专利名称：一种蝴蝶兰品种的植株再生方法
技术领域：
本发明属于蝴蝶兰植株快速繁殖技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰品种的植株再生方法。
背景技术：
蝴蝶兰又称蝶兰，属蝶科兰属，是一种多年生单茎性附生兰，原产于亚洲，主要分布在菲律宾、马来半岛及我国台湾省。蝴蝶兰属是著名的切花种类，其株型美观茎短，叶大，花茎一至数枚，拱形，花大，花期持久其花形如彩蝶飞舞，色彩艳丽，因花形似蝶得名。其花姿优美，颜色华丽，为热带兰中的珍品，有“兰中皇后”之美誉，是兰科植物中栽培最广泛、最普及的种类之一.全世界原生种约有70多种，经杂交选育的品种有530多个，但原生种的观赏性较差。商业上用于大规模生产的品种多为杂交种，其品种多，花期长，深受人们的 喜爱。蝴蝶兰的学名按希腊文的原意为“好像蝴蝶般的兰花”。它固能吸收空气中的养分而生存，归入气生兰范畴，可说是热带兰花中的一个大族。它的植株非常奇特，既无匍匐茎，也无假球茎。每棵只长出数张活象汤匙般肥厚的阔叶，交互叠列在基部之上。白色粗大的气根则露在叶片周围，有的攀附在花盆的外壁，极富天然野趣。到了新春时节，一枝长达盈尺的花梗就从叶腋抽出，然后一朵接一朵地开放。每花均有5暮，中间嵌镶唇瓣。其生长习性喜高温、高湿、半阴环境，越冬温度不低于18度。由于蝴蝶兰原产于热带雨林地区，本性喜暖畏寒。生长适温为15 20°C，冬季IOC以下就会停止生长，低于5°C容易死亡。在岭南各地如要进行批量生产，必须要有防寒设施，实行保护性栽培。如果家庭小量种植，在遇冷时立即移入室内便可以安全过冬。对它的繁殖大多采用细胞组织培养，经试管育成幼苗移栽，大约经过两年左右便可开花。有些母株当花期结束后，有时花梗上的腋芽也会生长发育成为子株，当它长出根时可从花梗上切下进行分株繁殖。其盆栽的植料不宜用泥土，而要采用水苔、浮石、桫椤屑、木炭碎等，或者直接把幼苗固定在渺楞板(又称蛇木)上，让它自行附着生长。这种栽培方法乃系仿照它在原始时的生态环境。当它开花时把整块板子挂在墙上观赏，确实别有一番韵味。蝴蝶兰的气根颇多，其根尖翠绿，相当敏感，要细心加以保护，切不可触动损伤，否则，就好像打坏了人的嘴巴，要正常进食就困难了。蝴蝶兰喜欢潮湿和半阴的环境，要求空间经常保持湿度50% 70%，盆内不能淋水过多。如果种于家居阳台，在晴日最好每天洒湿地面三四次，让它的植株能吸收蒸发的水分。在夏秋季节不能让阳光直射。但早上的朝阳对它生长最好，应充分加以利用。如果春季阴雨天过多，晚上要用光管给它增加光照，以利日后开花。蝴蝶兰对病虫害的抵抗力较弱，经常会发生叶斑病和根腐病，可采用农药百菌清或达仙冲1000倍溶液喷射，每隔七八天喷I次，连喷3次。这些药液沾在叶上留有白色痕迹，可不必抹去，以利于继续发挥杀菌作用。蝴蝶兰的花色鲜艳夺目，既有纯白、鹅黄。绊红、也有淡紫、橙赤和蔚蓝。有不少品种兼备双色或三色，有的好像绣上图案的条纹，有的又有如喷了均匀的彩点，每枝开花七八朵，多的十二三朵，可连续观赏六七十天。当全部盛开时，仿佛一群列队而出的蝴蝶正在轻轻飞翔，它那种飘逸的闲情，真令人产生一种如诗如画，似梦似幻的感觉。其中以开黄花的较为名贵，有个称为“天皇”的黄花品种，堪称为“超级巨星”，讨价甚昂。至于蓝花品种亦较为珍稀，1952年与1953年的国际洋兰博览会上，台湾送展的蝴蝶兰连续两年获得金牌奖杯。1989年香港举办的第14次兰花展览，胡炳炽先生送展的一棵白瓣红唇的蝴蝶兰获得全场的总冠军奖。这些杰出的殊荣为蝴蝶兰的开拓奠定了坚实的基础。如今，欧美各国人士对蝴蝶兰的消费量不断增加，举凡高级宴会都少不了蝴蝶兰作摆设。各种花色的蝴蝶兰所代表的含义也不一样，白蝴蝶兰代表爱情纯洁、友谊珍贵，红心蝴蝶兰代表鸿运当头、永结同心，红色蝴蝶兰代表仕途顺畅、幸福美满，条点蝴蝶兰代表事事顺心、心想事成，黄蝴蝶兰代表事业发达、生意兴隆，迷你蝴蝶兰代表快乐天使、风华正茂。
兰花在我国古代便与梅、竹、菊并称为四大名花，喻为“四君子”。兰中皇后——蝴蝶兰更是以卓越的风姿，迷煞了无数骚客文雅之士。为家居增添无限色彩和生机，同时又改善了小环境空气质量，吸收有毒废气，释放怡人的清新空气，平添无限动感活力。通过兰展，又陶冶了不少人的心性，使人不觉间拒污恶秽、洁身自好，从其丰姿又体会出丛生固本，团结自强，从而达到无私奉献，播馨香于人间的良好氛围。固亦常成为文豪大师的钟爱，常见于文墨、流传百世。蝴蝶兰同时也是一种极具有商业价值的“三高产品”，其具有广泛的药用及食 用价值，但由于现在人们对其研究和栽培的认识，兰类植物的神秘和价值远远没有被人们认可，鉴于此，本发明通过对各种花色蝴蝶兰品种的植株再生及产业化关键技术开发的研究，为我国兰业发展提供技术支持。
发明内容
本发明的目的在于提供一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，解决现有技术中植株繁殖速度慢、种子发芽率低，病毒病严重，植株生长周期不一致，开花时间参差不齐，不能大批量控制花期，直接影响兰花品质和销售数量及价格，同时还影响储藏和运输。本发明所采取的措施是可以使优质蝴蝶兰品种在短时间内建立无菌株系进行大量产业化生产，并可以周年生产，繁殖速度快，为消费者提供各种颜色新、鲜、香、艳花朵造型一致的产品；为企业提供技术含量高的生产技术，使其植株大小一致，便于花期控制和产业化统一管理，为降低企业生产成本和提供品质优秀产品站稳市场销售量带来了巨大的经济效益。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案
一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，选取蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2飞厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料，经过茎尖2 3周的诱导培养，生长点开始呈绿色，茎叶先开始生长，然后生长点的基部开始肥大，25 30天逐渐形成原球茎，形成的原球茎通过不断分割，进行继代加速繁殖直到获得所需数量为止，将I厘米高的新形成的幼苗移入较大的培养容器壮苗培养基上培养3飞个月，20 25天诱导生根后长到8 10厘米高即可进行移栽。具体包括以下步骤
(1)取材方法选取从台湾引进的无病虫害的若干花色蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2飞厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料；
(2)培养基的配制
芽诱导培养基MS +1. Omg/L BA +1. Omg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5 g/L Ac +50 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值为 5. 6 ；
丛芽诱导培养基1/2MS +3. Omg/L BA +0. 5mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac +150 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值为 5. 6 ；
芽增殖培养基l/2MS+2. Omg/L BA +0. 3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5g/L Ac +100 g/L 香蓮汁 +1-3 g/L Hyponexl+1-3 g/L Peptone, pH 值为 5.6 ；
生根培养基1/2 MS + 0. 5mg/L IBA +0. 3mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac, pH 值为 5. 6 ；
(3)材料处理将带有侧芽的无病虫害的若干花色蝴蝶兰花梗剪成2 3cm的节段，用自来水冲洗，再在饱和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡时要不断搅动；浸泡后的花梗侧芽在自来水下滴冲I小时后浙干，在超净工作台内以质量浓度为75%的酒精消毒摇荡3飞秒钟后倒出酒精，加入质量分数为O. 1%的氯化汞溶液处理8 12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲3 4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分；
(4)诱导培养将经严格消毒后的花梗用手术刀切成I芽I段材料接种在芽诱导培养基中；
(5)培养条件培养室温度为25±2°C，光照时间12h/d，光照强度1500 20001x；
(6)丛芽诱导培养将上述诱导培养、生长健壮的诱导芽切成O.5cm的小块，分别接种在从芽诱导培养基中；13 15天后茎尖开始膨大，呈浅绿半球状，3个月后诱导原球茎体；
(7)增殖培养将上述诱导培养生长良好的原球茎体切割成小块，分别接种在芽增殖培养基中继代培养；5(Γ60天继代一次，增殖倍数为1(Γ13，将原球茎放在含低浓度细胞分裂素的培养基上继续培养60天后陆续长出小芽，成为完整的原球茎；95天后，大部分长成2 3片叶的小苗；一个花梗侧芽萌发形成小苗，再利用小苗的叶片诱导原球茎继代增殖，试管苗出瓶种植生长性状稳定，通过原球茎增殖的方法极大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰的产业化生产；
(8)诱导生根当丛生芽长至2cm高时，将芽分割成单株，转移到不同的生根培养基中；
(9)小苗移栽当试管苗长至3 4cm高，有3 5条根，5 7片叶片，长度2 3cm时，就可进行炼苗，将试管苗放在自然光下炼苗5 7天，打开瓶盖先进行炼苗2 3天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，用干净的水苔包裹根部种植于穴盘中，保持温度25 30°C，空气湿度为85%，25 30天，当新叶、新根长出时，喷施质量分数为O. 39ΓΟ. 5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率达95%。本发明的有益效果在于本发明可以使优质蝴蝶兰品种在短时间内建立无菌株系进行大量产业化生产，并可以周年生产，繁殖速度快，为消费者提供各种颜色新、鲜、香、艳花朵造型一致的产品；为企业提供技术含量高的生产技术，使其植株大小一致，便于花期控制和产业化统一管理，为降低企业生产成本和提供品质优秀产品站稳市场销售量带来了巨大的经济效益。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1 :
(1)取材方法选取从台湾引进的无病虫害的若干花色蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2飞厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料；
(2)培养基的配制芽诱导培养基MS +1. Omg/L BA +1. Omg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5 g/L Ac +50 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值为 5. 6 ；
丛芽诱导培养基1/2MS +3. Omg/L BA +0. 5mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac +150 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值为 5. 6 ；
芽增殖培养基l/2MS+2. Omg/L BA +0. 3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5g/L Ac +100 g/L 香蓮汁 +1-3 g/L Hyponexl+1-3 g/L Peptone, pH 值为 5.6 ；
生根培养基1/2 MS + 0. 5mg/L IBA +0. 3mg/L NM +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac, pH 值为 5. 6 ；
(3)材料处理将带有侧芽的无病虫害的若干花色蝴蝶兰花梗剪成2 3cm的节段，用自来水冲洗，再在饱和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡时要不断搅动；浸泡后的花梗侧芽在 自来水下滴冲I小时后浙干，在超净工作台内以质量浓度为75%的酒精消毒摇荡3飞秒钟后倒出酒精，加入质量分数为0. 1%的氯化汞溶液处理8 12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲3 4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分；
(4)诱导培养将经严格消毒后的花梗用手术刀切成I芽I段材料接种在芽诱导培养基中；
(5)培养条件培养室温度为25±2°C，光照时间12h/d，光照强度1500 20001x；
(6)丛芽诱导培养将上述诱导培养、生长健壮的诱导芽切成0.5cm的小块，分别接种在从芽诱导培养基中；13 15天后茎尖开始膨大，呈浅绿半球状，3个月后诱导原球茎体；
(7)增殖培养将上述诱导培养生长良好的原球茎体切割成小块，分别接种在芽增殖培养基中继代培养；5(Γ60天继代一次，增殖倍数为1(Γ13，将原球茎放在含低浓度细胞分裂素的培养基上继续培养60天后陆续长出小芽，成为完整的原球茎；95天后，大部分长成2 3片叶的小苗；一个花梗侧芽萌发形成小苗，再利用小苗的叶片诱导原球茎继代增殖，试管苗出瓶种植生长性状稳定，通过原球茎增殖的方法极大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰的产业化生产；
(8)诱导生根当丛生芽长至2cm高时，将芽分割成单株，转移到不同的生根培养基中；
(9)小苗移栽当试管苗长至3 4cm高，有3 5条根，5 7片叶片，长度2 3cm时，就可进行炼苗，将试管苗放在自然光下炼苗5 7天，打开瓶盖先进行炼苗2 3天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，用干净的水苔包裹根部种植于穴盘中，保持温度25 30°C，空气湿度为85%，25 30天，当新叶、新根长出时，喷施质量分数为0. 39ΓΟ. 5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率达95%。以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
权利要求
1.一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，其特征在于选取蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2飞厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料，经过茎尖2 3周的诱导培养，生长点开始呈绿色，茎叶先开始生长，然后生长点的基部开始肥大，25 30天逐渐形成原球茎，形成的原球茎通过不断分割，进行继代加速繁殖直到获得所需数量为止，将I厘米高的新形成的幼苗移入较大的培养容器壮苗培养基上培养3飞个月，20 25天诱导生根后长到8 10厘米高即可进行移栽。
2.根据权利要求1所述的蝴蝶兰品种的植株再生方法，其特征在于包括以下步骤 (1)取材方法选取从台湾引进的无病虫害的若干花色蝴蝶兰品种的植株，从健壮母株上切取长度为2飞厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料； (2)培养基的配制芽诱导培养基MS +1. Omg/L BA +1. Omg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5 g/L Ac +50 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值为 5. 6 ；丛芽诱导培养基1/2MS +3. Omg/L BA +0. 5mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac +150 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值为 5. 6 ； 芽增殖培养基l/2MS+2. Omg/L BA +0. 3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5g/L Ac +100 g/L 香蓮汁 +1-3 g/L Hyponexl+1-3 g/L Peptone, pH 值为 5.6 ；生根培养基1/2 MS + 0. 5mg/L IBA +0. 3mg/L NM +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac, pH 值为 5. 6 ； (3)材料处理将带有侧芽的无病虫害的若干花色蝴蝶兰花梗剪成2 3cm的节段，用自来水冲洗，再在饱和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡时要不断搅动；浸泡后的花梗侧芽在自来水下滴冲I小时后浙干，在超净工作台内以质量浓度为75%的酒精消毒摇荡3飞秒钟后倒出酒精，加入质量分数为0. 1%的氯化汞溶液处理8 12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲3 4遍后，用消毒滤纸吸干表面水分； (4)诱导培养将经严格消毒后的花梗用手术刀切成I芽I段材料接种在芽诱导培养基中； (5)培养条件培养室温度为25±2°C，光照时间12h/d，光照强度1500 20001x； (6)丛芽诱导培养将上述诱导培养、生长健壮的诱导芽切成0.5cm的小块，分别接种在从芽诱导培养基中；13 15天后茎尖开始膨大，呈浅绿半球状，3个月后诱导原球茎体； (7)增殖培养将上述诱导培养生长良好的原球茎体切割成小块，分别接种在芽增殖培养基中继代培养；50飞0天继代一次，增殖倍数为1(T13，将原球茎放在含低浓度细胞分裂素的培养基上继续培养60天后陆续长出小芽，成为完整的原球茎；95天后，大部分长成2 3片叶的小苗；一个花梗侧芽萌发形成小苗，再利用小苗的叶片诱导原球茎继代增殖，试管苗出瓶种植生长性状稳定，通过原球茎增殖的方法极大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰的产业化生产； (8)诱导生根当丛生芽长至2cm高时，将芽分割成单株，转移到不同的生根培养基中； (9)小苗移栽当试管苗长至3 4cm高，有3 5条根，5 7片叶片，长度2 3cm时，就可进行炼苗，将试管苗放在自然光下炼苗5 7天，打开瓶盖先进行炼苗2 3天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后从培养瓶中取出小苗，洗净根部培养基，用干净的水苔包裹根部种植于穴盘中，保持温度25 30°C，空气湿度为85%，25 30天，当新叶、新根长出时，喷施质量分数为0. 39TO. 5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率达95%。
全文摘要
本发明公开了一种蝴蝶兰品种的植株再生方法，属于蝴蝶兰栽培领域。选取蝴蝶兰品种植株上长度为2~5厘米的花梗腋芽茎段为外植体材料，经过茎尖2~3周的诱导培养，25~30天逐渐形成原球茎，不断分割进行继代加速繁殖，将1厘米高的幼苗移入壮苗培养基上培养3~6个月，20～25天诱导生根后长到8~10厘米高即可进行移栽，成活率高达95%以上；苗木成活后生长健壮，长势良好。本发明可以使优质蝴蝶兰品种在短时间内建立无菌株系进行大量产业化生产，并可以周年生产，繁殖速度快，为消费者提供各种颜色新、鲜、香、艳花朵造型一致的产品；为企业提供技术含量高的生产技术，使其植株大小一致，便于花期控制和产业化统一管理，降低企业生产成本，带来了巨大的经济效益。
文档编号A01H4/00GK103004603SQ201210577538
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月27日 优先权日2012年12月27日
发明者兰思仁, 吴少华, 何碧珠, 何官榕, 钟凤林, 林蔚 申请人:福建农林大学