专利名称：无菌蛆的生产方法
技术领域：
本发明公开了一种无菌蛆的生产方法，尤其是医疗用无菌蛆的生产方法。
背景技术：
用无菌蛆治疗感染创面已经开始在临床中使用。目前，无菌蛆的培养方法一般为幼虫消毒法，例如专利号为97118970. 6的中国专利公开了一种采用幼虫消毒法的无菌蛆生产方法，这种生产方法生产出的无菌蛆一般只能用于制作动物蛋白粉的原料，无法保证每一只蛆虫均为无菌状态，而临床中用于治疗感染创面的蛆虫必须保证每一只均为无菌状态，否则，将造成病人的创面二次感染，因此，这种生产方法难以生产出符合临床使用要求的无菌蛆。
发明内容
本发明的目的在于针对前述现有技术存在的缺点，提供一种生产可以用于临床治疗感染创面的无菌蛆的方法。本发明的目的通过以下技术解决方案来实现本发明的无菌蛆的生产方法，包括选择丝光丽蝇为培养蝇种；丝光丽蝇产卵后取其卵块，用水将卵块潮湿；卵块松软后放入消毒液消毒，同时搅拌使卵相互分离；用无菌生理盐水冲洗虫卵；将消毒后虫卵接种到无菌培养基中，将接种虫卵的无菌培养基放入无菌瓶内培养至出蛆。所述选择丝光丽蝇的方法是用猪肝放于室外，让苍蝇自然产卵，出蛆后将蛆养大， 使其化蛹，将蛹放入培养皿内，数日后蛹即成蝇，辨认蝇种，选择丝光丽蝇放入饲养笼中喂养成为种蝇。所述用水将卵块潮湿的时间为3至10分钟。所述消毒液为3%甲酚皂溶液。所述消毒液消毒时间为5分钟以上。所述无菌生理盐水冲洗虫卵连续3次以上。所述无菌培养基用纱布、豆蛋白粉及酵母制成，纱布为二层以上，用水潮湿。所述无菌培养基还可以为带羊血的琼脂，灭菌后制成。本方法是根据蛆的生活条件、生长特点发明的。一般在10万级以上的超净工作间或养殖间内使用本方法生产无菌蛆。首先应选择丝光丽蝇为培养蝇种，可以用猪肝放于室外，让苍蝇自然产卵，出蛆后将蛆养大，使其化蛹，将蛹放入培养皿内，数日后蛹即成蝇，辨认蝇种，选择丝光丽蝇放入饲养笼中喂养成为种蝇，将其他蝇种弄死。种蝇丝光丽蝇产卵后，取卵块，用水使其潮湿3至10分钟，使其松软后将卵块放入消毒液，消毒5分钟以上，同时使用塑料镊子尽可能弄开卵块，使虫卵相互分离。然后使用无菌生理盐水冲洗虫卵。将消毒后虫卵接种到无菌培养基中，将虫卵及培养基放入无菌瓶内，培养基上方覆盖潮湿纱布若干层，以增加瓶内湿度，培养基、潮湿纱布与瓶口之间留有通道以免虫卵窒息死亡。同时取部分虫卵在无菌细菌培养基培养，第二天观察细菌培养基，如无细菌生长，则瓶内虫卵培养至出蛆，蛆虫应为无菌，可供临床使用。本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果由于选择丝光丽蝇，并采用虫卵消毒法，生产出的无菌蛆虫可达到临床使用的要求，因此，本发明有利于使用无菌蛆对感染创面进行生物治疗的临床推广。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例一首先应选择丝光丽蝇为培养蝇种，可以用猪肝放于室外，让苍蝇自然产卵，出蛆后将蛆养大，使其化蛹，将蛹放入培养皿内，数日后蛹即成蝇，辨认蝇种，选择丝光丽蝇放入饲养笼中喂养成为种蝇，将其他蝇种弄死。丝光丽蝇产卵后，取卵块，用水使其潮湿3至10分钟，使其松软后将卵块放入3%甲酚皂溶液，消毒5分钟，同时使用塑料镊子尽可能弄开卵块，使虫卵相互分离。然后使用无菌生理盐水连续冲洗虫卵3次。将消毒后虫卵接种到由纱布、豆蛋白粉及酵母制成的无菌培养基中，将虫卵及培养基放入无菌瓶内，培养基上方覆盖潮湿纱布二层或二层以上，以增加瓶内湿度，培养基、潮湿纱布与瓶口之间留有通道以免虫卵窒息死亡，出蛆后供临床使用。实施例二亦可使用带羊血的琼脂培养基，放入培养皿，灭菌后制成无菌培养基。将无菌虫卵接种于培养基，出蛆后，再将1天龄无菌蛆虫转入无菌瓶内，供临床使用。其它步骤与方法同实施例一。除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。
权利要求
1.一种无菌蛆的生产方法，其特征在于选择丝光丽蝇为培养蝇种；丝光丽蝇产卵后取其卵块，用水将卵块潮湿；卵块松软后放入消毒液消毒，同时搅拌使卵相互分离；用无菌生理盐水冲洗虫卵；将消毒后虫卵接种到无菌培养基中，将接种虫卵的无菌培养基放入无菌瓶内培养至出蛆。
2.根据权利要求1所述的无菌蛆的生产方法，其特征在于所述选择丝光丽蝇的方法是用猪肝放于室外，让苍蝇自然产卵，出蛆后将蛆养大，使其化蛹，将蛹放入培养皿内，数日后蛹即成蝇，辨认蝇种，选择丝光丽蝇放入饲养笼中喂养成为种蝇。
3.根据权利要求1所述的无菌蛆的生产方法，其特征在于所述用水将卵块潮湿的时间为3至5分钟。
4.根据权利要求1所述的无菌蛆的生产方法，其特征在于所述消毒液为3%甲酚皂溶液。
5.根据权利要求1所述的无菌蛆的生产方法，其特征在于所述消毒液消毒时间为5 分钟以上。
6.根据权利要求1所述的无菌蛆的生产方法，其特征在于所述无菌生理盐水冲洗虫卵连续3次以上。
7.根据权利要求1所述的无菌蛆的生产方法，其特征在于所述无菌培养基由纱布、豆蛋白粉及酵母组成，纱布为二层以上，用水潮湿。
8.根据权利要求1所述的无菌蛆的生产方法，其特征在于所述无菌培养基还可以是带羊血的琼脂，灭菌后制成。
全文摘要
本发明涉及一种无菌蛆的生产方法，尤其是医用无菌蛆的生产方法。本发明提供一种无菌蛆的生产方法，包括以下步骤选择丝光丽蝇为培养蝇种；丝光丽蝇产卵后取其卵块，用水将卵块潮湿；卵块松软后放入消毒液消毒，同时搅拌使卵相互分离；用无菌生理盐水冲洗虫卵；将消毒后虫卵接种到无菌培养基中，将接种虫卵的无菌培养基放入无菌瓶内培养至出蛆。本发明生产的无菌蛆可以用于临床治疗感染创面，有利于无菌蛆生物治疗方法在临床中的推广应用。
文档编号A01K67/033GK102550487SQ20111002375
公开日2012年7月11日 申请日期2011年1月21日 优先权日2011年1月21日
发明者王爱萍, 蒋克春 申请人:中国人民解放军第四五四医院