一种蝴蝶兰的无性繁殖方法

文档序号:174399阅读:448来源:国知局
专利名称:一种蝴蝶兰的无性繁殖方法
技术领域
本发明涉及一种洋兰的无性繁殖方法,特别是蝴蝶兰的无性繁殖方法。
背景技术
蝴蝶兰(Phalaenopsis sp.)是兰科蝴蝶兰属多年生常绿附生草本植物,属于热带气生兰,容易栽培,花形似蝴蝶,形态优美,色彩丰富,花期颇长,素有“洋兰皇后”之美誉,是近年来最受欢迎的洋兰之一。蝴蝶兰是单茎性气生兰,植株自身不分蘖,极少发育侧芽,由于其花器结构的特殊性,自然条件下不能完成受粉,所以很难得到种子;进行人工授粉获得种子,种子的萌发率也只有20%左右,在人工培养基上诱导其种子萌发,为蝴蝶兰产业化的发展开辟了新的快速繁殖途径,但是繁殖出的苗变异多,种苗生长不一致。蝴蝶兰常规的无性繁殖基本上无法进行,因此利用组织培养手段辅助蝴蝶兰进行非常规的无性繁殖(也就是芽切芽繁殖),获得优质蝴蝶兰种苗,从而提高繁殖速度,是目前解决生产上需要的大量蝴蝶兰种苗的重要手段。

发明内容
针对上述问题,本发明提供了一种蝴蝶兰的无性繁殖方法。为了实现本发明的上述目的,本发明采用如下技术方案,其以蝴蝶兰花梗腋芽作为外植体,接种到培养基中进行芽诱导培养,接着将诱导出的新芽依次进行继代培养、生根培养和移栽培养。腋芽为蝴蝶兰花梗基部4 5节的腋芽。具体的培养步骤为,(I)将蝴蝶兰花梗带花苞的部分剪掉,其它部分清洗后进行杀菌处理;杀菌后,将花梗的芽点向上斜插接种在芽诱导培养基中,接种量为0. I 0. 2g/ml##s,在温度23 27°C,光照强度2000 3000Lux条件下培养30 40天;使之在人工配制的培养基中实现分蘖;(2)将步骤(I)诱导出的芽从花梗段上切下,2 3株为一组,接种到丛生芽诱导培养基中进行继代培养,接种量为0. I 0. 2g/ml±_基,在温度23 27°C,光照强度2000 3000Lux条件下培养,继代周期为40 50天;(3)将继代9代的芽切分成独立的单株,接种在生根培养基中进行生根培养,接种量为0. I 0. 2g/ml培养基,在温度23 27°C,光照强度2000 3000Lux条件下培养,2 3 个月后即可出瓶移栽。步骤(I)中所述的蝴蝶兰花梗为已有花苞未开花、开花中或花朵已凋谢的蝴蝶兰的花梗。步骤(I)中所述的杀菌处理步骤为,在超净工作台上,将冲洗好的花梗剪切成5cm 长的小段,每段带有一个腋芽,将腋芽上的苞片剥去,首先在75wt%的酒精溶液中浸一下, 用滤纸吸干酒精,然后放入0. Iwt %浓度的升汞溶液中杀菌8 15分钟,最后用无菌水冲洗3 4遍,用滤纸吸干水放在培养皿中备用。步骤⑴中所述的芽诱导培养基的组成为,1/3MS或花宝I号2. 5 3. 5g -F'+BA I 3mg I :+NAA 0. I 0. 3mg .I1+ 鹿糖 20 30g .I1+ 香蓮 30 50g I、步骤⑵中所述的丛生芽诱导培养基的组成为,1/2MS+BA0. I 0. 5mg F1+蔗糖 20 30g I L步骤(3)中所述的生根培养基的组成为,1/2MS或花宝I号2. 5 3. 5g F'+NAA 0 Img I丨+鹿糖20 30g I丨+活性炭I 2g I丨+香蕉100 200g ^l10步骤(3)中所述的出瓶移栽选取的是生有2 3条根、叶片数为2 3个的蝴蝶
兰组培苗。
本发明的有益效果本发明公布了一种蝴蝶兰的无性繁殖方法,使蝴蝶兰在人工配制的培养基中实现分蘖,打破了蝴蝶兰单茎性的生殖特点,此方法不用伤害蝴蝶兰母株即可得到用来诱导的花梗苗,而且可以反复使用同一母株的花梗。本发明生产出的种苗健壮、整齐一致,可以解决生产上优质蝴蝶兰种苗的来源问题,可以创造更大的经济和社会效益。
具体实施例方式实施例I选取刚刚抽花箭有花苞的蝴蝶兰成熟母株“千惠玫瑰”的花梗作为外植体,用洗衣粉水清洗一下,然后放在流水下冲洗30 40分钟,在超净工作台上将冲洗好的花梗剪切成 5cm长的小段,每段带有一个腋芽,将腋芽上的苞片剥去,首先在75wt %的酒精溶液中浸一下,用滤纸吸干酒精,然后放入0. lwt%浓度的升汞溶液中杀菌8分钟,最后用无菌水冲洗3 遍,用滤纸吸干水放在培养皿中。将花梗两侧各切下0.5cm,然后芽点向上斜插接种在芽诱导培养基中,接种量为
0.lg/ml##a,在温度23°C,光照强度3000LUX的条件下培养30天,芽诱导培养基的组成为, 1/3MS+BA Img F'+NAAO. Img I—1+ 蔗糖 20g I—1+ 香蕉 50g I-1。每个芽点能诱导 I 株苗, 极少数能诱导出2株苗。将诱导出的芽从花梗段上切下,2个芽的不用切开,连在一起接种到丛生芽诱导培养基中,接种量为0. lg/ml##s,,在温度27°C,光照强度3000LUX的条件下进行继代培养,, 继代周期为40天,丛生芽诱导培养基的组成为,1/2MS+BA 0. 5mg F1+蔗糖30g F10将继代9代的芽切分成独立的单株,接种在生根培养基中,接种量为0. IgMim 基,,在温度27°C,光照强度2000LUX条件下进行生根培养,生根培养基的组成为,1/2MS+NAA Img r1+蔗糖30g r1+活性炭Ig r1+香蕉ioog r1。2个月后选取的是生有2 3条根、叶片数为2 3个的蝴蝶兰组培苗进行出瓶移栽。实施例2选取正在开花中的蝴蝶兰成熟母株“巨宝红玫瑰”的花梗作为外植体,用洗衣粉水清洗一下,然后放在流水下冲洗30 40分钟,在超净工作台上将冲洗好的花梗剪切成5cm 长的小段,每段带有一个腋芽,将腋芽上的苞片剥去,首先在75wt%的酒精溶液中浸一下, 用滤纸吸干酒精,然后放入0. Iwt %浓度的升汞溶液中杀菌10分钟,最后用无菌水冲洗3 4遍,用滤纸吸干水放在培养皿中。
将花梗两侧各切下0.5cm,然后芽点向上斜插接种在芽诱导培养基中,接种量为
0.2g/ml##s,,在温度27°C,光照强度3000LUX的条件下培养40天,芽诱导培养基的组成为,花宝 I 号 3. 5g F^BA 3mg F1+NAA 0. 2mg r1+鹿糖 30g r1+香蕉 30g F10 每个芽点能诱导I株苗,极少数能诱导出2株苗。将诱导出的芽从花梗段上切下,2个芽的不用切开,连在一起接种到丛生芽诱导培养基中,接种量为0. lg/ml##s,,在温度为25°C,光照强度3000Lux的条件下进行继代培养,继代周期为40天,丛生芽诱导培养基的组成为,1/2MS+BA 0. Img F1+蔗糖20g F10将继代9代的芽切分成独立的单株,接种在生根培养基中,接种量为0. 2g/ml # 养基,,在温度为25°C,光照强度2000LUX的条件下进行生根培养,生根培养基的组成为, 1/2MS+NAA 0. 5mg I—1+ 蔗糖 20g I—1+ 活性炭 Ig I—1+ 香蕉 200g .I-1。3 个月后选取的是生有2 3条根、叶片数为2 3个的蝴蝶兰组培苗进行出瓶移栽实施例3选取花苞完全开放的蝴蝶兰成熟母株“红太子”的花梗作为外植体,用洗衣粉水清洗一下,然后放在流水下冲洗30 40分钟,在超净工作台上将冲洗好的花梗剪切成5cm长的小段,每段带有一个腋芽,将腋芽上的苞片剥去,首先在75wt %的酒精溶液中浸一下,用滤纸吸干酒精,然后放入0. lwt%&度的升汞溶液中杀菌12分钟,最后用无菌水冲洗3 4 遍,用滤纸吸干水放在培养皿中。将花梗两侧各切下0.5cm,然后芽点向上斜插接种在芽诱导培养基中,接种量为
0.lg/ml##s,,在温度23°C,光照强度3000LUX的条件下培养30天,芽诱导培养基的组成为,花宝 I 号 2. 5g F^BA 2mg F1+NAA 0. 3mg r1+鹿糖 20g r1+香蕉 30g F10 每个芽点能诱导I株苗,极少数能诱导出2株苗。将诱导出的芽从花梗段上切下,2个芽的不用切开,连在一起接种到丛生芽诱导培养基中进行继代培养,接种量为0. 2g/ml##s,,在温度为25°C,光照强度3000LUX的条件下进行继代培养,继代周期为50天,丛生芽诱导培养基的组成为,1/2MS+BA 0. 3mg r1+蔗糖 30g I 1O将继代9代的芽切分成独立的单株,接种在生根培养基中进行生根培养,接种量为0. lg/ml ,在温度为27°C,光照强度3000LUX的条件下进行继代培养,生根培养基的组成为,花宝 I 号 3. 5g F'+NAAO. 2mg I—1+ 蔗糖 30g I—1+ 活性炭 Ig I—1+ 香蕉 200g I-1。 3个月后选取的是生有2 3条根、叶片数为2 3个的蝴蝶兰组培苗进行出瓶移栽。实施例4选取花苞已凋谢的蝴蝶兰成熟母株“红龙”的花梗作为外植体,用洗衣粉水清洗一下,然后放在流水下冲洗30 40分钟,在超净工作台上将冲洗好的花梗剪切成5cm长的小段,每段带有一个腋芽,将腋芽上的苞片剥去,首先在75wt%的酒精溶液中浸一下,用滤纸吸干酒精,然后放入0. lwt%浓度的升汞溶液中杀菌15分钟,最后用无菌水冲洗3 4遍, 用滤纸吸干水放在培养皿中。将花梗两侧各切下0. 5cm,然后芽点向上斜插接种在芽诱导培养基中。接种量为
0.lg/ml##s,,在温度27°C,光照强度3000LUX的条件下培养40天,芽诱导培养基的组成为,1/3MS+BA Img F'+NAA 0. 3mg I—1+ 蔗糖 20g I—1+ 香蕉 50g I-1。每个芽点能诱导 I 株苗,极少数能诱导出2株苗。
将诱导出的芽从花梗段上切下,2个芽的不用切开,连在一起接种到丛生芽诱导培养基中进行继代培养。接种量为0. lg/ml##s,,在温度27°C,光照强度3000LUX的条件下进行继代培养,继代周期为50天,丛生芽诱导培养基的组成为,1/2MS+BA 0. 2mg r1+蔗糖 30g I 1O 将继代9代的芽切分成独立的单株,接种在生根培养基中进行生根培养,接种量为0. lg/ml ,在温度27°C,光照强度2000条件下进行生根培养,生根培养基的组成为, 花宝I号2.5g r1+蔗糖30g r1+活性炭2g r1+香蕉ioog r1。3个月后选取的是生有2 3条根、叶片数为2 3个的蝴蝶兰组培苗进行出瓶移栽。实施例中的“千惠玫瑰”、“巨宝红玫瑰”、“红太子”、“红龙”购自中鼎生物科技(上海)有限公司。
权利要求
1.一种蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,以蝴蝶兰花梗腋芽作为外植体,接种到培养基中进行芽诱导培养,接着将诱导出的新芽依次进行继代培养、生根培养和移栽培养。
2.根据权利要求I所述的蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,具体的培养步骤为,(1)将蝴蝶兰花梗带花苞的部分剪掉,其它部分清洗后进行杀菌处理;杀菌后,将花梗的芽点向上斜插接种在芽诱导培养基中,接种量为0. I 0. 2g/ml##s,在温度23 27°C, 光照强度2000 3000Lux的条件下培养30 40天;(2)将步骤(I)诱导出的芽从花梗段上切下,2 3株为一组,接种到丛生芽诱导培养基中进行继代培养,接种量为0. I 0. 2g/ml##基,在温度23 27°C,光照强度2000 3000Lux的条件下培养,继代周期为40 50天;(3)将继代9代的芽切分成独立的单株,接种在生根培养基中进行生根培养,接种量为 0. I 0. 2g/ml ■基,在温度23 27°C,光照强度2000 3000Lux的条件下培养,2 3个月后即可出瓶移栽。
3.根据权利要求2所述的蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,步骤(I)中所述的蝴蝶兰花梗为已有花苞未开花、开花中或花朵已凋谢的蝴蝶兰的花梗。
4.根据权利要求2所述的蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,步骤(I)中所述的杀菌处理步骤为,在超净工作台上,将冲洗好的花梗剪切成5cm长的小段,每段带有一个腋芽,将腋芽上的苞片剥去,首先在75wt%的酒精溶液中浸一下,用滤纸吸干酒精,然后放入 0. lwt%&度的升萊溶液中杀菌8 15分钟,最后用无菌水冲洗3 4遍,用滤纸吸干水放在培养皿中备用。
5.根据权利要求2所述的蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,步骤(I)中所述的芽诱导培养基的组成为,1/3MS或花宝I号2. 5 3. 5g F'+BA I 3mg F'+NAA 0. I 0. 3mg .I1+ 鹿糖 20 30g .I1+ 香蕉 30 50g I、
6.根据权利要求2所述的蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,步骤(2)中所述的丛生芽诱导培养基的组成为,1/2MS+BA 0. I 0. 5mg I—1+蔗糖20 30g I-1。
7.根据权利要求2所述的蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,步骤(3)中所述的生根培养基的组成为,1/2MS或花宝I号2. 5 3. 5g .r1+NAA 0 Img .r1+蔗糖20 30g .r1+ 活性炭I 2g r1+香蕉loo 200g r1。
8.根据权利要求2所述的蝴蝶兰的无性繁殖方法,其特征在于,步骤(3)中所述的出瓶移栽选取的是生有2 3条根、叶片数为2 3个的蝴蝶兰组培苗。
全文摘要
本发明涉及一种洋兰的无性繁殖方法,特别是蝴蝶兰的无性繁殖方法。本发明提供了一种蝴蝶兰的无性繁殖方法。以蝴蝶兰花梗腋芽作为外植体,接种到培养基中进行培养,接着将诱导出的新芽依次进行继代培养、生根培养和移栽培养。本发明使蝴蝶兰在人工配制的培养基中实现分蘖,打破了蝴蝶兰单茎性的生殖特点,此方法不用伤害蝴蝶兰母株即可得到用来诱导的花梗苗,而且可以反复使用同一母株的花梗。本发明生产出的种苗健壮、整齐一致,可以解决生产上优质蝴蝶兰种苗的来源问题,可以创造更大的经济和社会效益。
文档编号A01H4/00GK102613076SQ20121008107
公开日2012年8月1日 申请日期2012年3月26日 优先权日2012年3月26日
发明者印东生, 吴海红, 姚园媛, 屈连伟, 崔玥晗, 李丹, 杨佳明, 潘百涛, 王茹, 胡新颖, 苏胜举, 赵兴华, 邢桂梅 申请人:吴海红
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