专利名称：白子菜的人工培育方法
技术领域：
本发明属于植物人工培育技术领域，具体涉及一种白子菜的人工培育方法。
背景技术：
白子菜Gynura divaricata (Linn. ) DC.，又名白背三七，菊科菊三七属，多年生草本植物，主要分布于台湾至华南、西南一带，具有食用和药用的双重价值。白子菜的嫩梢和嫩叶可作为蔬菜或加工成食品，口感好，营养丰富。白子菜中含有含量较高的钙、钾、钠、 镁、铁等矿物质，其中钙、铁的含量是普通绿叶蔬菜的几倍甚至几十倍。白子菜中还富含多种有益于人体健康的活性成分，如可溶性膳食纤维、植物多糖、黄酮类物质，对人体有一定的营养保健作用。白子菜已被批准为新资源食品，对于增加我国蔬菜花色品种，提高蔬菜渡淡(渡过淡季)能力，丰富“菜篮子”均有重要意义。白子菜的全草均可入药，味辛、淡、性平，具有清热凉血、活血止痛、止血之效的药用价值，根入药有泻火、凉血、生津之效，对于跌打损伤、血瘀肿痛、风湿骨痛、痈疮肿毒、乳痈等均有显著的疗效。白子菜由于其食用和药用的双重性以及其内含降压、降糖、降脂即“降三高“成分的独特性符合社会发展、消费市场以及人类健康的需求，因此迫切需要建立白子菜的产业化生产模式。然而，目前白子菜只在我国南方少数地区有人工栽培，但缺乏科学繁殖和大面积人工栽培技术，不能保障种苗的数量、品质和优势特性，北方地区由于自然条件的限制而不能实现白子菜的推广种植。
发明内容
本发明为解决目前北方地区由于自然条件限制而不能推广种植白子菜，提供一种白子菜的人工培育方法，保证其在北方地区也能正常生长，并保持其品质和优势特性。本发明是采用以下技术方案实现的一种白子菜的人工培育方法，包括以下步骤
(1)选取白子菜优株(指遗传性状稳定、长势良好、株高0.7-1.Om的健康植株)，剪取顶芽，灭菌后剥离出幼小顶芽作为外植体；
(2)选取无剥离伤痕的幼小顶芽，接种在附加2.0-4.0mg/L&6-BA(6-苄氨基嘌呤) 和0. 1-0. 6mg/L的ΝΑΑ( α -萘乙酸)的诱导培养基上进行芽诱导；
(3)将诱导出的叶芽切离原外植体，接种在附加2.0-4.Omg/L 6-BA (6-苄氨基嘌呤) 和0. 1-0. 6mg/L ΝΑΑ(α-萘乙酸)的继代增殖培养基上进行增殖培养；
(4)切取继代增殖培养基上生长正常、长度1.5-2. Ocm的芽，接种在附加0. 6-1. Omg/L 的I-BA (吲哚-6- 丁酸)和0. 1-0. 6mg/L的NAA ( α -萘乙酸)的生根培养基上进行生根培养，得到生根的组培苗；
上述诱导培养基和继代增殖培养基以MS培养基为基本培养基，生根培养基以1/2 MS 培养基为基本培养基，三种培养基均附加重量百分比为2. 5%的蔗糖、重量百分比为0. 6%的琼脂，PH值调至5-7 ；三种培养条件均为室温控制在20-30°C，湿度保持在75%，光照强度为800-30001x，光照时间为 14h/d ；
(5)将生根的组培苗置于与培养基培养时相同温湿度的环境中穴盘移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基质，灭菌、遮阴、水肥保障，5-7天即可达种植标准(根长为 1. 0-1. 5cm)；
(6)4至9月进行大田种植，选择地势向阳、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，亩施腐熟有机肥(即怄制农家肥)2000-3000kg，拌施3 kg/亩的辛硫磷颗粒以杀灭地下害虫，按照
1.0-1. 5m宽度起垄，垄高20-30cm，垄上覆膜，垄侧种植，穴距40cm，亩植3000-3200株，移植当天灌水，隔十天再灌水一次，封垄前中耕，生长期保持土壤水分含量为50-70%，可随水追施有机肥或喷施腐植酸叶面肥2-3次，注意遮阴和防冻，使高温不高于60°C、低温不低于 15°C，以防虫网和粘板防虫为主，当虫害严重时，喷施2500倍(倍数浓度，指1份农药的加水倍数，常用重量来表示)10% (百分比浓度，指100份药液中含农药有效成分的份数)二氯苯醚菊酯乳油，喷药间隔期5-10天，不超过三次，正常生长45天即可舒枝采收茎叶。组织培养作为一种快繁技术，选取合适的外植体，通过无菌操作，在人工条件下培育再生植株。试管繁殖属于组织培养，是一种微型的无性繁殖，取材于同一个体的体细胞而非性细胞，因此其后代遗传性非常一致，能保持原有品种的优良性状，对保质、保纯有着特殊作用。试管繁殖是在人工控制的条件下进行的集约化生产，不受自然条件中季节和天气的限制，可以全年进行连续生产，从取材-接种-培养-生根-移栽，实现工厂化生产以及反季节生产。在进行植物组织培养时，经常会出现试管苗玻璃化现象，这是植物组织培养过程中特有的一种生理失调或生理病变。琼脂或蔗糖浓度与玻璃化成负相关，琼脂或蔗糖浓度越高，玻璃化的比率越低。培养基中BA浓度或培养温度与玻璃化成正相关，BA浓度或培养基温度越高，玻璃化比率越大。通过增加琼脂和蔗糖的浓度，适当提高培养基中琼脂和蔗糖的含量，有效降低了试管苗的玻璃化比率。关于三种培养基附加激素的配比问题，诱导培养基和继代增殖培养基使用
2.0-4. Omg/L的6-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA，既可以获得较高的繁殖系数，又可以获得理想的幼芽萌发率；生根培养基使用0. 6-1. Omg/L的I-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA，既可以获得较高的生根系数，同时又能把小植株玻璃化和愈伤组织的发生控制到最低比率，而且小植株生长健壮，叶片正常，生产效率高。本发明通过实践证明，有效的白子菜的组培快速繁殖技术路线为无菌材料获取-不定芽诱导-壮芽继代增殖培养-生根培养-炼苗-试管苗移植栽培，一方面通过调控培养基及其附加激素的浓度和比例进行芽诱导和继代增殖培养，保持原植物特性，增强其环境适应性，另一方面以独特的种植布局和合理的温湿度控制，加之规范的田间作业保证其品质和产量，取得培养时间短、出苗快、变异少、植株质量好、生产效率高的效果。通过创设与北方种植白子菜相适应的环境条件，以利于白子菜在原本不适合栽培的北方环境条件下可以大范围种植。本发明所述的白子菜的人工培育方法，对原种苗进行了脱毒、优化，保持了种苗的优势特性，改善了植株的适应性，获得种苗整齐、健壮。该方法具有组培周期短、繁殖速度快的特点，一般一个顶芽可繁殖30株，45天即可完成一个组培周期，并且移栽成活率在 85%_95%之间，适于北方种植。按照本发明所述的白子菜的人工培育方法，即可快速高效获得优质的白子菜种苗，又能保证其在北方地区的自然条件下推广种植，形成规模化产业，从而满足市场需求。
具体实施例方式
一种白子菜的人工培育方法，包括以下步骤
(1)选取引种驯化经塑料大棚栽培后遗传性状稳定、长势良好、株高0.7-1. Om的白子菜优株，剪取顶芽，去除外围较大叶片，用自来水冲洗约30min，在超净工作台上先用75%酒精溶液浸泡30s，再用0. 1%氯化汞溶液浸泡IOmin左右，无菌水冲洗5_6次，无菌吸水纸吸干后剥离出幼小顶芽作为外植体；
(2)在通过污染关的无菌外植体材料中选取无剥离伤痕的幼小顶芽，接种在附加 2. 0-4. Omg/L (2. O mg/L 或 3· O mg/L 或 4· O mg/L)的 6-BA 和 0· 1-0. 6mg/L (0· 1 mg/L 或 0. 3 mg/L或0. 6 mg/L)的NAA的诱导培养基上进行芽诱导；
(3)将诱导出的叶芽切离原外植体，接种在附加2.0-4. Omg/L (2.0 mg/L或3. O mg/L 或 4· O mg/L) 6-BA 和 0. 1-0. 6mg/L (0· 1 mg/L 或 0. 3 mg/L 或 0. 6 mg/L) NAA 的继代增殖培养基上进行增殖培养；
(4)切取继代增殖培养基上生长正常、长度1.5-2. Ocm的芽，接种在附加0. 6-1. Omg/L (0. 6 mg/L 或 0. 8 mg/L 或 1· O mg/L)的 I-BA 和 0. 1-0. 6mg/L (0. 1 mg/L 或 0. 3 mg/L 或
0.6 mg/L)的NAA的生根培养基上进行生根培养，得到生根的组培苗；
上述诱导培养基和继代增殖培养基以MS培养基为基本培养基，生根培养基以1/2 MS 培养基为基本培养基，三种培养基均附加重量百分比为2. 5%的蔗糖、重量百分比为0. 6%的琼脂，PH值调至5-7 ；三种培养条件均为室温控制在20-30°C，湿度保持在75%，光照强度为 800-3000 lx，光照时间为 14 h/d ；
(5)将生根的组培苗置于与培养基培养时相同温湿度的环境中穴盘移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基质，灭菌、遮阴、水肥保障，5-7天即可达到根长为
1.0-1. 5cm的种植标准；
(6)4至9月进行大田种植，选择地势向阳、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，亩施腐熟有机肥2000-3000kg，拌施3 kg/亩的辛硫磷颗粒以杀灭地下害虫，按照1. 0-1. 5m宽度起垄，垄高20-30cm，垄上覆膜，垄侧种植，穴距40cm，亩植3000-3200株，移植当天灌水，隔十天再灌水一次，封垄前中耕，生长期保持土壤水分含量为50-70%，可随水追施有机肥或喷施腐植酸叶面肥2-3次，注意遮阴和防冻，使高温不高于60°C、低温不低于15°C，以防虫网和粘板防虫为主，当虫害严重时，喷施2500倍10% 二氯苯醚菊酯乳油，喷药间隔期5-10天，不超过三次，正常生长45天即可舒枝采收茎叶。
权利要求
1.一种白子菜的人工培育方法，其特征在于包括以下步骤(1)选取白子菜优株，剪取顶芽，灭菌后剥离出幼小顶芽作为外植体；(2)选取无剥离伤痕的幼小顶芽，接种在附加2.0-4. Omg/L的6-BA和0. 1-0. 6mg/L的 NAA的诱导培养基上进行芽诱导；(3)将诱导出的叶芽切离原外植体，接种在附加2.0-4. Omg/L 6-BA和0. 1-0. 6mg/L NAA的继代增殖培养基上进行增殖培养；(4)切取继代增殖培养基上生长正常、长度1.5-2. Ocm的芽，接种在附加0. 6-1. Omg/L 的I-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA的生根培养基上进行生根培养，得到生根的组培苗；上述诱导培养基和继代增殖培养基以MS培养基为基本培养基，生根培养基以1/2 MS 培养基为基本培养基，三种培养基均附加重量百分比为2. 5%的蔗糖、重量百分比为0. 6%的琼脂，PH值调至5-7 ；三种培养条件均为室温控制在20-30°C，湿度保持在75%，光照强度为 800-30001x，光照时间为 14h/d ；(5)将生根的组培苗置于与培养基培养时相同温湿度的环境中穴盘移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基质，灭菌、遮阴、水肥保障，5-7天即可达种植标准；(6)4至9月进行大田种植，选择地势向阳、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，亩施腐熟有机肥2000-3000kg，拌施3 kg/亩的辛硫磷颗粒以杀灭地下害虫，按照1. 0-1. 5m宽度起垄，垄高20-30cm，垄上覆膜，垄侧种植，穴距40cm，亩植3000-3200株，移植当天灌水，隔十天再灌水一次，封垄前中耕，生长期保持土壤水分含量为50-70%，可随水追施有机肥或喷施腐植酸叶面肥2-3次，注意遮阴和防冻，使高温不高于60°C、低温不低于15°C，以防虫网和粘板防虫为主，当虫害严重时，喷施2500倍10% 二氯苯醚菊酯乳油，喷药间隔期5-10天，不超过三次，正常生长45天即可舒枝采收茎叶。
2.根据权利要求1所述的白子菜的人工培育方法，其特征在于所述的白子菜优株为遗传性状稳定、长势良好、株高0. 7-1. Om的健康植株。
全文摘要
本发明属于植物人工培育技术领域，具体涉及一种白子菜的人工培育方法。为解决目前北方地区由于自然条件限制而不能推广种植白子菜，提供一种白子菜的人工培育方法，保证其在北方地区也能正常生长，并保持其品质和优势特性。本发明通过实践证明，有效的白子菜的组培快速繁殖技术路线为无菌材料获取-不定芽诱导-壮芽继代增殖培养-生根培养-炼苗-试管苗移植栽培，一方面通过调控培养基及其附加激素的浓度和比例进行芽诱导和继代增殖培养，保持原植物特性，增强其环境适应性，另一方面以独特的种植布局和合理的温湿度控制，加之规范的田间作业保证其品质和产量，取得培养时间短、出苗快、变异少、植株质量好、生产效率高的效果。
文档编号A01G1/00GK102224803SQ201110114588
公开日2011年10月26日 申请日期2011年5月5日 优先权日2011年5月5日
发明者卫小平, 张文华, 张永红, 高俊宪 申请人:山西菩净生物科技有限公司