一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、植株再生等步骤，本发明方法所制备的扁担杆再生率高，生长周期短，可以获得大量的良种扁担杆植株。
【专利说明】一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及扁担杆植株再生的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 扁担杆，锻树科，fowia心7〇知又名：娃娃拳、麻糖果、月亮皮、葛荆麻，生 长于丘陵、低山路边草地、灌丛或疏林；落叶灌木或小乔木，商达3米左右；小枝有星状毛。 叶狭菱状卵形或狭菱形，长3-9厘米，宽1-4厘米，边缘密生小牙齿，表面几无毛，背面疏生 星状毛或几无毛，基出脉3条，叶柄长2-6毫米。聚伞花序与叶对生，花淡黄绿色，直径不到 1厘米，萼片5,狭披针形，长约5毫米，外面密生灰色短毛，内面无毛，花瓣5,长约1. 2毫米； 雄蕊多数，花药白色，花柱长，子房有毛。核果橙红色，直径7-12毫米，无毛，2裂，每裂有2 核，内有种子2-4粒。花期6-7月，果期8-9月。性强健，耐寒，耐干旱，耐瘠薄。喜光，也略 耐阴。对土壤要求不严，在富有腐殖质的土壤中生长旺盛。广东、广西、湖南、江西、福建、台 湾、浙江、安徽等省区都有分布。以根或全株入药。夏秋采挖，洗净切片晒干。用于小儿疳 积，脾虚久泻，遗精，红崩，白带，子宫脱垂，脱肛，风湿关节痛。用播种或分株繁殖。目前主 要采用常规栽植，组培方法可以快速获得大量的扁担杆幼苗，保持遗传性状的稳定性，克服 地域的局限性。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法，由该方 法所制备得到的扁担杆成活率高，生长周期短，遗传稳定性好，可以在短期内获得大量的扁 担杆幼苗。
[0004] 本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的： 取扁担杆叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗25min，超净 工作台上1%碘化钾处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过 的扁担杆叶片接入培养基配方为N 6+2, 4-D0. 5-2. Omg/L+KIU 2-0. 5mg/L+15(^g/mL硫 酸链霉素诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加焦糖30g/L，琼脂6. 5g/L，pH5. 85， 光照800-10001x，温度23°C，诱导出来的愈伤组织放入增殖培养基凡+6-BAO. 9-1. lmg/ L+IBAO. 4-0. 6mg/L+750mg/L 核苷酸，附加焦糖 30g/L，琼脂 6. 5g/L，PH5. 85,光照 20001x，增 殖培养出来的愈伤组织放入分化培养基l/4N6+6-BA2. Omg/L+NAAO. lmg/L，获得再生植株， 分化条件为焦糖40g/L，琼脂6. 5g/L，pH5. 85,光照4000-100001X，温度25°C。
[0005] 采用本发明制备的扁担杆再生植株成活率高，周期短，产量大，可以避免在栽培过 程中的疾病和病害，利于大规模种植。
[0006] 下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007] 实施例1 取扁担杆叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗25min，超净工 作台上1%碘化钾处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过的扁担 杆叶片接入培养基配方为N6+2, 4-DO. 5mg/L+KT0. 2mg/L+15(^g/mL硫酸链霉素诱导培养基 中进行愈伤组织诱导培养，附加焦糖30g/L，琼脂6. 5g/L，pH5. 85,光照800-10001X，温度 23°C，诱导出来的愈伤组织放入增殖培养基Ν6+6-ΒΑ(λ 9mg/L+IBA0· 4mg/L+750mg/L核苷酸， 附加焦糖30g/L，琼脂6. 5g/L，PH5. 85,光照20001x，增殖培养出来的愈伤组织放入分化培 养基l/4N6+6-BA2. Omg/L+NAAO. lmg/L，获得再生植株，分化条件为焦糖40g/L，琼脂6. 5g/L， pH5. 85,光照4000-100001x，温度25°C，扁担杆再生植株成活率为90%。
[0008] 实施例2 取扁担杆叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗25min，超净工 作台上1%碘化钾处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过的扁担 杆叶片接入培养基配方为N6+2, 4-D2. Omg/L+KTO. 5mg/L+15(^g/mL硫酸链霉素诱导培养基 中进行愈伤组织诱导培养，附加焦糖30g/L，琼脂6. 5g/L，pH5. 85,光照800-10001X，温度 23°C，诱导出来的愈伤组织放入增殖培养基Ν6+6-ΒΑ1· lmg/L+IBAO. 6mg/L+750mg/L核苷酸， 附加焦糖30g/L，琼脂6. 5g/L，PH5. 85,光照20001x，增殖培养出来的愈伤组织放入分化培 养基l/4N6+6-BA2. Omg/L+NAAO. lmg/L，获得再生植株，分化条件为焦糖40g/L，琼脂6. 5g/L， pH5. 85,光照4000-100001x，温度25°C，扁担杆再生植株成活率为91%。
[0009] 实施例3 取扁担杆叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗25min，超净工 作台上1%碘化钾处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，吸水纸吸去表面水分，灭菌处理过的扁担 杆叶片接入培养基配方为N6+2, 4-DO. 5mg/L+KT0. 3mg/L+15(^g/mL硫酸链霉素诱导培养基 中进行愈伤组织诱导培养，附加焦糖30g/L，琼脂6. 5g/L，pH5. 85,光照800-10001X，温度 23°C，诱导出来的愈伤组织放入增殖培养基Ν6+6-ΒΑ1· lmg/L+IBAO. 6mg/L+750mg/L核苷酸， 附加焦糖30g/L，琼脂6. 5g/L，PH5. 85,光照20001x，增殖培养出来的愈伤组织放入分化培 养基l/4N6+6-BA2. Omg/L+NAAO. lmg/L，获得再生植株，分化条件为焦糖40g/L，琼脂6. 5g/L， pH5. 85,光照4000-100001x，温度25°C，扁担杆再生植株成活率为92%。
【权利要求】
1. 一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤 组织的增殖、植株再生，其主要步骤如下： (1) 取扁担杆幼嫩的叶片，在超净工作台上对其消毒处理； (2) 取步骤（1)灭菌处理过的扁担杆叶片接入培养基配方为N6+2, 4-D0. 5-2. Omg/ L+KTO. 2-0. 5mg/L+15(^g/mL硫酸链霉素诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加焦糖 30g/L，琼脂 6. 5g/L，ρΗ5· 85,光照 800-10001x，温度 23°C ; (3) 取步骤（2)诱导出来的愈伤组织放入增殖培养基N6+6-BA0. 9-1. lmg/ L+IBAO. 4-0. 6mg/L+750mg/L 核苷酸，附加焦糖 30g/L，琼脂 6. 5g/L，ρΗ5· 85,光照 20001x ; (4 )取步骤（3 )增殖培养出来的愈伤组织放入分化培养基1/4Ν6+6-ΒΑ2. Omg/ L+NAAO. lmg/L，获得再生植株； 按照权利要求1所述的一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1) 中所述扁担杆无菌叶片的获得为，取扁担杆叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污 渍，流水冲洗25min，超净工作台上1%碘化钾处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，吸水纸吸去表 面水分。
2. 按照权利要求1所述的一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2) 诱导培养基中附加了硫酸链霉素，能防止扁担杆内生菌的污染。
3. 按照权利要求1所述的一种扁担杆植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4) 中再生植株的分化条件为焦糖40g/L，琼脂6. 5g/L，pH5. 85,光照4000-100001X，温度25°C。
【文档编号】A01H4/00GK104186335SQ201410463078
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司