鳗鲡目鱼类的养殖水和鳗鲡目鱼类的培育方法与流程

本发明涉及一种含有与变态相关联的激素类物质的鳗鲡目鱼类的养殖水、和使用该养殖水养殖鳗鱼的方法。

背景技术：

鳗鲡目鱼类的仔鱼虽被称为柳叶鳗幼苗，但由于呈现出如叶子的形状作为其特征，因此也被称为叶形仔鱼(参照非专利文献1)。对于日本鳗鲡(anguillajaponica)而言，以往，使用以鲨鱼卵为基础的饲料，而成功培育出柳叶鳗幼苗。(参照专利文献1)。因此，开发出一种以鲨鱼卵为基础，添加低分子化的大豆肽、磷虾提取物、维生素类物质等的营养强化饲料。而且，还能够利用鸡蛋来代替鲨鱼卵(参照专利文献2)。不过，在目前，以鲨鱼卵为基础的饲料在成长方面仍最优异。

以白斑角鲨(squalusacanthias)等的鲨鱼卵为基础的糊剂饲料是结合日本鳗鲡柳叶鳗幼苗的习性、消化吸收功能而开发出的饲料(参照非专利文献2)，通过使用本饲料能够人工生产鳗鲡鱼仔。在自然界中，从孵化开始直至成长为鳗鲡鱼仔为止所需要的天数被认为要160～180天左右(参照非专利文献3)，天然捕获的鳗鲡鱼仔的全长为60mm左右(参照非专利文献4)，达到最大伸长期的、即可变态的体长认为是全长60mm以上。另一方面，对于人工生产的柳叶鳗幼苗而言，可变态的尺寸为全长50～60mm，为了使其成长至这一体长，需要使用鲨鱼卵饲料，长期饲养通常200天以上，也有需要400天以上的个体(参照非专利文献5)。担忧这样的种苗生产期的长期化会关系到存活率的降低、生产成本的上升。而且，即使达到可变态的体长为止，开始变态的时机也会因个体不同而存在较大偏差(参照非专利文献6)。种苗生产必须集中生产相同尺寸、相同成长阶段的个体，若各种苗的个体差异大，则会增大入池后的成长差异、同类相残的担忧。因此，在现有方法中将鳗鲡鱼仔作为种苗来生产非常困难。由此，为了实现人工种苗生产，需要一种能缩短鳗鲡鱼仔的生产期，并且生产相同尺寸且一定数量的鳗鲡鱼仔的方法。

这样，目前的饲养法难以稳定且集中生产鳗鲡鱼仔，因此希望开发一种能够缩短鳗鲡鱼仔的生产期，而且能够控制变态的技术。

【现有技术文献】

【专利文献】

专利文献1：日本发明专利公开公报特开平11-253111号

专利文献2：日本发明专利公开公报特开2005-13116号

【非专利文献】

非专利文献1：副井笃、渡边哲理、鱼谷逸朗，2005.在骏河湾采集的星康吉鳗叶形仔鱼伴随变态的活动的变化.nipponsuisangakkaishi71(3),378-380.

非专利文献2：增田贤嗣、今泉均、桥本博、小田宪太朗、古板博文、松成宏之、照屋和久、薄浩则,2011.黑边鳍真鲨卵和黑缘刺鲨卵为主体的饲料初期饲养鳗鲡的可能性.journaloffisheriestechnology4(1),7-13.

非专利文献3：yutakakawakami,noritakamochioka,ryokimura,akinobunakazono,1999.在日本北九州收集的日本玻璃鳗(anguillajaponica)的rna/dna比例，大小和脂质含量以及迁移适应性的季节性变化(seasonalchangesoftherna/dnaratio,sizeandlipidcontentsandimmigrationadaptabilityofjapaneseglass-eels,anguillajaponica,collectedinnorthernkyushu,japan).journalofexperimentalmarinebiologyandecology238,1-19.

非专利文献4：yutakakawakami,noritakamochioka,akinobunakazono,1999.进入北九州河流的玻璃鳗(anguillajaponica)的迁移模式(immigrationpatternsofglass-eelsanguillajaponicaenteringriverinnorthernkyushu).bulletinofmarinescience64(2),315-327.

非专利文献5：田中秀树、野村和晴、山本刚史、奥宏海,2006.鳗鲡仔鱼用饲料/饲养系统的开发-世界上首次成功人工生产鳗鲡鱼仔-水产综合研究中心研究报告63-69.

非专利文献6：yoshiakiyamada,akihirookamura,naomimikawa,tomokoutoh,noriyaukihorie,satorutanaka,micheaelj.miller,katsumitsukamoto,2009.人工饲养的日本鳗(anguillajaponica)的变态过程中趋光行为的个体发育变化(ontogeneticchangesinphototacticbehaviorduringmetamorpohosisofartificiallyrearedjapaneseeelanguillajaponicalarvae).marineecologyprogressseries379,241-251.

技术实现要素：

【发明所要解决的技术问题】

本发明是鉴于上述的现有技术的问题点，为了满足本领域行业的需求而做出的，其目的在于，通过对柳叶鳗幼苗适当地使用参与变态的激素，来人为地控制例如向鳗鲡鱼仔的变态，其结果，缩短生产期并且集中生产相同尺寸、形态的鳗鲡鱼仔等。

【用于解决技术问题的技术方案】

本发明的鳗鲡目鱼类的养殖水含有甲状腺激素。甲状腺激素例如为甲状腺素。即，本发明的养殖水优选含有甲状腺素。本发明的养殖水还可以含有维生素类物质。本发明的鳗鲡目鱼类的养殖水能够用作鳗鲡目鱼类仔鱼的养殖水。可以优选使用添加了甲状腺激素的饲料。

本发明的鳗鲡目鱼类的培育方法(例如，鳗鲡或鳗鲡鱼仔的制造方法)包括对鳗鲡目鱼类仔鱼施用甲状腺激素的工序。鳗鲡目鱼类的培育方法尤其在培育鳗鲡目鱼类仔鱼时有效。该方法优选变态鼎盛期(阶段2)的甲状腺激素的施用量比变态启动期(阶段1)的甲状腺激素的施用量少。

另外，该方法优选变态后期(阶段3)的甲状腺激素的施用量比变态鼎盛期(阶段2)的甲状腺激素的施用量少。

对于具体的施用量而言，在将变态启动期(阶段1)的甲状腺激素的施用量设为1的情况下，变态鼎盛期(阶段2)的甲状腺激素的施用量为0.05～0.5，变态后期(阶段3)的甲状腺激素的施用量为0.001～0.05。

施用甲状腺激素的工序例如为以下工序中的一种或两种以上，即：在饵料中混合甲状腺激素，来对鳗鲡目鱼类仔鱼施用甲状腺激素的工序；在养殖水中混合甲状腺激素，来对鳗鲡目鱼类仔鱼施用甲状腺激素的工序；和直接对鳗鲡目鱼类仔鱼施用甲状腺激素的工序。

【发明效果】

如上所述，本发明所开发的饲养法通过控制目标鱼，尤其是日本鳗鲡仔鱼的成长，能够缩短饲养期，并且稳定地生产作为种苗的鳗鲡鱼仔。

附图说明

图1是表示实施例的鳗鲡目鱼类仔鱼的培育情况的代替附图的照片。

具体实施方式

以下，使用附图来说明用于实施本发明的方式。本发明并不限定于以下所说明的方式，也包含本领域技术人员根据以下的方式在显而易见的范围内适当修改而得到的方式。

本发明的饲养法的特征在于，通过向养殖水添加变态控制激素、即例如甲状腺激素，使变态启动，而且在变态过程中，在合适的发育阶段使施用浓度呈多级变化，由此能够人为控制鳗鲡鱼仔等鳗鲡目鱼类的生产。养殖水是指培育鳗鲡目鱼类(尤其是鳗鲡目鱼类的仔鱼)的水的意思，鳗鲡目鱼类被饲养在养殖水内。

甲状腺激素例如为甲状腺素(t4)、三碘甲状腺原氨酸(t3)、反三碘甲状腺原氨酸(rt3)和二碘甲状腺原氨酸(t2)。而且，既可以使用左甲状腺素钠水合物之类的水合化合物，又可以单独或者多个使用这些激素。这些激素可以单独使用或者可以使用多个。在这些之中，优选使用t4。理想的是，在养殖水中使用100μm至1pm的范围的甲状腺激素。可以在养殖水中使用10nm至100pm的范围的这些激素。在上述的浓度范围中，理想的是根据从诱导变态起直至变态为例如鳗鲡鱼仔为止的期间的形态变化，一边实施使浓度逐渐变低这样的浓度梯度一边控制变态。只要目标鱼种为能够向体内吸收激素的状态，本发明的养殖水就能够通过作为饵料的一部分添加、利用注射施用这样的方法被施用给目标。

本发明的养殖水可以与甲状腺激素结合而同时添加维生素类物质及其衍生物。维生素类物质例如为维生素a、视黄酸和维生素c。尤其是视黄酸由于与甲状腺激素形成杂二聚体而有效。

本发明的方法能够在静水状态、流水下环境中进行。水温理想的是使用20℃至28℃的范围内水温。进一步理想的是使用22℃至26℃的范围内的水温。在诱导中，理想的是一边实施通氧等一边进行饲养。

本发明的方法所使用的养殖水中含有的水并未特别限定。既可以使用自来水、地下水、温泉水、天然海水、蒸馏水、去离子水等，又可以使用以上述水为基础的市售的人工海水。而且对盐分浓度也并未限定，但理想的是0-40‰。进一步理想的是20-35‰的范围。

在本发明的方法中，收装目标鱼的水槽并未特别限定。例如，本发明的方法能够使用从100ml容积的小型水槽直至几百吨级的大型化水槽。

使用本发明的方法的目标鱼种并未特别限定，但优选为鳗鲡目鱼类的柳叶鳗幼苗。进一步优选为日本鳗鲡(anguillajaponica)等鳗鲡属柳叶鳗幼苗。鳗鲡目鱼类例如为鳗鲡、星鳗、海鳗和蠕纹裸胸鳝。在这些之中优选鳗鲡。此外，鳗鲡目鱼类经过柳叶鳗幼苗而成长，因此，以下虽然以鳗鲡为中心进行说明，但也能够同样地培育其他鳗鲡目鱼类。

作为使用本发明的方法的目标尺寸，柳叶鳗幼苗的体长并未特别限定，而在日本鳗鲡柳叶鳗幼苗的情况下，理想的是全长为36mm以上。进一步理想的是全长40mm以上。

以下，说明变态期阶段。

阶段1：变态启动期。吻端圆形，肠道开始退化。

阶段2：变态鼎盛期。肠道显著退化。在后半期肛门到达最终垂直血管(vbvlast)附近。

阶段3：变态后期。前肛门长度(pal)与最终垂直血管长度(vbvlastlength)相同或者更短(pal≦vbvlastlength)。体高明显低。

阶段4：前鳗鲡鱼仔期。大致呈鳗鲡的形态，但仍留有体高。体表、内在性的黑色素细胞仍未发现。

黑子期：幼鱼期。能够确认到摄食。

(使用了甲状腺激素的变态诱导养殖水的制备)

将甲状腺激素(例如，甲状腺素(t4))在1-2ml容量的容量瓶中调整为50-100mm。能够使用公知的溶剂(水、酒精)作为溶剂。溶剂优选使用乙醇。

例如针对调整为50mm的t4，以乙醇为溶剂分别稀释500倍、5000倍、50000倍，调整为10μm、1μm、100nm。这样能够调整饲料。

在饲养容器中添加人工海水，并添加千分之一量的10μm的t4，调整10nm-t4养殖水。

养殖水以两天一次的频率，将一半的量更换为相同浓度的养殖水。在改变浓度的情况下，例如在从10nm改变为2nm的情况下，去除80％的养殖水，并添加新的未调整人工海水，调整为1l。

(柳叶鳗幼苗的准备和饲养方法)

挑选通过目测认为达到全长40mm(或者既可以为30mm～50mm，又可以为35mm～45mm，还可以为35mm以上或40mm以上或45mm以上)的柳叶鳗幼苗。用2-苯氧基乙醇实施麻醉之后，拍摄照片，使用图像分析装置测定各个幼苗的全长。

在收装于10nm-t4养殖水中之后，收装于设定在23℃的培养箱中开始饲养。最初的一周每隔两天进行一次经过观察，每次更换一半的量的10nm-t4养殖水。阶段1的养殖水中的甲状腺激素的平均量例如为1nm～100nm，且既可以为3nm～30nm，又可以为5nm～20nm。

对于通过目测判断为到达了阶段2的后半期的幼苗而言，改变养殖水的浓度。将养殖水稀释5倍或10倍，调整为2nm或1nm-t4，继续进行饲养。阶段2的养殖水中的甲状腺激素的平均量与阶段1相比，既可以稀释2倍～20倍，又可以稀释3～15倍，还可以如上述那样稀释5～10倍。阶段2的养殖水中的甲状腺激素的平均量例如为0.1nm～20nm，且既可以为0.5nm～10nm，又可以为1nm～5nm，还可以为1nm～2nm。

对于通过目测到达了阶段3的幼苗而言，迅速地改变为将1nm-t4养殖水稀释5倍而得到的0.2nm-t4养殖水，第二天进一步改变为0.1nm-t4养殖水。也可以直接下降至0.1nm-t4浓度。即使对于肛门位置未到达最终垂直血管棘的幼苗而言，若判定为即将到达阶段3之前的话，则也改变为上述浓度。阶段3的养殖水中的甲状腺激素的平均量与阶段2相比，既可以稀释2倍～50倍，又可以稀释3～15倍或稀释4～6倍，还可以如上述那样稀释5倍。阶段3的养殖水中的甲状腺激素的平均量例如为0.01nm～2nm，且既可以为0.05nm～1nm，又可以为0.1nm～0.5nm，还可以为0.1nm～0.2nm。如上所述，在幼苗到达阶段3的情况下，可以逐渐降低养殖水中的甲状腺激素的浓度。即，在阶段3的中途，可以使养殖水中的甲状腺激素的浓度为无法检测出的程度。

阶段3的阶段继续利用0.1nm-t4养殖水进行饲养。对于体高逐渐降低，而判定为成阶段4的、大致到达鳗鲡鱼仔的体型的幼苗而言，从t4养殖水中取出之后，在淡水或海水中进行饲养。在阶段4以后，可以不进行激素处理。

在淡水或海水中继续进行饲养。饲养方法可以为流水、静水等任何方式。若逐渐在体表、脊椎上部发现黑色素细胞的沉淀，则适当地给与冷冻红虫或活颤蚓，观察能否摄食。若能观察到摄食，则判断为内部形态完全转换为鳗鲡型，即到达了黑子(幼鱼)，设定种苗生产完成。由于天然种苗一般将变态中途的鳗鲡鱼仔、阶段4以后作为种苗，因此，为了方便，可以设定在到达阶段4的时间点上种苗生产完成。

在小型容器中利用甲状腺激素进行处理的情况下，由于担心因水温变动而使变态进行变动得大，因此优选使用能够控温之类的培养箱、水浴等进行管理。即使在大型容器中，也优选安装控温装置等进行使水温恒定的操作。

为了避免治疗中的激素分解，优选在暗室中进行处理。

变态阶段的评价可以利用目测进行判断，但为了得到稳定的结果，优选在收装于能够收装鱼体的、例如内容量：横10cm×纵5cm×宽1cm的透明压克力容器之后，进行体侧的照片拍摄，使用图像分析软件例如imagej(nih)等，判定前肛门长度的位置。

甲状腺激素处置所使用的养殖水优选在处理中使用相同的养殖水。不过，在变态为鳗鲡鱼仔之后，在此之前例如在使用人工海水的情况下，改变为淡水等低盐分浓度或者无养殖水，由此能够促进在此之后向幼鱼的发育。

为了确认鳗鲡鱼仔以后的摄食，给与适合初期饲料的、例如活颤蚓、冷冻红虫等。对于尺寸小的个体可以给与制成碎末状等匹配口径的饵料。

以下，列举使用了日本鳗鲡柳叶鳗幼苗的本发明的实施例。本发明并不受这些实施例的任何限定。

实施例1

(柳叶鳗幼苗的准备1)

使用了从通过人为催熟而得到的受精卵开始进行孵化，用现有技术的以白斑角鲨卵为基础的饲料(参照非专利文献1)而生长成的日本鳗鲡柳叶鳗幼苗。准备了10l圆形压克力水槽。在水槽内注水海水，设定容积为5升。设定在水槽内收装的鳗鲡柳叶鳗幼苗为200尾左右。在使日本鳗鲡柳叶鳗幼苗适应水槽之后，用移液管对水槽底面施用相当于3ml的饲料而开始投饵。在投饵期间，静水15分钟而投饵。经过15分钟之后，以每分钟0.5至0.6l的流量冲洗残留于底面的饵料。每隔两小时重复上述操作，共计五次。设定投饵时间为9点、11点、13点、15点、17点。投饵五次之后，将日本鳗鲡柳叶鳗幼苗转移至同型的水槽中。在投饵以外的时间段以每分钟0.5至0.6l的流量继续注水。在投饵期间，均施加流通25℃的过滤海水。

(柳叶鳗幼苗的准备2)

从达到175日龄的柳叶鳗幼苗中挑选全长38.5mm至43.5mm的幼苗，实施了本发明操作。而且使用了174日龄的全长36.1mm和34.5mm的幼苗。

(种苗评价)

进一步在淡水下继续进行饲养到达阶段4的幼苗，判断为能将发现的摄食的个体作为幼鱼而利用为种苗个体。

2.实施例结果：

将实施例的结果示于表1中。成功生产了源自全长36.1mm以上的柳叶鳗幼苗的幼鱼。不过，全长34.5mm的柳叶鳗幼苗虽然到达了阶段4，但并未达到获得摄食能力。当使用本发明时，可知能够同时诱导变态，其结果，能够缩短种苗生产期。

表1表示23℃养殖水下由t4处理实现的日本鳗鲡变态诱导。

【表1-1】

表1.23℃养殖水下由t4处理实现的日本鳗鲡变态诱导

【表1-2】

l：生存中，未发现变态的特征.y：变态完成(种苗生产完成).nd：死亡.变态阶段

实施例2

(柳叶鳗幼苗的准备)

从达到129日龄的柳叶鳗幼苗中选择全长29.8mm至40.6mm的幼苗，实施了本发明。

实施例结果：

将实施例的结果示于表2和图1中。成功由全长36.6mm以上的柳叶鳗幼苗生产为幼鱼。不过，也有全长36.4mm以下的柳叶鳗幼苗到达了阶段4的例子，但并未顺利地进行变态，在诱导中途死亡或者并未达到获得摄食能力。根据以上内容，认为能够生产种苗的柳叶鳗幼苗的阈值为全长36mm前后，准备到达全长37mm以上的柳叶鳗幼苗，实施本发明时，可知能够生产日本鳗鲡种苗。另外，可知使用本发明能否生产种苗是依赖于体长而不是依赖于柳叶鳗幼苗的日龄。

【表2-1】

表2.23℃养殖水下由t4处理实现的日本鳗鲡变态诱导

【表2-2】

【表2-3】

【表2-4】

l：生存中，未发现变态的特征.d：死亡.y：变态完成(种苗生产完成).nd：死亡.nf：未确认摄食.ng：未变态至鳗鲡鱼仔.

图1是表示实施例的鳗鲡目鱼类仔鱼的培育情况的代替附图的照片。

a表示t4处理开始时，(e×p6-2,全长38.1mm)、a-2表示处理开始10天后、a-3表示27天后、a-4表示46天后。b表示t4处理开始时(e×p6-4,全长36.6mm)、b2表示处理开始10天后、b-3表示37天后、b-4表示63天后。比例尺为10mm。

【工业上可利用性】

本发明能利用于水产行业。