服了以往雌雄鉴别困难所带来的弊端,从而为滩涂贝类的家系育种奠定良好的基础。该方法具有简单易行,成功率高的特点。具体实施例以菲律宾蛤仔、青蛤、四角蛤蜊、中国蛤蜊、薄片镜蛤为实施例进一步说明本发明,但不构成对本发明的限制。实施例l第一步、亲本繁殖最小群体数量的确定对于菲律宾蛤仔而言,单独放置性腺成熟的个体不会产卵,繁殖时具有群体效应,存在最小繁殖群体数量为20~30枚。第二步、亲本繁殖时间的确定在第一步的基础上,当亲本性腺成熟后,经过阴干810h,升温35。C刺激,经过l4h,亲贝开始产卵排精,雌雄产卵排精的时间差为2050min。第三步、单体精卵的获得在第一、二步的基础上,当群体繁殖时,将正在产卵排精的个体抓取出来,利用淡水冲洗干净后,单独放置在事先准备好的容器2L小桶中,抓取出的个体继续产卵或排精,即获得单体精卵。第四步、精卵放置有效时间的确定菲律宾蛤仔卵子有效放置时间不得超过4h,精子有效放置时间812h,放置时间越短越好。在收集精卵不同步的时候,尽量縮短时间差,保证精卵的亲和力,提高受精率。第五步、构建家系在以上步骤基础上,采用双列杂交和巢式方法构建菲律宾蛤仔的家系。在构建家系前,检査卵子、精子是否被污染,被污染的个体弃掉,选用未受污染的个体建立家系。为了提高孵化率,可以选择降低孵化密度为正常的2030%,来保证子代的存留数量。菲律宾蛤仔家系的建立情况如表1。表l、菲律宾蛤仔家系的建立<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注2007年7月建立的大连群体采用双列杂交法构建家系,其它群体采用巢式方法建立家系。实施例2第一步、亲本繁殖最小群体数量的确定对于青蛤而言,单独放置性腺成熟的个体不会产卵,繁殖时具有群体效应,存在最小繁殖群体数量为2030枚。第二步、亲本繁殖时间的确定在第一步的基础上,当亲本性腺成熟后,经过阴干12h升温35。C刺激,经过6h,亲贝开始产卵排精,雌雄产卵排精的时间差为2030min。第三步、单体精卵的获得在第一、二步的基础上,当群体繁殖时,将正在产卵排精的个体抓取出来,利用淡水冲洗干净后,单独放置在事先准备好的容器2L小桶中,经过1030min,抓取出的单体继续产卵或排精,获得单体的精卵。第四步、精卵放置有效时间的确定青蛤卵子有效放置时间不得超过3h,精子有效放置时间8~10h,放置时间越短越好。在收集精卵不同步的时候,尽量缩短时间差,保证精卵的亲和力,提高受精率。第五步、构建家系在以上步骤基础上,采用双列杂交法构建青蛤的家系。在构建家系前,检査卵子、精子是否被污染,被污染的个体弃掉,选用未受污染的个体建立家系。为了提高孵化率,可以选择降低孵化密度为正常的20~30%,来保证子代的存留数量。于2006年10月,分两次成功构建18个青蛤家系,见表2。表2、青蛤家系的建立<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>实施例3第一步、亲本繁殖最小群体数量的确定对于四角蛤蜊而言,单独放置性腺成熟的个体不会产卵,繁殖时具有群体效应,存在最小繁殖群体数量为20~30枚。第二步、亲本繁殖时间的确定在第一步的基础上,当亲本性腺成熟后,经过阴干8-12h,经过0.5-1.0h,亲贝开始产卵排精,雌雄产卵排精的时间差为1030min。第三步、单体精卵的获得在第一、二步的基础上,当群体繁殖时,将正在产卵排精的个体抓取出来,利用淡水冲洗干净后,单独放置在事先准备好的容器2L小桶中,经过540min,抓取出的单体继续产卵或排精,获得单体的精卵。第四步、精卵放置有效时间的确定四角蛤蜊卵子有效放置时间不得超过2~3h,精子有效放置时间为S12h,放置时间越短越好。在收集精卵不同步的时候,尽量縮短时间差,保证精卵的亲和力,提高受精率。第五步、构建家系在以上步骤基础上,采用巢式方法构建四角蛤蜊的家系。在构建家系前,检査卵子、精子是否被污染,被污染的个体弃掉,选用未受污染的个体建立家系。为了提高孵化率,可以选择降低孵化密度为正常的20~30%,来保证子代的存留数量。于2007年9月,成功建立15个四角蛤蜊家系,见表3。表3、四角蛤蜊家系的建立<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实施例4第一步、亲本繁殖最小群体数量的确定对于中国蛤蜊而言,单独放置性腺成熟的个体不会产卵,繁殖时具有群体效应,存在最小繁殖群体数量为20~30枚。第二步、亲本繁殖时间的确定在第一步的基础上,当亲本性腺成熟后,经过阴12h,经过0.5~1.0h,亲贝开始产卵排精,雌雄产卵排精的时间差为525miru第三步、单体精卵的获得在第一、二步的基础上,当群体繁殖时,将正在产卵排精的个体抓取出来,利用淡水冲洗干净后,单独放置在事先准备好的容器2L小桶中,经过525min,抓取出的单体继续产卵或排精,获得单体的精卵。第四步、精卵放置有效时间的确定中国蛤蜊卵子有效放置时间不得超过3~4h,精子有效放置时间为8~10h,放置时间越短越好。在收集精卵不同步的时候,尽量縮短时间差,保证精卵的亲和力,提高受精率。第五步、构建家系在以上步骤基础上,采用巢式方法构建中国蛤蜊的家系。在构建家系前,检查卵子、精子是否被污染,被污染的个体弃掉,选用未受污染的个体建立家系。为了提高孵化率,可以选择降低孵化密度为正常的20~30%,来保证子代的存留数量。于2008年7月,成功建立21个中国蛤蜊家系,见表4。表4、中国蛤蜊家系的建立'<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>实施例5第一步、亲本繁殖最小群体数量的确定对于薄片镜蛤而言,单独放置性腺成熟的个体不会产卵,繁殖时具有群体效应,存在最小繁殖群体数量为20~30枚。第二步、亲本繁殖时间的确定在第一步的基础上,当亲本性腺成熟后,经过阴干8h,经过0.5~1.5h,亲贝开始产卵排精,雌雄产卵排精的时间差为1020min。第三步、单体精卵的获得在第一、二步的基础上,当群体繁殖时,将正在产卵排精的个体抓取出来,利用淡水冲洗干净后,单独放置在事先准备好的容器2L小桶中,经过530min,抓取出的单体继续产卵或排精,获得单体的精卵。第四步、精卵放置有效时间的确定薄片镜蛤卵子有效放置时间不得超过3~4h,精子有效放置时间为8~12h,放置时间越短越好。在收集精卵不同步的时候,尽量縮短时间差,保证精卵的亲和力,提高受精率。第五步、构建家系在以上步骤基础上,采用巢式方法构建薄片镜蛤的家系。在构建家系前,检查卵子、精子是否被污染,被污染的个体弃掉,选用未受污染的个体建立家系。为了提高孵化率,可以选择降低孵化密度为正常的20~30%,来保证子代的存留数量。于2008年8月,成功建立24个薄片镜蛤家系,见表5。表5、<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>权利要求1、一种常见滩涂贝类的家系建立方法,其特征在于具体包括亲本繁殖最小群体数量的确定、亲本繁殖时间的确定、单体精卵的获得、精卵放置有效时间的确定、建立家系,具体步骤如下第一步、确定亲本繁殖最小群体的数量为20~30枚;第二步、在第一步的基础上,当亲本性腺成熟后,经过阴干升温的刺激,通过预实验确定亲本繁殖时间及雌雄产卵排精的时间差;第三步、在上步基础上,当群体繁殖时,将正在产卵排精的个体抓取出来,利用淡水冲洗干净后,单独放置在事先准备好的容器中,经过5~30min获得单体精卵;第四步、根据贝类的种类以及环境温度,通过精卵的失活时间确定精卵放置的有效时间;第五步、检查卵子、精子是否被污染,被污染的个体弃掉,选用未受污染的个体,在以上步骤基础上,采用巢式方法构建常见滩涂贝类的家系。2、根据权利要求1所述的一种常见滩涂贝类的家系建立方法,其特征在于该方法适用于各种高密度埋栖的滩涂贝类。3、根据权利要求1所述的一种常见滩涂贝类的家系建立方法,其特征在于第四步收集精卵不周步的时候,縮短时间差,保证受精率。4、根据权利要求1所述的一种常见滩涂贝类的家系建立方法,其特征在于第五步采用双列杂交法构建常见滩涂贝类的家系。5、根据权利要求1所述的一种常见滩涂贝类的家系建立方法,其特征在于降低孵化密度,保证子代的存留数量,提高孵化率。全文摘要本发明是一种常见滩涂贝类的家系建立方法,属于一种良种选育方法,具体包括亲本繁殖最小群体的确定、亲本繁殖时间的确定、单体精卵的获得、精卵放置有效时间的确定、最后建立家系。本发明的优点在于能够成功的构建常见滩涂贝类的家系,克服了以往雌雄鉴别困难所带来的弊端,从而为滩涂贝类的家系育种奠定良好的基础。该方法具有简单易行,成功率高的特点。文档编号A01K61/00GK101347104SQ200810013220公开日2009年1月21日申请日期2008年9月12日优先权日2008年9月12日发明者张国范,张跃环,凤杨,赵力强,闫喜武,霍忠明申请人:大连水产学院
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