一种楹树的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明公开了一种楹树的快速繁殖方法，包括无菌叶的获得，愈伤组织的诱导，愈伤组织的分化和四倍体的诱导，试管苗培育，野外炼苗移栽。本发明方法建立了楹树的快速微繁体系，可以在短期内培育大量的楹树新品种幼苗，并用于农业大规模种植。
【专利说明】一种楹树的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及楹树组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]植树，Albizia chinensis (Osbeck) Merr,又称南洋植,含羞豆科合欢属,产于福建、湖南、广东、广西、云南、西藏；南亚至东南亚亦有分布。是热带树种，喜高温多湿气侯，天然分部气温为25-27度，对土壤要求不严，在适湿而排水良好的红壤及砂质土壤上均能生长良好，在粘土、低洼积水或干旱瘠薄处PH 5-6适宜生长。本树种为强光树种，不耐阴，抗风力弱。多生于林中，仪见于旷野、谷地、河溪边等地。楹树生长迅速，枝叶茂盛，适为行道树及荫蔽树；木材褐色，色泽美，质柔软，可作家具，箱板等用；树皮含单宁。也是一种重要的中药材，具有固涩止泻、收敛生肌的效果，用于刀伤、止血、痢疾、肠炎腹泻、疮疡，溃烂不收口。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种楹树的快速繁殖方法，由该方法所制备得到的楹树分化成活率高，根叶粗大，可以为大田大规模种植提供种苗。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
将楹树叶片用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉浸泡三分钟，流水冲洗30min，超净工作台上次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去叶片表面的水分，楹树无菌叶片接入到MS+IAA 0.2mg/L+IBA 3mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，诱导出来的楹树愈伤组织接种在MS+2，4-D0.8mg/L+TDZ0.07mg/L+秋水仙素培养基中进行愈伤组织分化和四倍体诱导，楹树分化后的四倍体胚性细胞，放入培养基MS+GA33mg/L中生长，试管苗培育长度大约5cm的楹树试管苗进行炼苗培养，首先取出楹树试管苗洗去根部的培养基，放入灭菌后的营养土中，放置在光照培养箱里，光照lOOOOlx，光期14h，暗期10h，温度300C，PH5-6盖上封口膜保湿，定期浇水，培养两周后，移入温室培养，移栽苗床，红壤:沙质土 =6: 4，覆盖三层薄膜，培养20天左右，移栽入野外。
[0005]采用本发明制备的楹树幼苗成活率为93%，周期短，产量大，茎叶粗大，能耗少，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0007]实施例1
将楹树叶片用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉浸泡三分钟，流水冲洗30min，超净工作台上次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去叶片表面的水分，楹树无菌叶片接入到MS+IAA0.lmg/L+IBAlmg/L培养基中进行愈伤组织诱导，诱导出来的楹树愈伤组织接种在MS+2，4-D0.5mg/L+TDZ0.05mg/L+秋水仙素培养基中进行愈伤组织分化和四倍体诱导，楹树分化后的四倍体胚性细胞，放入培养基MS+GA33mg/L中生长，试管苗培育长度大约5cm的楹树试管苗进行炼苗培养，首先取出楹树试管苗洗去根部的培养基，放入灭菌后的营养土中，放置在光照培养箱里，光照lOOOOlx，光期14h，暗期10h，温度30°C, PH 5-6盖上封口膜保湿，定期浇水，培养两周后，移入温室培养，移栽苗床，红壤:沙质土 =6:4，覆盖三层薄膜，培养20天左右，移栽入野外，成活率为83%。
[0008]实施例2
将楹树叶片用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉浸泡三分钟，流水冲洗30min，超净工作台上次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去叶片表面的水分，楹树无菌叶片接入到MS+IAA 0.3mg/L+IBA 3mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，诱导出来的楹树愈伤组织接种在MS+2，4-Dl.0mg/L+TDZlmg/L+秋水仙素培养基中进行愈伤组织分化和四倍体诱导，楹树分化后的四倍体胚性细胞，放入培养基MS+GA33mg/L中生长，试管苗培育长度大约5cm的楹树试管苗进行炼苗培养，首先取出楹树试管苗洗去根部的培养基，放入灭菌后的营养土中，放置在光照培养箱里，光照lOOOOlx，光期14h，暗期10h，温度30°C, PH5-6盖上封口膜保湿，定期浇水，培养两周后，移入温室培养，移栽苗床，红壤:沙质土 =6:4，覆盖三层薄膜，培养20天左右，移栽入野外，成活率为90%。
[0009]实施例3
将楹树叶片用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉浸泡三分钟，流水冲洗30min，超净工作台上次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去叶片表面的水分，楹树无菌叶片接入到MS+IAA 0.2mg/L+IBA 3mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，诱导出来的楹树愈伤组织接种在MS+2，4-D0.8mg/L+TDZ0.05mg/L+秋水仙素培养基中进行愈伤组织分化和四倍体诱导，楹树分化后的四倍体胚性细胞，放入培养基MS+GA3中生长，试管苗培育长度大约5cm的楹树试管苗进行炼苗培养，首先取出楹树试管苗洗去根部的培养基，放入灭菌后的营养土中，放置在光照培养箱里，光照10000LX，光期14h，暗期10h，温度30°C，PH5-6盖上封口膜保湿，定期浇水，培养两周后，移入温室培养，移栽苗床，红壤:沙质土 =6:4，覆盖三层薄膜，培养20天左右`，移栽入野外，成活率为87%。
[0010]实施例4
将楹树叶片用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉浸泡三分钟，流水冲洗30min，超净工作台上次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去叶片表面的水分，楹树无菌叶片接入到MS+IAA 0.3mg/L+IBA 2mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，诱导出来的楹树愈伤组织接种在MS+2，4-D0.5mg/L+TDZlmg/L+秋水仙素培养基中进行愈伤组织分化和四倍体诱导，楹树分化后的四倍体胚性细胞，放入培养基MS+GA3中生长，试管苗培育长度大约5cm的楹树试管苗进行炼苗培养，首先取出楹树试管苗洗去根部的培养基，放入灭菌后的营养土中，放置在光照培养箱里，光照10000LX，光期14h，暗期10h，温度30°C，PH5-6盖上封口膜保湿，定期浇水，培养两周后，移入温室培养，移栽苗床，红壤:沙质土 =6:4，覆盖三层薄膜，培养20天左右，移栽入野外，成活率为89%。
【权利要求】
1.一种楹树的快速繁殖方法，包括无菌叶的获得，愈伤组织的诱导，愈伤组织的分化和四倍体的诱导，试管苗培育，野外炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取楹树幼嫩的叶片，按照常规组培消毒方法获得楹树无菌叶片； (2)将步骤(I)所培养获得的楹树无菌叶片接入到MS+IAA0.1-0.3mg/L+IBA l_3mg/L培养基中进行愈伤组织诱导； (3)将步骤(2)所得的楹树愈伤组织接种在MS+2，4-D0.5-1.0mg/L+TDZ0.05-0.lmg/L+秋水仙素培养基中进行愈伤组织分化和四倍体诱导； (4)将步骤(3)所得的楹树分化后的四倍体胚性细胞，放入培养基MS+GA33mg/L中生长; (5)将步骤(4)试管苗培育长度大约5cm的楹树试管苗进行炼苗培养，进而进行大田种植。
2.按照权利要求1所述的一种楹树的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述无菌的楹树叶片按下列消毒方法得到:将楹树叶片用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉浸泡三分钟，流水冲洗30min，超净工作台上次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗4_5次，然后用无菌的滤纸吸去叶片表面的水分。
3.按照权利要求1所述的一种楹树的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(2)中愈伤组织诱导采用暗室培养，温度28°C，湿度60%-80%。`
4.按照权利要求1所述的一种楹树的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)中加入适量的秋水仙素对其进行四倍体的诱导。
5.按照权利要求1所述的一种楹树的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)对楹树进行炼苗培养，首先取出楹树试管苗洗去根部的培养基，放入灭菌后的营养土中，放置在光照培养箱里，光照10000LX，光期14h，暗期10h，温度30°C，PH5-6盖上封口膜保湿，定期浇水，培养两周后，移入温室培养，移栽苗床，红壤:沙质土 =6:4，覆盖三层薄膜，培养20天左右，移栽入野外。
【文档编号】A01H4/00GK103444549SQ201310423849
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2013年9月17日 优先权日:2013年9月17日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司