一种利用叠氮化钠诱变花生的育种方法与流程

本发明涉及一种利用叠氮化钠诱变花生的育种方法，属于植物育种
技术领域：
。
背景技术：
：花生又名落花生，属一年生草本植物，是我国重要的油料和经济作物。我国的花生种植面积和生产总量均居世界前列在国际上具有很强的竞争力。但是，我国目前花生的种质资源相对有限，传统花生育种时间过长，效率较低且形状不稳定等局限性，仅凭经验进行种植已是比较盲目的做法，容易导致低水平重复，同质化严重，需要通过新的技术手段在花生育种方面进行改进。我国一半以上的花生都用来榨油，根据统计资料，花生油脂含量每增加1％，企业经济效益提高6％左右。一些学者在化学诱变剂EMS处理花生进行探索，而鲜有用叠氮化钠来处理花生的报道。技术实现要素：为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种利用叠氮化钠诱变花生的育种方法，该育种方法能够提高大大提高花生种子的粗脂肪含量、蛋白总量、油酸含量和亚油酸含量，且得到的花生性状稳定，能够成为品种。实现本发明的目的可以通过采取如下技术方案达到：一种利用叠氮化钠诱变花生的育种方法，包括：对花生种子进行处理的步骤；和，将经处理的花生种子进行播种育苗，得到M1代种子的步骤；和，将M1代种子进行检测并筛选后进行播种育苗，得到M2代种子的步骤。作为优选，所述花生种子的品种为粤油18或粤油13。作为优选，具体的步骤为：1)对花生种子进行处理：将花生种子用纯水清洗并浸泡至充分吸涨，然后以叠氮化钠溶液再浸泡并真空处理10～15min，真空处理结束后继续以叠氮化钠溶液浸泡，得到M0代种子；花生吸涨后其细胞比较活跃，容易吸收物质，再通过浸泡叠氮化钠溶液达到诱变目的，其中真空处理能够增加叠氮化钠在种子中的渗透性；2)得到M1代种子：将M0代种子晾干，然后播种育苗，自交并单株收获，得到M1代种子；3)筛选M1代种子：利用近红外检测仪进行非损伤性的粗脂肪含量、蛋白总量和油酸含量的检测分析，根据检测分析的结果筛选出目标M1代种子；4)得到M2代种子：将目标M1代种子播种育苗，自交并单株收获，得到M2代种子。M2代种子得到的植株性状已经稳定，目标性状也稳定，对于M3代种子，无需再进行筛选。再优选地，步骤1)中，所述叠氮化钠溶液的浓度为1～3mol/L。再优选地，步骤1)中，所述以叠氮化钠溶液浸泡的时间为4～13h。再优选地，所述的育种方法还包括步骤5)筛选M2代种子：利用近红外检测仪进行非损伤性的粗脂肪含量、蛋白总量和油酸含量的检测分析，根据检测分析的结果筛选出目标M2代种子。再优选地，经检测分析得到的粗脂肪的体积百分比≥52％、蛋白的体积百分比≥20％、油酸的体积百分比≥30％即为目标种子。用近红外检测仪进行的非损伤性检测分析是指不经过磨样提取物质，种子直接在仪器里进行检测，现有技术是切取一点子叶磨样提取物质进行上样检测，这样对种子的损伤是比较大，不利于后代的生长。相比现有技术，本发明的有益效果在于：1、本发明育种方法通过叠氮化钠对花生种子进行处理，短期育种能够获得高粗脂肪含量、蛋白总量、油酸含量和亚油酸含量的花生，且花生性状稳定，能够成为品种；2、传统的育种方法与本发明的育种方法进行比较，其流程如表1所示：表1传统的育种方法与本发明的育种方法的流程比较本发明大大缩短了育种的年限，传统的育种技术需要经过5～7代才能获得性状稳定的品种，但本发明只需经过2～3代育种即可获得稳定形状的品种。附图说明图1为实施例1M1代种子粗脂肪含量正态图；图2为实施例1M2代种子粗脂肪含量正态图；图3为实施例1M1代种子蛋白含量正态图；图4为实施例1M2代种子蛋白含量正态图；图5为实施例2M1代种子粗脂肪含量正态图；图6为实施例2M2代种子粗脂肪含量正态图；图7为实施例2M1代种子蛋白含量正态图；图8为实施例2M2代种子蛋白含量正态图。具体实施方式下面，结合附图以及具体实施方式，对本发明做进一步描述：实施例1一种利用叠氮化钠诱变花生的育种方法，包括以下步骤：1)对花生种子进行处理：选用广东省农业科学院作物研究所育成的品种粤油18的花生种子200粒，用纯水清洗并浸泡4h至充分吸涨，然后以等量分成4组，每一组分别用浓度为0、1、2、3mol/L的叠氮化钠溶液再浸泡并真空处理10min，真空处理结束后继续以叠氮化钠溶液浸泡，叠氮化钠溶液浸泡的时间为4h，得到M0代种子；2)得到M1代种子：将M0代种子晾干，然后播种育苗，其出苗率如表2所示，自交并单株收获，得到M1代种子；表2不同浓度叠氮化钠处理的花生种子出苗率3)筛选M1代种子：利用波通公司DA7200型号的近红外检测仪进行非损伤性的粗脂肪含量、蛋白总量和油酸含量的体积百分比检测分析，粗脂肪的体积百分比≥52％、蛋白的体积百分比≥20％、油酸的体积百分比≥30％即为目标M1代种子，实施例1得到目标M1代种子12种,编号中的第一个为ck表示水对照组，第一个数字为1表示经1mol/L叠氮化钠处理，第一个数字为2表示经2mol/L叠氮化钠处理，第一个数字为3表示经3mol/L叠氮化钠处理；其检测结果如表3所示：表3经筛选的M1代种子的检测数据编号粗脂肪(％)蛋白质(％)油酸(％)亚油酸(％)油亚比2-1155.3320.3339.1842.570.9203662-753.6721.3644.8638.731.1582752-1253.5820.2944.4740.251.1048452-953.4322.0838.9242.910.907015ck-552.9220.6237.7943.440.8699363-252.8320.9444.9338.91.1550132-352.7524.239.6743.110.9202042-852.7223.0845.2140.271.1226723-352.3625.8839.6945.280.876546ck-252.2823.5137.0844.520.8328842-152.2424.0439.8343.920.906876ck-452.123.7535.0145.580.76814)得到M2代种子：将12种目标M1代种子播种育苗，自交并单株收获，得到M2代种子；5)筛选M2代种子：利用近红外检测仪进行非损伤性的粗脂肪含量、蛋白总量和油酸含量的检测分析，粗脂肪的体积百分比≥52％、蛋白的体积百分比≥20％、油酸的体积百分比≥30％即为目标M2代种子，得到目标M2种子13种，编号中第2-3的数字为对应的M1代的编号，其检测结果如表4所示：表4经筛选的M2代种子的检测数据编号粗脂肪(％)蛋白质(％)油酸(％)亚油酸(％)油亚比M2-2-8-654.0623.3833.1441.430.799903M2-3-2-1654.0421.6634.1542.650.800703M2-3-2-153.8522.7136.1940.390.896014M2-3-2-953.822.5844.3736.11.229086M2-3-3-553.7324.1626.5147.890.55356M2-3-2-3553.6420.741.1636.421.130148M2-3-2-1953.5321.3334.940.860.854136M2-3-2-1553.4921.0440.8837.381.093633M2-3-2-853.3720.6340.6438.521.055036M2-3-2-353.3322.238.6839.970.967726M2-3-2-2953.1223.1333.7543.380.778008M2-3-2-1853.0320.4138.2939.420.971334M2-3-2-2053.0220.5938.3740.450.948578M1种子和M2种子的性状稳定，绘制M1代种子粗脂肪含量正态图和M2代粗脂肪含量正态图，分别如图1和图2所示，从图上可得，其峰值有逐渐增大的趋势，则在育种的过程中，其得到的种子中的粗脂肪含量有上升的趋势；绘制M1代种子蛋白含量正态图和M2代蛋白含量正态图，分别如图3和图4所示，从图上可得，其峰值有逐渐增大的趋势，则在育种的过程中，其得到的种子中的蛋白含量有上升的趋势。从实施例1中的M1代种子3-2得到的M2代种子中，有31.4％的M2代种子其检测数据均优于M1代。实施例2一种利用叠氮化钠诱变花生的育种方法，包括以下步骤：1)对花生种子进行处理：选用广东省农业科学院作物研究所育成的品种粤油13的花生种子200粒，用纯水清洗并浸泡4h至充分吸涨，然后以等量分成4组，每一组分别用浓度为0、1、2、3mol/L的叠氮化钠溶液再浸泡并真空处理15min，真空处理结束后继续以叠氮化钠溶液浸泡，叠氮化钠溶液浸泡的时间为4h，得到M0代种子；2)得到M1代种子：将M0代种子晾干，然后播种育苗，其出苗率如表5所示，自交并单株收获，得到M1代种子；表5不同浓度叠氮化钠处理的花生种子出苗率3)筛选M1代种子：利用波通公司DA7200型号的近红外检测仪进行非损伤性的粗脂肪含量、蛋白总量和油酸含量的体积百分比检测分析，粗脂肪的体积百分比≥52％、蛋白的体积百分比≥20％、油酸的体积百分比≥30％即为目标M1代种子，实施例2得到目标M1代种子6种，编号中规则与实施例1相同；其检测结果如表6所示：表6经筛选的M1代种子的检测数据4)得到M2代种子：将6种目标M1代种子播种育苗，自交并单株收获，得到M2代种子；5)筛选M2代种子：利用近红外检测仪进行非损伤性的粗脂肪含量、蛋白总量和油酸含量的检测分析，粗脂肪的体积百分比≥52％、蛋白的体积百分比≥20％、油酸的体积百分比≥30％即为目标M2代种子，得到目标M2种子13种，编号规则与实施例1相同，其检测结果如表7所示：表7经筛选的M2代种子的检测数据编号粗脂肪(％)蛋白质(％)油酸(％)亚油酸(％)油亚比M2-1-119-155.221.6342.9235.681.202915M2-1-32-754.5724.4137.9441.870.906138M2-1-119-554.3420.4235.7540.880.874511M2-1-32-3454.222.132.744.440.735824M2-1-32-3254.1321.3233.7942.80.789486M2-1-119-354.124.0737.341.40.900966M2-2-55-654.0623.3833.1441.430.799903M2-3-13-1654.0421.6634.1542.650.800703M2-3-13-153.8522.7136.1940.390.896014M2-1-32-2853.8422.1535.4642.290.838496M2-1-119-1753.8222.1526.4848.520.545754M2-3-13-953.822.5844.3736.11.229086M2-3-13-553.7324.1626.5147.890.55356M1种子和M2种子的性状稳定，绘制M1代种子粗脂肪含量正态图和M2代粗脂肪含量正态图，分别如图5和图6所示，从图上可得，其峰值有逐渐增大的趋势，则在育种的过程中，其得到的种子中的粗脂肪含量有上升的趋势；绘制M1代种子蛋白含量正态图和M2代蛋白含量正态图，分别如图7和图8所示，从图上可得，其峰值有逐渐增大的趋势，则在育种的过程中，其得到的种子中的蛋白含量有上升的趋势。对于本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及变形都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。当前第1页1 2 3