专利名称：人工培育水蛭蛆虫的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及人工培育昆虫的工艺，尤其是人工培育水蛭蛆虫的工艺。
背景技术：
水蛭为水蛭科动物蚂蟥、柳叶蚂蟥及水蛭的全体，水蛭辛、咸、苦、平、有毒、入肝经。水蛭的药用品种即有不吸哺乳动物血液的宽体金线蛭和尖细金线蛭，也包括吸食哺乳动物血液的日本医蛭、湖北牛蛭及菲牛蛭等多个品种。目前国际上将吸食吸哺乳动物血液、其唾液腺分泌物中含有水蛭素等多种生物活性物质，并且在医药上具有广阔应用前景的蛭类动物统称为医学蛭类。 目前蛭类药物已用于抗血小板聚集、抗半乳糖白内障、抗脑血栓、高血压、冠心病、治疗静脉曲张、愈合皮肤等方面。CN1844911公开了一种水蛭指纹图谱的建立方法和水蛭药材的鉴别方法，用液相色谱仪检测并建立标准指纹图谱。CN101245110公开了重组白细胞抑制因子和水蛭原嵌合蛋白及其药物组合物，其cDNA基因含有该cDNA基因的重组载体，用该载体转化的微生物，以及含有该重组白细胞抑制因子和水蛭原嵌合蛋白的药物组合物。CN101204402公开了一种水蛭的真空冷冻干燥工艺，将水蛭预冻、切割、真空冷冻干燥。CN1883510公开了一种以吸血水蛭为原料制备水蛭素的方法与应用，该方法包括水蛭制浆，配制悬浮液和干燥三个步骤。水蛭作为药材应用范围越来越广，水蛭中除水蛭素外，还有水蛭透明质酸酶、前列腺素等药用成份，但水蛭中含量较少，提取和纯化过程非常困难，重组水蛭素及转基因水蛭素技术成本较高，制约了水蛭的应用。
发明内容
本发明提供一种人工培育水蛭蛆虫工艺，以吸食哺乳动物血液和不吸食哺乳动物血液的水蛭为原料，通过温和的生物处理方法，提高了水蛭应用效率和应用范围。本发明的目的是通过以下技术方案解决的(I)水蛭粉碎至粉末状；(2)与水混合搅拌成水蛭糊状物；(3)水蛭糊状物高温杀菌；(4)谷物糠及水蛭糊状物用中药处理，并生成蛆卵；(5)配制幼蛆培养液进行幼蛆培殖；(6)配制蛆虫培养液进行蛆虫培育；(7)蛆虫分离、清洗、灭活；(8)蛆虫干燥；(9)蛆虫包装。具体步骤如下
(1)水蛭粉碎至粉末状，
(2)与水混合搅拌成水蛭糊状物；
(3)水蛭糊状物高温杀菌；
(4)谷物糠麸及水蛭糊状物用中药处理形成虫卵培养液，所述虫卵培养液由IOOg谷物糠麸、水蛭糊状物O. 2-50g、丁香粉0-10g、苍术粉0_5g、藿香0-8g、0-20g木香粉和0-5. Og草乌粉混合而成，保持温度30-55°C、时间48-240h，生成虫卵；(5)幼蛆培殖配制幼蛆培养液，所述幼蛆培养液由I-IOOg水蛭糊状物、0-200g蛋白腺、5_10g酵母抽提粉、O-IOg木香粉、O-IOg霍香、0_30g苍术粉、0_20g中药丁香粉、2-10gNaCl或KCl、0-100g大豆分离蛋白、O. 5-1. OL纯净水混合而成，分装于三角烧瓶中，灭菌后分别装入前面培殖的虫卵，摇床l-100r/min，培养12_48h，生成含水蛭幼蛆的培养液；
(6)蛆虫培育配制蛆虫培育液，所述蛆虫培育液由500-3000g水蛭粉、IO-SOg酵母抽提粉、O. 01-0. lgNaCl、0-l. OgKCl、0-0· 8gMgCl2、0. 01-0. 08gCaCl2、0-0. 5gMgS04、20-100gNa2HP04、0-5. OgK2SO4,0-5. Og尿素混合均匀并加入10-15L纯净水而成，加入含幼蛆培养液进行培育，培育参数pH= 5. 5-8，搅拌速度l-30r/min，温度25-55°C，通气量5. 0-20L/min，时间72_168h，水蛭蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成；
(7)将培育液和培育出的水蛭蛆虫放入分离机中进行虫液分离，用纯净水洗涤水蛭蛆虫，并用热水喷淋灭活；
(8)灭活的水蛭蛆虫干燥，得成品；
(9)蛆虫包装。水蛭蛆虫为乳白色，干燥后含蛋白质59-61%、脂肪3. 5-3. 9%、灰分6_7%、碳水化合物11-12%。本发明培育的水蛭蛆虫成分明确并且一致性好，工艺过程简练，易于控制，节省能源，适应工业化规模生产。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步描述。实施例I :
(1)IOOOg水蛭用粉碎机以250-1250r/min粉碎至O. 5-0. 05mm，并用O. 2-0. 05mm孔径筛子筛选，收集粉末状物料；
(2)粉末状物料加入1-50L纯净水搅拌均匀成糊状物；
(3)糊状物在80至120°C杀菌10-30min，然后降温至30°C备用；
(4)取IOOg小米糠、O.2-0. 5g水蛭糊状物，加入中药10-20g木香粉和I. 0-5. Og草乌粉混合均匀，喷洒10-50ml纯净水，保持温度30至55°C、时间48_240h，生出虫卵；
(5)用孔径O.1-2. Omm筛子筛出虫卵备用；
(6)取10-200g蛋白胨、l-5g水蛭糊状物、5-10g酵母抽提粉、2-10g中药木香粉、2-10gNaCl，加O. 5-1. OL纯净水混合成为幼蛆培养液，分装于16-20个三角烧瓶中，80-120 °C灭菌10-30min,冷却到20-40 V，分别装入O. 2-1. Og前面培植的虫卵，摇床
l-100r/min，培养 12_48h，生成幼蛆；
(7)配制培育液，取500-3000g水蛭粉、10-80g酵母抽提粉、O.1-1. OgKCl,O. 01-0. lgNaCl、20-100gNa2HP04、0. 01-0. 05gCaCl2、0. lg-0. 5gMgS04,搅拌均匀并加入10-15L纯净水成为蛆虫培养液，加热80-100°C，时间10_60min，冷却至25_35°C，加入单独100-120°C灭菌10-20min的葡萄糖50_100g，加入含幼蛆培养液1500-2500ml进行培育；培育水蛭蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成；
培育参数PH=5. 5-7，搅拌速度l-20r/min，温度25-55°C，通气量7. 0-20L/min,时间72-168h ；
(8)将培育液及培育出的水蛭蛆虫一起放入分离机中以转速550-1250r/min虫液分离；
(9)用50-100L纯净水洗涤水蛭蛆虫2-3次，并用80-100°C热水喷淋灭活I-IOmin；
(10)灭活的水蛭蛆虫用真空冷冻干燥机在温度-30至30°C、真空度100-500kPa、时间5-24h干燥至含水分5-8%得到成品；
(11)包装。实施例2:
(1)IOOOg水蛭用粉碎机以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm并用O. 05-0. 2mm孔径筛子筛选，收集粉末状物料；
(2)粉末状物料加入10-50L纯净水搅拌均匀成糊状物；(3)糊状物在80-120°C杀菌10-30min然后降温至25_30°C备用；
(4)取IOOg麦麸、30-50g水蛭糊状物，加入中药藿香2-8g、苍术2_5g混合均匀、喷洒10-50ml纯净水，保持温度25-55°C，时间48_240h，生成虫卵；
(5)用孔径O.1-2. Omm筛子筛出虫卵备用；
(6)取50-100g水蛭糊状物、5-10g酵母抽提粉、2-10g中药藿香、2-5g中药苍术、2-10gKCl，加入O. 5-1. OL纯净水混合成为幼蛆培养液，分装于16-20个三角烧瓶中，80-120°C灭菌10-30min，冷却至20_40°C，每瓶分别装入O. 2-1. Og前面培植的虫卵，摇床10-100次/min，培育18_48h，生成幼蛆；
(7)10-15L去离子水中加入1500g-2000g水蛭粉，20g-80g酵母抽提粉、2.0-5. OgK2SO4,O. 01-0. 05gNaCl、20-100gNa2HP04、0. 01-0. 08gCaCl2、0. 1-0. 8gMgCl2,搅拌均匀成为蛆虫培育液，用10000-15000高斯磁感强度处理培养液3-5min，处理3_5次加入含幼蛆培养液1500-2500ml进行培育；
培育参数PH=5. 5-8，搅拌速度l_30r/min，温度25-35 °C，通气量5. 0_20L/min，时间72-168h ；
培育水蛭蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成；
(8)将培育液和培育出的水蛭蛆虫一起放入分离机中以转速550-1250r/min虫液分
离；
(9)用50-100L纯净水洗涤水蛭蛆虫2-3次，并用80-100°C热水喷淋灭活2.O-IOmin ；
(10)灭活的水蛭蛆虫用真空冷冻干燥机在温度-30-30°C、真空度100-500kPa、时间5-24h干燥至含水分5-8%得到成品；
(11)蛆虫包装。实施例3:
(1)IOOOg水蛭用粉碎机以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm并且用O. 05-0. 2mm孔径筛子筛选，收集粉末状物料；
(2)粉末状物料加入1-50L纯净水搅拌均匀成糊状物；
(3)糊状物在80-120°C杀菌10-30min，然后降温至25_30°C备用；
(4)取IOOg荞麦麸皮加入水蛭糊状物5-10g、中药丁香粉5-10g、苍术粉2-5g混合均匀，喷洒10-50ml纯净水，保持温度25-55°C，时间48_240h，生成虫卵；
(5)用孔径O.1-2. Omm筛子筛出虫卵备用；
(6)取50-100g大豆分离蛋白、5-10g酵母抽提粉、20-50g水蛭糊状物、15-20g中药丁香粉、20-30g苍术粉、2-10gNaCl，加入O. 5-1. OL纯净水混合成为幼蛆培养液，分装于16-20个三角烧瓶中，80-120°C灭菌10-30min，冷却至20_40°C，每瓶分别装入O. 2-1. Og前面培养的虫卵，摇床10-100次/min，培养12_48h，生成幼蛆；
(7)取1500-2000g 水蛭粉、10-80g 酵母抽提粉、2. 0-5. Og 尿素、O. 01-0. 05gNaCl、20-100gNaH2P04、0. 01-0. 08gCaCl2、0. 1-0. 8gMgCl2 搅拌均匀并加入 10-15L 纯净水成为蛆虫培育液，用超声波2450-5000kHZ、l-10kw、处理培养液10_30min，然后加入含幼蛆培养液1500-2500ml进行培育,培育水蛭蛆虫由乳白色变为乳黄色,培育过程完成；
培育参数PH=5. 5-8，搅拌速度l_30r/min，温度25-35°C，通气量5. 0_20L/min，时间72-168h ； (8)将培育液及培育出的水蛭蛆虫一起放入分离机中，以转速550-1250r/min虫液分
离；
(9)用50-100L纯净水洗涤水蛭蛆虫2-3次，并用80-100°C热水喷淋灭活2.O-IOmin ；
(10)灭活的水蛭蛆虫用真空冷冻干燥机在温度-30-30°C、真空度100-500kPa、时间5-24h干燥至含水分5-8%得到成品；
(11)蛆虫包装。实施例4:
(1)IOOOg水蛭用粉碎机以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm并用O. 05-0. 2mm孔径筛子筛选，收集粉末状物料；
(2)粉末状物料加入1-50L纯净水搅拌均匀成糊状物；
(3)糊状物在80-120°C杀菌10-30min，然后降温至25_30°C备用；
(4)取IOOg琼脂加入水蛭糊状物5-10g、中药藿香粉2-8g、木香粉2-6g混合均匀，喷洒10-50ml纯净水，保持温度25-55°C，时间48_240h，生成虫卵；
(5)用孔径O.1-2. Omm筛子筛出虫卵备用；
(6)取50-100g蛋白胨、5-10g酵母抽提粉、20-50g水蛭糊状物、2-10gNaCl，加O.5-1. OL纯净水混合成为幼蛆培养液，分装于16-20个三角烧瓶中，80-120°C灭菌10_30min，冷却到20-40°C，分别装入O. 2-1. Og前面培养的虫卵，摇床1-10次/min，培养12_48h，生成幼蛆；
(7)配制培育液，取500-3000g水蛭粉、10-80g酵母抽提粉、O.1-1. OgKCl,O. 01-0. lgNaCl、20-100gNaH2P04、0. 01-0. 05gCaCl2、0. 1-0. 5gMgS04 搅拌均匀并加入 10-15L纯净水成为蛆虫培育液，用微波频率2450-915MHZ、功率O. 5-2. 5kw处理培育液2_10min，加入含幼蛆培养液1500-2500ml进行培育，
培育参数PH=5. 5-8、搅拌速度l_30r/min、温度25-35 °C、通气量5_20L/min、时间72-168h ；
培育水蛭蛆虫由乳白色变为乳黄色培育过程完成；
(8)将培育液及培育出的水蛭蛆虫一起放入分离机中以转速550-1250r/min虫液分
离；
(9)用50-100L纯净水洗涤水蛭蛆虫2-3次，并用80-100°C热水喷淋灭活2.O-IOmin ；
(10)灭活的水蛭蛆虫用真空冷冻干燥机在温度-30-30°C、真空度100-500kpa、时间5-24h干燥至水蛭蛆虫含水分5-8%得成品；
(11)蛆虫包装。
权利要求
1.人工培育水蛭蛆虫的工艺，其特征在于所述工艺包括如下步骤 (1)水蛭粉碎至粉末状， (2)与水混合搅拌成水蛭糊状物； (3)水蛭糊状物高温杀菌； (4)谷物糠麸及水蛭糊状物用中药处理形成虫卵培养液，所述虫卵培养液由IOOg谷物糠麸、水蛭糊状物0. 2-50g、丁香粉0-10g、苍术粉0_5g、藿香0-8g、0-20g木香粉和0_5. Og草乌粉混合而成，保持温度30-55°C、时间48-240h，生成虫卵； (5)幼蛆培殖配制幼蛆培养液，所述幼蛆培养液由I-IOOg水蛭糊状物、0-200g蛋白腺、5-10g酵母抽提粉、O-IOg木香粉、O-IOg霍香、0_30g苍术粉、0_20g中药丁香粉、2-10gNaCl或KCl、0-100g大豆分离蛋白、0. 5_1. OL纯净水混合而成，分装于三角烧瓶中，灭菌后分别装入前面培殖的虫卵，摇床l-100r/min，培养12_48h，生成含水蛭幼蛆的培养液； (6)蛆虫培育配制蛆虫培育液，所述蛆虫培育液由500-3000g水蛭粉、IO-SOg酵母抽提粉、0. 01-0. lgNaCl、0-l. OgKCl、0-0. 8gMgCl2、0. 01-0. 08gCaCl2、0-0. 5gMgS04、20-100gNa2HP04、0-5. OgK2SO4,0-5. Og尿素混合均匀并加入10-15L纯净水而成，加入含幼蛆培养液进行培育，培育参数pH=5. 5-8，搅拌速度l_30r/min，温度25-55 °C，通气量5. 0-20L/min，时间72_168h，水蛭蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成； (7)将培育液和培育出的水蛭蛆虫放入分离机中进行虫液分离，用纯净水洗涤水蛭蛆虫，并用热水喷淋灭活； (8)灭活的水蛭蛆虫干燥，得成品。
2.根据权利要求I所述的人工培育水蛭蛆虫的工艺，其特征在于所述谷物糠麸为小米糠、麦麸或荞麦麸皮。
3.根据权利要求I所述的人工培育水蛭蛆虫的工艺，其特征在于所述虫卵培养液由琼脂100g、水蛭糊状物5-10g、藿香粉2-8g、木香粉2-6g混合而成。
4.根据权利要求I所述的人工培育水蛭蛆虫的工艺，其特征在于所述步骤(3)中，糊状物在80至120°C杀菌10-30min，然后降温至30°C备用。
5.根据权利要求I所述的人工培育水蛭蛆虫的工艺，其特征在于所述步骤(7)中，分离机转速为 550-1250r/min。
6.根据权利要求I所述的人工培育水蛭蛆虫的工艺，其特征在于所述步骤(7)中，用纯净水洗漆水蛭蛆虫2-3次,并用80-100°C热水喷淋灭活l-10min。
7.根据权利要求I所述的人工培育水蛭蛆虫的工艺，其特征在于所述步骤(8)中，灭活的水蛭蛆虫在温度-30-30°C、真空度100-500kKPa、时间5_24h干燥至含水分5_8%得到成品。
全文摘要
人工培育水蛭蛆虫的工艺，涉及人工培育昆虫的工艺。本发明的人工培育水蛭蛆虫的工艺是通过以下技术方案解决的(1)水蛭粉碎至粉末状；(2)与水混合搅拌成糊状；(3)糊状物高温杀菌；(4)谷物糠用中药处理并生成蛆卵；(5)幼蛆培殖；(6)蛆虫培育；(7)蛆虫分离、清洗、灭活；(8)蛆虫干燥；(9)蛆虫包装。本发明以吸食哺乳动物血液和不吸食哺乳动物血液的水蛭为原料，通过温和的生物处理方法，提高了水蛭应用效率和应用范围。本发明培育的水蛭蛆虫成分明确并且一致性好，工艺过程简练，易于控制，节省能源，适应工业化规模生产。
文档编号A01K67/033GK102792925SQ201210315709
公开日2012年11月28日 申请日期2012年8月31日 优先权日2012年8月31日
发明者徐华民, 赵荣华, 赵艳琨, 徐萌 申请人:哈尔滨工业大学