专利名称：：一种与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法
技术领域：
：本发明属于苗木培育领域，涉及生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法。种板栗苗木育苗方法，特别涉及一种与根菌共
背景技术：
：板栗(CastaneamollissimaBlume)又称栗子、毛栗，是我国的特产。传统医学认为板栗性温，味甘平，入脾、胃、肾经，有补肾、健脾等功效。明朝李时珍在《本草纲目》中记载"栗治肾虚、腰腿无力，能通肾益气，厚肠胃也，肾主大便，栗能主肾"。唐孙思邈《千金要方》云"栗子，味咸温，无毒，益气厚肠胃，补肾气，令人耐肌，生食之，甚治腰脚不遂"。故板栗有"肾之果"之称。我国是世界上栽培板栗最早的国家，我国板栗栽培分布于21个省(区)，主产区在山东、河北、湖北、河南、陕西的秦巴山区。截至2004年，全国板栗栽培面积已达125万公顷，年产板栗80万吨，占世界总产量的71.7%。板栗一直是我国出口创汇拳头产品，在国际市场上享有很高的声誉，产品一直处于供不应求状态。我国每年出口的栗子有4万吨，年创汇接近7990万美元，栗子出口创汇居干果首位。近年来，在市场需求、价格和保健食品工业兴起的牵动下，在退耕还林和农业产业结构调整政策的促进下，板栗在我国有了快速发展，在各适宜区相继建成了一批板栗商品基地。由于板栗投资少、见效快、效益大，群众已把板栗看成了"希望树"、"致富树"、"摇钱树"，种植规模逐年扩大。但是，生产的快速发展需要大量的良种苗木供应。目前，由于缺乏板栗良种规模化育苗技术，板栗的良种化程度很低，难以支撑板栗优质高产培育，达不到生产创汇型优质无公害板栗果品的要求。邓中美公开了一种板栗芽苗砧嫁接技术(林业科技开发，1999年第1期，43-44)，是将板栗种子催芽后，嫁接当年生的板栗枝条砧木，愈合培养后得到嫁接苗；将嫁接苗在沙床培养到接穗芽苞张开放绿时出棚到大田苗圃地移栽。该方法具有一年出圃造林，节约时间、提早结实的优点；但是该方法仍旧是采用育苗移栽的方式建园。目前，在板栗建园中普遍采用大田实生繁殖的方式，建园标准低，产量上不去。如果采用育苗移栽的方式建园，无论是实生苗还是嫁接苗，由于其苗木的直根性，且根系再生能力差，致使苗木移栽造林时伤根严重，缓苗现象严重，结实较晚；即使移栽后成林，但是两到三年之后会存在结实减少的现象。这是因为板栗根尖部分常与一些真菌共生形成外生根菌，板栗菌根共生是保证板栗正常生长的必备条件。板栗苗移栽木过程中由于苗土分离，改变了土壤真菌和根系共生的土壤环境，就无法保障根系的正常生长。
发明内容本发明解决的问题在于提供一种与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，该方法是一种在芽砧嫁接育苗的基础上培养带有根菌的板栗苗木，能够实现快速、大规模的培育，该方法培养的苗木可以直接用于大田移栽，成活率高，苗木生长健壮。本发明是通过以下技术方案来实现的—种与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，包括下列步骤1)接种板栗根菌将芽砧嫁接培育的嫁接苗包括主要侧根在内的根尖截去0.52cm，然后在板栗根菌液中蘸根23s;2)容器苗培育将接种了板栗根菌液的嫁接苗移植于装有培育基质的容器中，移植深度使嫁接接口露出培育基质；嫁接苗移植为容器苗后，当天喷洒板栗林下枯枝落叶的水煮液30ml50ml;3)温棚培养容器苗喷洒水煮液后6h之内移入密封的温棚中培育，保持棚内相对湿度在7080%之间，温度不超过35°C;4)苗期管理在温棚培养期间及时去除砧木萌芽和花芽；温棚保持密封3040天之后，夜间揭去薄膜放风；此后，每隔1015天喷洒质量分数0.20.3%的磷酸二氢钾液一次；在容器苗移栽大田之前，再进行一次板栗林下枯枝落叶的水煮液喷洒，每株容器苗喷洒30ml50ml。所述接种板栗根菌时用到的板栗根菌液，为提前配置好的1000倍稀释的板栗根菌液或板栗根菌剂。所述板栗根菌液是含有红绒盖牛肝菌(Xerocomuschrysenteron)和绵毛丝膜菌(Cortinariussublanatu)的混合菌齐U。所述的培育基质为质量分数25%45%的板栗林下表土，质量分数20%40%的火烧土或耕作土，质量分数20%30%的沙子，质量分数3%5%的过磷酸钙，质量分数15%的硫酸钾，质量分数0.5%2%的硫酸亚铁。所述的板栗林下枯枝落叶的水煮液为用IO(TC沸水煮板栗林下枯枝落叶30min，静止放凉后的过滤液。所述的在容器苗移入的密封的温棚上搭有荫棚，保持荫棚至夏季过后撤除。所述的培育容器苗所用的容器为黑色塑料容器，直径1620cm，高度20cm;或者采用可降解的容器。所述的芽砧嫁接培育嫁接苗包括以下步骤1)砧种的催芽将精选的板栗种子用质量浓度为0.5%的高锰酸钾溶液浸种2h或用质量浓度为2%3%的高锰酸钾溶液浸种30min后取出，用清水冲洗干净后平铺在沙床上，覆盖沙层并浇足饱和水，在沙层上覆盖透气的薄膜；沙床湿度保持在40%，温度控制在1520°C，保持1520天；待种子胚根长到23cm时，截去胚根根尖lcm，将断了胚根根尖的种子在50ppm的萘乙酸或50100ppm的ABT3号生根粉浸13s，然后取出种子，根尖向下逐粒摆放在温棚内预先做好的沙床上，覆盖细沙土，继续催芽；棚内温度控制在2025t:，相对湿度保持在80%85%，保持2025天；2)采集接穗采集当年新发育的半木质化的板栗枝条作为接穗，从接穗采集到嫁接，时间不能超过12个小时；3)嫁接待胚芽长至35cm时，把芽苗从温棚中取出，截断芽苗的上端，保留芽苗根部长2.53cm，然后从芽茎的中心纵向切开，切口长1.52cm;将待嫁接的板栗枝条剪成接穗，每个穗留两个芽，第一个芽上留0.5cm的枝干，第二个芽下留1.52cm的枝干；将枝条下端削成楔形，削面长12cm，2刀削成，不能补刀；将削好的接穗从芽茎切口处插入1.52cm，对好形成层后绑扎固定；愈合培养后得到嫁接苗。所述用于嫁接的板栗枝条为当年新发育的直径与芽砧相吻合的半木质化枝条；芽砧生长速度与接穗的半木质化期吻合通过调节催芽温棚的温度、湿度控制芽砧生长速度来实现。所述将削好的接穗从芽茎切口处插入进行嫁接时，对好形成层后，接穗与切口之间下不留空，上不露白；然后用铝箔固定或用塑料薄膜绑扎。与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果本发明提供的板栗育种方法是采用芽苗砧嫁和断根接种根菌的方法繁育根系与根菌共生的板栗容器苗，然后将容器苗移入温棚中大规模培育；育苗成功后的苗木直接移植到大田，育苗时间快，苗木成活率高。由于在嫁接苗的断根之后接种板栗根菌，并且在培育基质上进行培育，使得培育的苗木的根系与根菌共生，大大提高了移植后的成活率，而且成林之后植株根系生长良好，结实效果好。申请号为200610081201.4的中国发明专利公开了一种板栗根菌剂，并公开了将其制备的根菌剂用于播种育苗或直播造林的浸种，和一年生苗木栽植的浸根。与之相比，本发明所述的板栗菌根菌液可以采用上述的经过稀释的板栗菌根液或板栗菌根剂，但是本发明的蘸根在嫁接苗包括主要侧根在内的根尖断根之后接种，一方面使得侧根生长发达，另一方面使得根系与根菌共生；而在容器苗培育阶段的培育基质及两次喷洒林下落叶的水煮液是对促进根系的生长和根菌的共生必要的条件；最后破除容器移栽大田后达到根系和根菌的共生。在本发明还提供的芽砧嫁接和根菌共生两大阶段的培育中，包括两次断根，一次是砧种的催芽时的截断断胚根的作用是催生侧根，第二次是嫁接后的嫁接苗的断根，此次断根是为了接种根菌；两次的断根促进了根系的不断发育，为与根菌的共生提供了有利的条件。在芽砧嫁接当中接穗与胚芽的吻合是嫁接成功的关键，包括芽砧生长适度(35cm)与接穗的半木质化期的吻合，以及接穗直径与芽砧直径基本一致的吻合，本发明是通过调节催芽温棚的温度、湿度控制芽砧生长速度。具体实施例方式本发明提供的板栗育种方法是采用芽苗砧嫁和断根接种根菌的方法繁育根系与根菌共生的板栗苗木，培育的苗木直接移植于大田栽植，育苗时间快，苗木成活率高。育苗包括芽苗砧接和根菌共生育苗两大阶段；详细的育苗阶段包括砧种的催芽、采集接穗、嫁接、接种根菌、容器苗培育、温棚培养和苗期管理阶段。下面结合实施例对本发明做进一步详细描述，所述是对本发明的解释而不是限定。实施例1—种与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，包括下列步骤1)砧种的催芽在陕西秦岭北部，10月初，板栗成熟后选择成熟度好、无病虫害的种子用质量浓度为0.5%的高锰酸钾溶液浸种2h，用清水冲洗干净后，分层平铺在沙床上，覆盖沙层并浇足饱和水，在沙层上覆盖透气的薄膜；沙床湿度保持在60%，温度控制为在152(TC，保持1520天；待种子胚根长到23cm时，从根尖1.5cm截去胚根根尖，然后在50ppm的萘乙酸浸13s，移入温棚催芽；截去根尖并浸50卯m的萘乙酸后便于侧根的萌发；将截去胚根根尖的种子逐粒摆放在沙床上，根尖向下，并覆盖细沙土；棚内温度控制在2025t:，相对湿度保持在80%85%，保持2025天；通过控制棚内温度来控制控制芽苗生长，确保接穗采集时间与芽苗发育相吻合。2)采集接穗待胚芽可长至34cm时，采集当年新发育的半木质化的直径45mm的(与芽砧粗度基本一致)板栗枝条进行嫁接；从枝条采集到嫁接，时间不超过12个小时；3)嫁接当砧种的芽苗长到35cm时，从温棚中取出芽苗，截断芽苗的上端，保留芽苗长2.53cm，然后从芽茎的中心纵向切开，切口长1.52cm;将板栗枝条剪成接穗，每个穗留两个芽，第一个芽上留0.5cm的枝干，第二个芽下留1.52cm的枝干；将枝条下端削成楔形，削面长12cm，2刀削成，不能补刀；将削好的接穗从芽茎切口处插入，深约1.52cm，对好形成层，再绑扎固定；4)接种板栗菌根菌将嫁接后的嫁接苗根尖截去0.52cm，然后在板栗根菌液中蘸根3s;板栗根菌液为提前配置好的1000倍稀释的板栗根菌液或板栗根菌剂；5)容器苗培育将接种了板栗根菌液的嫁接苗移植于装有培育基质的容器中，移植深度使嫁接接口露出；培育基质的配方为质量分数45%的板栗林下表土，质量分数30%的火烧土或耕作土，质量分数20%的沙子，质量分数3%的过磷酸钙，质量分数1.5%的硫酸钾(K2S04)，质量分数0.5%的硫酸亚铁(FeS04)。嫁接苗移植为容器苗后，喷洒2次板栗林下枯枝落叶的水煮液，一次在移植后当天喷洒，一次在移栽大田之前喷洒，喷洒量控制在每个容器30ml50ml;6)温棚培养当容器苗喷洒完第一次板栗林下枯枝落叶的水煮液后6小时内就要移入密封的温棚中培育。保持棚内相对湿度在7080%之间，温度不超过35t:;在容器苗移入的密封的温棚上搭有荫棚，在密封的拱棚揭去薄膜后，保持荫棚至夏季过后撤除；7)苗期管理保持拱棚密封20天，3040天后可揭去薄膜，去除砧木萌芽，摘除萌生的花芽；苗木在揭膜以后，每隔1015天喷0.20.3%磷酸二氢钾液一次。当容器苗长到高15cm左右，粗810mm时就可以直接进行大田栽植。实施例2—种与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，包括下列步骤1)砧种的采集与沙藏在陕西宝鸡，10月初，选择当地优良树种社栗母树采集种子，选择成熟度好、无病虫害的种子，用质量浓度为2%3%的高锰酸钾溶液浸种30min后取出沙藏；沙的湿度要求手握成团，手松即散的程度，温度控制在15t:以内；每7天翻动一次。2)催芽选择背风向阳、排灌方便、地势平坦的沙质壤土上建造塑料大棚，棚宽6m、高2m、长2030m。在大棚内垫2cm细沙做成沙床，间留步道沟30cm宽，在沙上放23cm厚的种子，在种子上放3cm厚的沙，浇足饱和水量，然后在沙上盖上薄膜，四周用土压紧；沙床湿度保持在85%90%，温度控制为在摄氏1520。C，保持1520天。3)断胚根催根来年3月中、下旬，待种子胚根长到23cm左右时，取出后用筛子反复过筛，使之互相撞掉胚根lcm(芽子)，未发芽的栗种继续沙藏，随发芽随断根。将断了胚根的种子在50100ppm的ABT3号生根粉浸13秒，然后移入温棚继续催胚芽，种子逐粒摆放在沙床上，根尖向下，然后覆上10cm厚的细沙土；棚内温度控制在摄氏2025°C，相对湿度保持在80%，保持2025天，待胚芽可长至34cm即可嫁接。4)接穗采集在4月中下旬，待胚芽可长至34cm时，下午4点以后采集当年新发育的半木质化枝条，直径粗度45mm，立即运往嫁接地进行嫁接；第二天早上要求嫁接完毕，时间不能超过12个小时。为了确保胚芽可长至34cm时，枝条刚好处于半木质化程度，可以通过控制大棚温度和适度控制芽苗生长速度，当芽砧生长过快，就可以降低大棚温度和湿度加以控制。5)嫁接当芽长到35cm时，从温棚中取出作砧木的芽苗，用单面刀断其芽苗的上端，芽苗只保留2.53cm长度，再用单面刀片从芽茎的中心纵向切开，切口长约1.52cm;在嫁接前，将枝条剪成接穗，留2个饱满芽，第一个芽上留0.5cm的枝干，第二个芽下留1.52cm的枝干；将接穗用利刀削成楔形，削面长12cm，2刀削成，不能补刀。将削好的接穗从芽茎切口处插入深约1.52cm，对好形成层，尽量做到下不留空，上不露白；最后用铝箔固定或用塑料薄膜绑扎。4)接种板栗根菌将嫁接后的嫁接苗根尖(连同侧根)截去0.52cm，在配置好的板栗根菌1000倍稀释液中蘸根2秒钟。5)容器苗培育将接种了板栗根菌液的嫁接苗移植于装有培育基质的容器中，使用容器为普通软质黑色塑料袋，规格为15cmX22m，移植深度以露出接口的铝箔套简为宜；培育基质为质量分数35.5%的板栗林下表土，质量分数30%的火烧土或耕作土，质量分数25%的沙子，质量分数5%的过磷酸钙，质量分数3%的硫酸钾(K2S04)，质量分数1.5%的硫酸亚铁(FeS04)。嫁接苗移植为容器苗后，立即喷洒一次板栗林下枯枝落叶的水煮液，然后在移栽大田之前再喷洒一次，喷洒量控制在每个容器30ml50ml;6)温棚培养当喷洒完第一次板栗林下枯枝落叶的水煮液6小时内，将容器苗移入密封的塑料拱棚中，拱棚上再搭上荫棚；保持棚内相对湿度在7080%之间，温度不超过35t:，持续20天，其间不能揭棚放风；3040天后再揭去薄膜，但不能撤除荫棚，等夏季高温过后，气温下降到3(TC以下时，才可撤除荫棚。7)苗期管理揭去薄膜后，要及时除去砧木萌芽和死亡单株，同时也要及时摘除萌发的花芽，并每隔1015天喷0.20.3%磷酸二氢钾液一次。若遇长期阴雨，地下水位上升，易造成根腐病，此时应加大透光度，可将薄膜两头揭开，以利通风透气，同时应及时清沟排水。当容器苗长到高15cm左右，粗810mm时就可以直接进行大田栽植。一般在春季移栽，种植时划破塑料袋，取出苗木放置种植穴中，剪去下端弯曲根系。苗木栽植后要高出地面20cm左右，保证灌水后泥土下沉后苗木根颈高于地面。如果采用可降解容器，可采用带容器移栽方法，不必破除容器，可以保持根系和根菌共生的条件不被破坏，提高苗木成活率。上述实施例培育的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗和普通实生嫁接栽植苗之间的对比如表1所示，本发明所具有的有益效果是显而易见的。表1根菌共生的芽砧与普通嫁接苗和实生嫁接栽植苗之间的对比<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>权利要求一种与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，包括下列步骤1)接种板栗根菌将芽砧嫁接培育的嫁接苗包括主要侧根在内的根尖截去0.5～2cm，然后在板栗根菌液中蘸根2～3s；2)容器苗培育将接种了板栗根菌液的嫁接苗移植于装有培育基质的容器中，移植深度使嫁接接口露出培育基质；嫁接苗移植为容器苗后，当天喷洒板栗林下枯枝落叶的水煮液30ml～50ml；3)温棚培养容器苗喷洒水煮液后6h之内移入密封的温棚中培育，保持棚内相对湿度在70～80％之间，温度不超过35℃；4)苗期管理在温棚培养期间及时去除砧木萌芽和花芽；温棚保持密封30～40天之后，夜间揭去薄膜放风；此后，每隔10～15天喷洒质量分数0.2～0.3％的磷酸二氢钾液一次；在容器苗移栽大田之前，再进行一次板栗林下枯枝落叶的水煮液喷洒，每株容器苗喷洒30ml～50ml。2.如权利要求1所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述接种板栗根菌时用到的板栗根菌液，为提前配置好的1000倍稀释的板栗根菌液或板栗根菌剂。3.如权利要求2所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述板栗根菌液是含有红绒盖牛肝菌(Xerocomuschrysenteron)和绵毛丝膜菌(Cortinariussublanatu)的混合菌齐U。4.如权利要求1所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述的培育基质为质量分数25%45%的板栗林下表土，质量分数20%40%的火烧土或耕作土，质量分数20%30%的沙子，质量分数3%5%的过磷酸钙，质量分数15%的硫酸钾，质量分数0.5%2%的硫酸亚铁。5.如权利要求1所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述的板栗林下枯枝落叶的水煮液为用10(TC沸水煮板栗林下枯枝落叶30min，静止放凉后的过滤液。6.如权利要求1所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述的在容器苗移入的密封的温棚上搭有荫棚，保持荫棚至夏季过后撤除。7.如权利要求1所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，培育容器苗所用的容器为黑色塑料容器，直径1620cm，高度20cm;或者采用可降解的容器。8.如权利要求1所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述的芽砧嫁接培育嫁接苗包括以下步骤1)砧种的催芽将精选的板栗种子用质量浓度为0.5%的高锰酸钾溶液浸种2h或用质量浓度为2%3%的高锰酸钾溶液浸种30min后取出，用清水冲洗干净后平铺在沙床上，覆盖沙层并浇足饱和水，在沙层上覆盖透气的薄膜；沙床湿度保持在40%，温度控制在152(TC，保持1520天；待种子胚根长到23cm时，截去胚根根尖lcm，将断了胚根根尖的种子在50ppm的萘乙酸或50100卯m的ABT3号生根粉浸13s，然后取出种子，根尖向下逐粒摆放在温棚内预先做好的沙床上，覆盖细沙土，继续催芽；棚内温度控制在2025t:，相对湿度保持在80%85%，保持2025天；2)采集接穗采集当年新发育的半木质化的板栗枝条作为接穗，从接穗采集到嫁接，时间不能超过12个小时；3)嫁接待胚芽长至35cm时，把芽苗从温棚中取出，截断芽苗的上端，保留芽苗根部长2.53cm，然后从芽茎的中心纵向切开，切口长1.52cm;将待嫁接的板栗枝条剪成接穗，每个穗留两个芽，第一个芽上留0.5cm的枝干，第二个芽下留1.52cm的枝干；将枝条下端削成楔形，削面长12cm，2刀削成，不能补刀；将削好的接穗从芽茎切口处插入1.52cm，对好形成层后绑扎固定；愈合培养后得到嫁接苗。9.如权利要求8所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述用于嫁接的板栗枝条为当年新发育的直径与芽砧相吻合的半木质化枝条；芽砧生长速度与接穗的半木质化期吻合通过调节催芽温棚的温度、湿度控制芽砧生长速度来实现。10.如权利要求8所述的与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，其特征在于，所述将削好的接穗从芽茎切口处插入进行嫁接时，对好形成层后，接穗与切口之间下不留空，上不露白；然后用铝箔固定或用塑料薄膜绑扎。全文摘要本发明公开了一种与根菌共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法，该方法是采用芽苗砧嫁和断根接种根菌的方法繁育根系与根菌共生的板栗容器苗，采用现有的经过稀释的板栗菌根液或板栗菌根剂，在断根之后接种后，一方面使得侧根生长发达，另一方面使得根系与根菌共生然后将容器苗移入温棚中大规模培育；育苗成功后的苗木直接移植到大田，育苗时间快，苗木成活率高，苗木生长健壮。文档编号A01G1/06GK101697703SQ20091021871公开日2010年4月28日申请日期2009年10月30日优先权日2009年10月30日发明者何佳林,吕平会,周亚娟,季志平,魏安智申请人:西北农林科技大学