专利名称：一种液基细胞保存液的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种病理检验，尤其是对人体的子宫颈粘液、痰液、尿液、胸腔液、气管粘液等细胞病理检验时使用的液基细胞保存液。
背景技术：
现有细胞保存液，在固定细胞、保持细胞结构稳定的时间不长，室温下超过三天时间细胞易变质，而且都采用50%甲醇添加甲醛作为固定保鲜剂，易造成细胞成团结块，蛋白质粘液也易结块沉积，不利于细胞的分散和观察。也都无法解决标本内有大量红细胞和粘液问题，因为这些成分会直接影响将细胞制到玻片后的细胞量，造成细胞量的丢失。再者一般的保存液缺少无机盐缓冲液，PH值不稳定，易造成某些成分的细胞破裂丢失，也造成细胞学染色的不稳定。
发明内容
本发明的目的，就是要提供一种即能够较好的保持细胞结构的稳定性，又能保持 PH值稳定，细胞不易成团结块，便于病理检验的液基细胞保存液。本发明的技术解决方案是这样的；一种液基细胞保存液，其特征在于是由以下组分按质量百分比组成的；醇类30% -40%、磷酸钠缓冲液60% -65%、乙二胺四乙酸二钠 (EDTA)0. 3% -0. 32%、氯化钠 0. 08% -0. 12%、氯化钾 0. 03% -0. 05%、甲酸 1% _3%、二硫苏糖醇0. 1% -0. 3%、醋酸钙0. 34% -0. 38%、醋酸镁0. 65% -0. 68%。技术方案中的醇类，是纯度99. 5%的甲醇、乙醇、丙醇等。磷酸钠缓冲液是由磷酸二氢钠(Na2HP04)和二水磷酸氢钠(NaH2P04)储存液混合后加水稀释配制的。经本发明配制的一种液基细胞保存液，其与两种现有技术的液基细胞保存液对比试验结果是；1标本存放三天后离心、涂片、固定、巴氏染色、封片后在镜下观察，结果如下现有技术(1):上皮细胞多，胞膜不够清晰完整，染色偏绿，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞多，红细胞少量。可见上皮细胞不典型增生。现有技术O)上皮细胞多，有少量细胞成团，胞浆胞核清晰完整，上皮细胞染色鲜艳，底层细胞核染色模糊，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞无，红细胞无。可见上皮细胞不典型增生。本发明的液基细胞保存液上皮细胞多，胞浆胞核清晰完整，染色鲜艳，细胞核染色清晰，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞较少，红细胞无。明显可见上皮细胞不典型增生。2标本存放7天后离心、涂片、固定、巴氏染色、封片后在镜下观察，结果如下现有技术(1):上皮细胞偏少，胞浆不够清晰，胞膜有破裂现象，染色偏绿，颈管细胞极少，底层细胞极少，炎细胞多，红细胞少量。较难判断上皮细胞不典型增生。现有技术O):上皮细胞多，细胞成团明显，胞浆清晰完整，上皮细胞染色偏深，有明显黑色成团，底层细胞核染色模糊，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞无，红细胞无。 较难判断上皮细胞不典型增生。本发明的液基细胞保存液上皮细胞多，胞浆胞核清晰完整，染色鲜艳，细胞核染色清晰，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞较少，红细胞无。明显可见上皮细胞不典型增生。使用本发明的液基细胞保存液的有益效果是，不仅可以保持细胞结构的稳定性。 减少细胞粘液的结块沉淀和细胞破裂丢失，还可使细胞易染色，提高细胞制片的清晰度，便于病理检验工作的顺利进行，而且成本低廉，利于推广使用。
具体实施例方式
实施例1 本发明所述的一种液基细胞保存液的配制方法为，按下表组分称量和量取； 磷酸二氢钠(Na2HP04) 42.3mL1mol 二水磷酸氢钠(NaH2P04) 57.7mL1mol 99. 5%的乙醇 420ml 乙二胺四乙酸二钠(EDTA) 3g 氯化钠 1g 氯化钾 0.4g 37%的甲醛 54ml 二硫苏糖醇 2g 醋酸钙 0.35g 醋酸镁 0.64g 本发明所述的一种种液基细胞保存液的配制步骤为；1配制磷酸钠缓冲液用磷酸二氢钠(Na2HP04)和二水磷酸氢钠(NaH2P04)储存
液混合，加水稀释至1000ml，量取618ml 。 2在乙醇中加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA)，加热50-70°C充分溶解。
3在磷酸钠缓冲液中加入含乙二胺四乙酸二钠EDTA的乙醇，得到混合液。
4在混合液中加入氯化钠、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁，搅拌溶解t 5将溶液充分溶解后用冰醋酸调整PH值到6. 5，制成液基细胞保存液。
实施例2 本发明所述的一种液基细胞保存液的配制方法为，按下表组分称量和量取； 磷酸二氢钠(Na2HP04) 44.3mLlmol 二水磷酸氢钠(NaH2P04) 52.7mLlmol 100%的甲醇 410ml 乙二胺四乙酸二钠(EDTA) 2.8g 氯化钠 1g 氯化钾 0. 4g 37%的甲醛 52ml二硫苏糖醇 2.1g
醋酸镁0. 62g本发明所述的一种液基细胞保存液的配制步骤为；1配制磷酸钠缓冲液用磷酸二氢钠(Na2HP04)和二水磷酸氢钠(NaH2P04)储存液混合，加水稀释至1000ml。量取610ml。2在乙醇中加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA)，加热50_70°C充分溶解。3在磷酸钠缓冲液中加入含乙二胺四乙酸二钠EDTA的乙醇，得到混合液。6在混合液中加入氯化钠、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁，搅拌溶解。7将溶液充分溶解后用冰醋酸调整PH值到6. 5，制成液基细胞保存液。
权利要求
1.一种液基细胞保存液，其特征在于是由以下组分按质量百分比组成的；醇类 30% -40%、磷酸钠缓冲液60% -65%、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)O. 3% -0. 32%、氯化钠 0. 08% -0. 12%、氯化钾 0. 03% -0. 05%、甲醛1% -3%、二硫苏糖醇 0. 1% -0. 3%、醋酸钙 0. 34% -0. 38%、醋酸镁 0. 65% -0. 68%。
2.根据权利要求1所述的一种液基细胞保存液，其特征在于是由以下组分按质量百分比组成的；醇类35%、磷酸钠缓冲液62%、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)O. 31%、氯化钠0. 1%, 氯化钾0. 04%、甲醛2%、二硫苏糖醇0.2%、醋酸钙0. 36%、醋酸镁0.67%。
3.根据权利要求1和2所述的一种液基细胞保存液，其特征在于醇类是质量浓度为 99.5% -100%的甲醇、乙醇中的任意一种，甲醛质量浓度为37%。
4.根据权利要求1所述的一种液基细胞保存液，其特征在于磷酸钠缓冲液是由磷酸二氢钠(Na2HP04)和二水磷酸氢钠(NaH2P04)储存液混合后稀释配制的。
5.根据权利要求2所述的一种液基细胞保存液，其特征在于磷酸钠缓冲液是由 57. 7mLlmol磷酸二氢钠(Na2HP04)和42. 3mLlmol 二水磷酸氢钠(NaH2P04)储存液混合后稀释配制的。
全文摘要
本发明涉及一种病理检验，尤其是对人体的子宫颈粘液、痰液、尿液、胸腔液、气管粘液等细胞病理检验时使用的液基细胞保存液。其特征在于是由醇类、磷酸钠缓冲液、乙二胺四乙酸二钠、氯化钠0.08％-0.12％、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁等配制而成，不仅可以保持细胞结构的稳定性。减少细胞粘液的结块沉淀和细胞破裂丢失，还可使细胞易染色，提高细胞制片的清晰度，便于病理检验工作的顺利进行，而且成本低廉，利于推广使用。
文档编号A01N1/02GK102258003SQ20101018536
公开日2011年11月30日 申请日期2010年5月28日 优先权日2010年5月28日
发明者何惠华, 崔可舜, 戴一霏, 杨娟, 杨继洲, 沈红安 申请人:孝感宏翔生物医械技术有限公司, 孝感市中心医院