一种美国红枫的组织培养方法
【专利摘要】本发明涉及植物的组织培养方法，具体说是一种美国红枫的组织培养方法，其包括选用美国红枫带腋芽的有效茎段作为外植体，先对有效茎段进行消毒预处理；然后在超净工作台上把外植体接种到腋芽发育启动培养基中进行培养，获得无菌苗；将上述无菌苗接种到芽增殖和伸长培养基中进行培养；选择增殖芽的生长点按照培育进度依次转移到愈伤组织诱导培养基、愈伤组织增殖培养基、根诱导培养基中进行培养，获得无毒植株；将无毒植株移栽种植。本发明采用独特的外植体和培养基配方，大幅度提高了美国红枫组织培养的成功率和植株质量，为美国红枫的产业化发展提供有力保证，且培养快速、经济。
【专利说明】一种美国红枫的组织培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物的组织培养方法，尤其涉及观赏林木的组织培养方法，具体地说是一种美国红枫的组织培养方法。
【背景技术】
[0002]美国红枫(Acerrubrum)又名红花槭、北美红枫，槭树科槭树属。树高12 —18米，其树姿优美，枝叶繁茂，叶型纤秀，叶色秀丽，秋天变色最早，主色鲜红，副色橘黄，色艳如花，主要用于林园观赏和庭院绿化，也是珍贵的家庭盆栽树种。目前，美国红枫一般采用种子繁殖、嫁接繁殖和扦插繁殖三种繁殖方式，但是这三种方式繁殖速度较慢，组织培养快繁是一种有效的繁殖方式，它不仅提高了红枫的繁殖速率，同时对苗木的质量也提供了有力保证，为园林绿化提供充足的种苗。
[0003]White早在1943年就发现植物生长点附近的病毒浓度很低，有的甚至无病毒，如果利用组织培养方法，取一定大小的茎尖生长点进行培养，再生的植株有可能不携带任何病毒，从而可以获得脱病毒苗，再用脱毒苗进行繁殖，则种植的作物就不会或极少发生病毒感染，可以大幅度提高作物的观赏价值和使用价值。
【发明内容】
[0004]针对上述技术问题，本发明提供一种美国红枫的组织培养方法，实现美国红枫的人工快速经济繁育，提高美国红枫的观赏价值，推进美国红枫的进一步产业化。
[0005]本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种美国红枫的组织培养方法，包括以下步骤:
[0006]a:选用美国红枫带腋芽的有效茎段作为外植体，先对有效茎段进行消毒预处理；
[0007]b:然后在超净工作台上把外植体接种到腋芽发育启动培养基中进行培养，获得无菌苗；
[0008]c:将上述无菌苗接种到芽增殖和伸长培养基中进行培养；
[0009]d:选择增殖芽的生长点按照培育进度依次转移到愈伤组织诱导培养基、愈伤组织增殖培养基、根诱导培养基中进行培养，获得无毒植株；
[0010]e:将无毒植株移栽种植。
[0011]作为优选，在移栽种植前，将无毒植株进行炼苗锻炼。
[0012]作为优选，外植体接种到腋芽发育启动培养基中进行暗处理2d，然后转入1600-2000Lux光强下培养，光照12_14h/d，温度22_26°C，培养20天，获得无菌苗。
[0013]作为优选，步骤(C)中培养条件为:温度24_26°C，湿度60%_70%，光照为12_14h/d，光强为1600-2000Lux的荧光灯下培养。
[0014]作为优选，所述炼苗锻炼采用闭瓶炼苗6d后进行开瓶炼苗3d的方式进行。
[0015]作为优选，所述美国红枫腋芽发育启动培养基组合为MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)。[0016]作为优选，所述芽增殖及伸长培养基组合为l/2MS+6-BA(l.0mg/L)+IAA(0.2mg/L) +GA3(1.0mg/L)
[0017]作为优选，所述愈伤组织诱导培养基组合为WAP、6-BA (0.6mg/L)、IAA (0.3mg/L)，愈伤组织增殖培养基组合为WAP、6-BA(0.6mg/L)、IAA(1.0mg/L)，根诱导培养基配方为1/2MS.6-BA (0.5mg/L)、NAA (2.0mg/L)、活性炭(1.0mg/L)。
[0018]从以上技术方案可知，本发明采用独特的外植体和培养基配方，大幅度提高了美国红枫组织培养的成功率和植株质量，为美国红枫的产业化发展提供有力保证，且培养快速、经济。
【具体实施方式】
[0019]下面详细介绍本发明的培养方法，首先选用美国红枫带腋芽的有效茎段作为外植体进行培养，先对有效茎段进行消毒预处理在超净工作台上把外植体接种到最佳的腋芽发育启动培养基中，暗处理2d，然后转入1600-2000LUX光强下培养，光照12_14h/d，温度22-26°C，培养20天，获得无菌苗，然后把无菌苗接种到芽增殖和伸长培养基中，条件:温度24-26°C，湿度60%-70%，光照为12_14h/d，光强为1600_2000Lux的荧光灯下培养，最后选择增殖芽的生长点按照培育进度依次转移到愈伤组织诱导培养基、愈伤组织增殖培养基、根诱导培养基中进行培养，培养完成后获得无毒植株，然后再将无毒苗移栽种植，为了提高移栽成活率，采用闭瓶炼苗6d后开瓶炼苗3d的方式进行移栽前炼苗锻炼。
[0020]在实施过程中，美国红枫腋芽发育启动培养最佳培养基组合为MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)，芽增殖及伸长培养基组合为 1/2MS+6-BA (1.0mg/L)+IAA (0.2mg/L) +GA3 (1.0mg/L)，所述愈伤组织诱导最佳培养基组合为WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (0.3mg/L)，愈伤组织增殖培养最佳培养基组合为WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (1.0mg/L)，根诱导最佳培养基配方为 l/2MS+6-BA(0.5mg/L) +NAA (2.0mg/L) + 活性炭(1.0mg/L)。
`[0021]实施例
[0022]取美国红枫带腋芽的有效茎尖1.0-1.5cm作为组织培养外植体，在超净工作台上将外植体放入到70%酒精中消毒20-30S ;然后转入2%的次氯酸钠溶液中消毒5-10min，再用无菌水冲洗5次左右，处理完后把外植体接种到MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)培养基中培养15d左右，获得无菌苗，再将无菌苗接种到l/2MS+6-BA(l.0mg/L)+IAA(0.2mg/L)+GA3(1.0mg/L)培养基中20天后，获得大量增殖的芽，最后在超净工作台上挑取这些芽的生长点依次接种到WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (0.3mg/L)培养基培养10天左右、WAP+6-BA(0.6mg/L)+IAA(l.0mg/L)培养基培养 30 天左右和 1/2MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(2.0mg/L) +活性炭(1.0mg/L)培养基中培养四周左右中培养，从而获得组织培养无毒植株；组培苗如果直接移栽，成活率不高，为了提高成活率，先要对组培苗进行移栽前炼苗锻炼，一般采用闭瓶炼苗6d+开瓶炼苗3d后，再移栽到大棚中去。
[0023]上述实施方式仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关【技术领域】的普通技术人员，在不脱离本发明精神和范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴。
【权利要求】
1.一种美国红枫的组织培养方法，包括以下步骤: a:选用美国红枫带腋芽的有效茎段作为外植体，先对有效茎段进行消毒预处理； b:然后在超净工作台上把外植体接种到腋芽发育启动培养基中进行培养，获得无菌苗； c:将上述无菌苗接种到芽增殖和伸长培养基中进行培养； d:选择增殖芽的生长点按照培育进度依次转移到愈伤组织诱导培养基、愈伤组织增殖培养基、根诱导培养基中进行培养，获得无毒植株；e:将无毒植株移栽种植。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:在移栽种植前，将无毒植株进行炼苗锻炼。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:外植体接种到腋芽发育启动培养基中进行暗处理2d，然后转入1600-2000Lux光强下培养，光照12_14h/d，温度22-26 °C，培养20天，获得无菌苗。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:步骤(c)中培养条件为:温度24-26°C，湿度60%-70%，光照为12-14h/d，光强为1600-2000Lux的荧光灯下培养。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:所述炼苗锻炼采用闭瓶炼苗6d后进行开瓶炼苗3d的方式进行。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述美国红枫腋芽发育启动培养基组合为 MS+6 — BA(0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述芽增殖及伸长培养基组合为1/2MS+6-BA(1.0mg/L)+IAA(0.2mg/L)+GA3(1.0mg/L)。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述愈伤组织诱导培养基组合为WAP、6-BA(0.6mg/L)、IAA (0.3mg/L)，愈伤组织增殖培养基组合为 WAP、6_BA(0.6mg/L)、IAA (1.0mg/L)，根诱导培养基配方为 1/2MS、6_BA (0.5mg/L)、NAA (2.0mg/L)、活性炭(1.0mg/L)。
【文档编号】A01H4/00GK103828719SQ201410090748
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年3月13日 优先权日:2014年3月13日
【发明者】李在根 申请人:湖南天福林业科技有限公司