专利名称:一种金针菇出菇育种方法
技术领域
本发明属于食用菌育种领域,具体的说涉及一种用试管出菇育种方法选育金针菇菌种的过程。
背景技术
金针菇是我国工厂化生产发展最快的食用菌种类。几十年来,为了跟上产业发展 的要求,国内同行一直致力于金针菇新品种的选育。品种选育必然需要进行栽培出菇试验, 以确定其子实体性状的优劣,进而选择优质的菌种。其中最常规的栽培出菇方法就是工厂 化瓶栽和传统袋料栽培。然而,这两种方法的缺点在于,对于能源的消耗量非常大,而且人 力方面的需求也很大,另外也比较容易造成不同菌株孢子间的相互附着,造成菌种遗传表 现的不稳定。这些缺点会导致资源方面的浪费,及研究经费的约束,大大降低了育种效率。 所以,我们亟需寻找金针菇菌种选育中栽培出菇的新方法。

发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种金针菇试管出菇育种方法,应用于金针 菇优秀新菌种的选育中。本发明的金针菇试管出菇育种方法,包括以下步骤(1)制备培养基及培养料;(2)培养料装填将培养料填入试管,压紧,用透气性薄膜包上试管口,皮筋箍紧;(3)金针菇菌种的制备将要选育的金针菇菌种,由母种转接为原种,原种再转接 为栽培种;(4)菌种接入在超净工作台上将金针菇栽培种接入试管中培养料上,用透气性 薄膜包上试管口,皮筋箍紧,贴上标签;(5)搔菌菌丝长满试管时,将培养基表面的栽培种及老化菌丝挖去;(6)出菇、采收;筛选优质品种。所述的试管为30 X 250mm的试管,玻璃试管为佳(购自上海沪华玻璃仪器有限公 司)。所述的透气性薄膜是16X 16cm的封口膜(购自上海鼎国生物技术有限公司)。在这一过程中还可以做生长速度的测量菌丝生长环境下,菌种接入疒10天后, 在试管上菌丝生长处划一条线,再经过7 10天,划第二条线,测量两条线间的距离,除以天 数即可得到日平均菌丝生长速度;按实验需要可以继续划线测量速度,得到不同时间段的 生长速度。金针菇子实体特征是1.相对其它食用菌子实体,例如香菇,金针菇子实体菌柄 细长,菌柄直径约为广3毫米,长度为1(Γ20厘米;2.金针菇子实体菌盖较小,菌盖直径约 为1(Γ20毫米;3.金针菇子实体颜色分为白色和黄色,表现为不同部位、不同层次的颜色差 另|J。4.金针菇在子实体成熟后产生孢子,孢子弹射容易造成菌株间相互污染,从而破坏遗传 稳定;如果用试管进行栽培,则可以避免这一污染,有助于遗传稳定。所以,金针菇子实体的尺寸与30X250mm玻璃试管较为合适,利用试管出菇是非常适合于考察金针菇子实体性状 的栽培方法。试管出菇栽培在金针菇菌种选育中有以下重要作用1.节约能源消耗,节省人 力;2.栽培周期短,提高育种效率;3.稳定遗传性状;4.实验操作可控性强。目前还未见将 试管栽培出菇的方法应用到金针菇的选育研究。具体方法步骤为
(1)培养基与培养料制备按育种需要制备培养基与培养料;培养基为PDA培养基。配方去皮马铃薯200g煮汁,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水 IOOOmL, pH 7。置于15 X 150mm小试管中,管口用硅胶塞塞住。PDA培养基采用高压灭菌, 灭菌温度为121°C,保持30分钟。栽培种培养料配方木屑30%,玉米芯20%,棉籽壳20%,麸皮15%,米糠15%, 含水量61% 62%。初始pH6.5。木屑一般使用阔叶树木屑,其它原料必须保持新鲜、干 燥,无虫蛀和霉变现象,颗粒度符合设备和工艺要求。原料保存过程中应通风换气,保持储 藏环境干燥。原料混合时,按配方要求准确定量,使物料充分搅拌均勻,加水至含水量达到 61% 62%。根据季节变化调整搅拌时间,防止混合料酸败。培养料在装填后立即进行灭 菌处理,一般采用高压灭菌。灭菌时间为料的中心温度必须达到121°C,并保持120分钟,必 须彻底杀灭培养料中的所有微生物。灭菌后冷却至管内温度25°C以下,方可接种。(2)培养料装填将制备好的培养料填入试管,用透气性薄膜包上试管口,皮筋箍 紧;使用30 X 250mm玻璃试管,要求装料紧实度均勻,料面距离试管底部约纩10厘米 长,用透气性薄膜包上试管口,皮筋箍紧。(3)金针菇菌种的制备将要选育的金针菇菌种,由母种转接为原种,原种再转接 为栽培种;菌种均转接于灭过菌的斜面上,选用15X 150mm试管,试管口用硅胶塞塞住。培养 基为PDA培养基。(4)菌种接入在超净工作台上将金针菇栽培种接入试管中培养料上,用透气性 薄膜包上试管口,皮筋箍紧,贴上标签;接种时按无菌操作程序进行。将经过灭菌的30X 250mm试管放进接种室,超净工 作台上,紫外灭菌20min,然后将菌种带入接种室。先将的试管口移向酒精灯火焰上,去掉皮 筋和透气性薄膜,转动试管口,使试管口的周围都得到火焰灭菌。再靠近酒精灯火焰,去掉 15 X 150mm试管口的硅胶塞,用镊子或接种勺取菌种快,接到30 X 250mm试管培养料上。接 种量要求盖满培养料表面至瓶口,这样能使菌丝生长均勻,并能有效防止杂菌污染。试管口 盖上透气性薄膜,箍上皮筋,贴上标签,送进培养室培养。培养室温度控制在20°C 22°C, 湿度维持在60% 70%。(5)生长速度的测量菌丝生长环境下,菌种接入疒10天后,在试管上菌丝生长处 划一条线,再经过7 10天,划第二条线,测量两条线间的距离,除以天数即可得到日平均菌 丝生长速度;按实验需要可以继续划线测量速度,得到不同时间段的生长速度。(6)搔菌待菌丝长满试管中的培养料后,去掉试管口透气性薄膜,使用合适的搔 菌工具,去掉表面接种块及老化菌丝并使出菇表面平整,向瓶中注入广2毫升水。催蕾控制温度为13°C 15°C,湿度为90% 95%,直到形成鱼籽般的菇蕾。(7)出菇栽培将试管至于金针菇出菇的适宜环境下出菇,采收及记录,以便筛选优质品种。所述的适宜环境为温度控制为4°C 8°C,湿度为90%以上,CO2浓度为3000 3500ppmo子实体成熟时采收,并拍照。记录子实体颜色、菌柄长度、直径、菌盖直径及出菇 期、栽培周期等数据。按照性状筛选优良菌株。运用本发明的方法选育出的金针菇菌种具有选育速度快、周期短、能耗少、效率 高、遗传稳定、可控性强等特点。实施例一菌株F3为中国农业微生物菌种保藏中心上海食用菌分中心保藏。(保藏号为 4150)选用F3菌株,分别进行工厂化栽培出菇和试管栽培出菇。从培养基和培养料的制备到菌种制备,以及菌丝培养和出菇栽培,条件步骤相 同。不同点在于工厂化栽培出菇选用的是IlOOmL耐高温塑料瓶,装料至瓶口 2cm左右, 约800g,中间打孔至瓶底,接种时使用的是自动接种机接种;搔菌后去掉瓶盖,子实体在瓶 口上方生长;试管栽培出菇选用的是30X250mm玻璃试管,料面距离试管底部约纩10厘米 长,用透气性薄膜包上试管口 ;接种使用手工接种;搔菌后去掉透气性薄膜,子实体还在试 管中生长。然后在菌丝生长速度、子实体外观、栽培周期、抗逆性等方面进行观察记录,评价 其菌种特性。金针菇试管栽培出菇与传统工厂化金针菇栽培出菇方法的比较
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权利要求
一种金针菇出菇育种方法,包括以下步骤(1)制备培养基及培养料;(2)培养料装填将培养料填入试管,压紧,用透气性薄膜包上试管口,皮筋箍紧;(3)金针菇菌种的制备将要选育的金针菇菌种,由母种转接为原种,原种再转接为栽培种;(4)菌种接入在超净工作台上将金针菇栽培种接入试管中培养料上,用透气性薄膜包上试管口,皮筋箍紧,贴上标签;(5)搔菌菌丝长满试管时,将培养基表面的栽培种及老化菌丝挖去;(6)出菇、采收;筛选优质品种。
全文摘要
本发明公开了一种金针菇出菇育种方法,使用该方法选育金针菇菌株具有选育速度快、周期短、能耗少、效率高、遗传稳定、可控性强等特点。
文档编号A01G1/04GK101822172SQ201010183628
公开日2010年9月8日 申请日期2010年5月25日 优先权日2010年5月25日
发明者尚晓冬, 徐珍, 谭琦 申请人:上海市农业科学院;上海科立特农科(集团)有限公司;上海国森生物科技有限公司
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