一种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂及应用的制作方法

文档序号:14808980发布日期:2018-06-30 04:31阅读:347来源:国知局

本发明涉及的是农作物病害防治的生物菌剂,具体涉及一种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂及应用。

二、

背景技术:

目前在农业生产上,防治农作物病虫害主要依赖化学防治措施,在控制病虫危害损失的同时,也带来了病虫抗药性上升和病虫暴发几率增加等问题。通过推广应用生物防治、物理防治、科学用药等绿色防控技术,不仅有助于保护生物多样性,降低病虫害暴发几率,实现病虫害的可持续控制,而且还有利于减轻病虫危害损失,保障粮食丰收和主要农产品质量安全的有效供给。

棘孢木霉属于半知菌门,丝孢目,木霉属。是一类分布广、繁殖快、具有较高生防价值且对一些广谱性杀菌剂不敏感的生防有益真菌,具有适应性强、抗菌谱广的特点,还能促进植物生长,具有重寄生作用、竞争作用、产生裂解酶、产生拮抗化合物,抑制或杀死病原菌、诱导寄主植物对病菌的防卫反应等作用方式,具有重要的经济意义。

三、

技术实现要素:

本发明的一个目的是提供了一种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂,这种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂解决了目前使用的化学农药在防治防治农作物病虫害时产生的对人畜有毒,污染环境,有残留的问题,本发明的另一个目的是提供这种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂的应用。

为了实现上述目的,本发明采用的具体技术方案如下:这种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂通过以下方法制备而成:

步骤一:将棘孢木霉HN菌株接种于PDA斜面培养基,28℃培养72-96 h,用灭菌蒸馏水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子数为106个/mL, 然后将其按PD培养液的体积的1%接入灭菌的PD培养液中,放入28℃,120rpm培养36-48h,得到一级种子培养液;

步骤二:将麸皮、硅藻土、稻壳、水按质量比2:1:1:4的比例混合,搅拌均匀后,装入200mL塑料瓶,装入量为塑料瓶高的1/2,然后再121℃高压湿热灭菌20 min,冷却后按1%接种量将一级种子培养液接入塑料瓶中,上下摇均匀,放在温度28℃,湿度80%培养5-7 d;将塑料瓶的发酵菌种按质量比:1:500-1:1000加入无菌水中,搅拌均匀成制作孢子悬浮液,该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液;

步骤三: 固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素、无菌水按质量比50:25:1:50搅拌均匀后,分装于塑料袋中,于121℃下灭菌20~30 min后待用;育秧盘设置于固体发酵车间中,对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾混合液密闭熏蒸灭菌24 h,然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按质量比10:1的比例混合,均匀铺展育秧盘里,铺至厚度1 -2cm,在恒温28℃,保湿RH≥80%的条件下,培养7d,再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物,风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后,过200目筛,收集得到棘孢木霉HN孢子粉;

步骤四:将步骤三制备的棘孢木霉HN孢子粉、生化黄腐酸、木质素、苏云金杆菌按质量比55-70:10:3:20-27的比例混合,混匀后得到配制成棘孢木霉HN组合物。

步骤五:将上述棘孢木霉HN组合物、ProDisMC9、WgwinDKF、LT-8601、白炭黑、无明粉按质量比50:6:1:16:6:9混合,配制成棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂。

上述棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂的应用:将所述的棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂喷施或者灌根于农作物,用于防治农作物土传病害、根腐病、茎腐、灰霉病、杀死农作物鳞翅目害虫中任意一种。

有益效果:

1、本发明可以促进农作物肥料的吸收和作物生长,提高作物产品品质,改良土壤,诱导植物产生抗性,抑制病菌的生长繁殖,对人畜无毒,不污染环境。

2、本发明可以有效发挥生物农药的药效,可以防治农作物土传病害,根腐病、茎腐,灰霉病、白粉病、霜霉病和作物的菜青虫、小菜蛾、甜蛾、斜纹夜蛾、甘蓝夜蛾、烟青虫、玉米螟、稻纵卷叶螟、二化螟。

四、具体实施方式

下面对本发明做进一步的说明:

实施例1:

这种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂通过以下制备方法制备而成:

步骤一:将棘孢木霉HN菌株接种于PDA斜面培养基,28℃培养72h,用灭菌蒸馏水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子数为106个/mL, 然后按1%(体积比)接入灭菌的PD培养液中,放入28℃,120rpm培养36h,得到一级种子培养液。

步骤二:将麸皮、硅藻土、稻壳、水按2:1:1:4(质量比)的比例混合,搅拌均匀后,装入200mL塑料瓶,装入量为塑料瓶高的1/2,然后再121℃高压湿热灭菌20 min,冷却后按1%接种量将一级种子培养液接入塑料瓶中,上下摇均匀,放在温度28℃,湿度80%培养6d;将塑料瓶的发酵菌种按质量比:1:500加入无菌水中,搅拌均匀成制作孢子悬浮液,该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液;本发明中麸皮、硅藻土、稻壳、水混匀后称为物料,1%接种量是指接入的一级种子培养液的体积与塑料瓶中物料的质量之比。

步骤三: 固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素和无菌水(50:25:1:50)(质量比)搅拌均匀后,分装于塑料袋中,于121℃下灭菌20 min后待用;育秧盘设置于固体发酵车间中,对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾(2:1)(质量比)混合液密闭熏蒸灭菌24h,然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按10:1(质量比)的比例混合,均匀铺展育秧盘里,铺至厚度1cm,在恒温28℃,保湿RH≥80%的条件下,培养7d,再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物,风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后,过200目筛,收集得到棘孢木霉HN孢子粉。

步骤四:上述棘孢木霉HN孢子粉、生化黄腐酸、木质素、苏云金杆菌按(55:10:3:20)质量比混合,配制成棘孢木霉HN组合物。

步骤五:将上述棘孢木霉HN组合物、ProDisMC9、WgwinDKF、LT-8601、白炭黑、无明粉按50:6:1:16:6:9质量比混合,配制成棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂。

将本实施例棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂直接用于农作物叶面喷施防治番茄白粉病、霜霉病、灰霉病、白菜菜青虫、小菜蛾、甜蛾、斜纹夜蛾。

实施例2:

这种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂通过以下制备方法制备而成:

步骤一:将棘孢木霉HN菌株接种于PDA斜面培养基,28℃培养72h,用灭菌蒸馏水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子数为106个/mL, 然后按1%(体积比)接入灭菌的PD培养液中,放入28℃,120rpm培养36h。

步骤二:将麸皮、硅藻土、稻壳、水按2:1:1:4(质量比)的比例混合,搅拌均匀后,装入200mL塑料瓶,装入量为塑料瓶高的1/2,然后再121℃高压湿热灭菌20 min,冷却后按1%接种量接入塑料瓶中,上下摇均匀,放在温度28℃,湿度80%培养6d;将塑料瓶的发酵菌种按质量比:1:500加入无菌水中,搅拌均匀成制作孢子悬浮液,该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液。

步骤三: 固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素和无菌水(50:25:1:50)(质量比)搅拌均匀后,分装于塑料袋中,于121℃下灭菌20 min后待用;育秧盘设置于固体发酵车间中,对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾(2:1)(质量比)混合液密闭熏蒸灭菌24h,然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按10:1(质量比)的比例混合,均匀铺展育秧盘里,铺至厚度1cm,在恒温28℃,保湿RH≥80%的条件下,培养7d,再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物,风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后,过200目筛,收集得到棘孢木霉HN孢子粉。

步骤四:上述棘孢木霉HN孢子粉、生化黄腐酸、木质素、苏云金杆菌按(70:10:3:27)质量比混合,配制成棘孢木霉HN组合物。

步骤五:将上述棘孢木霉HN组合物、ProDisMC9、WgwinDKF、LT-8601、白炭黑、无明粉按50:6:1:16:6:9质量比混合,配制成棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂。

将本实施例棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂直接用于农作物淋灌可以防治番茄白粉病、霜霉病、灰霉病、白菜菜青虫、小菜蛾、甜蛾、斜纹夜蛾。

实施例3:

这种棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂通过以下制备方法制备而成:

步骤一:将棘孢木霉HN菌株接种于PDA斜面培养基,28℃培养72h,用灭菌蒸馏水洗下分生孢子,制成孢子液,孢子液中孢子数为106个/mL, 然后按1%(体积比)接入灭菌的PD培养液中,放入28℃,120rpm培养36h。

步骤二:将麸皮、硅藻土、稻壳、水按2:1:1:4(质量比)的比例混合,搅拌均匀后,装入200mL塑料瓶,装入量为塑料瓶高的1/2,然后再121℃高压湿热灭菌20 min,冷却后按1%接种量接入塑料瓶中,上下摇均匀,放在温度28℃,湿度80%培养6d;将塑料瓶的发酵菌种按质量比:1:500加入无菌水中,搅拌均匀成制作孢子悬浮液,该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液。

步骤三: 固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素和无菌水(50:25:1:50)(质量比)搅拌均匀后,分装于塑料袋中,于121℃下灭菌20 min后待用;育秧盘设置于固体发酵车间中,对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾(2:1)(质量比)混合液密闭熏蒸灭菌24h,然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按10:1(质量比)的比例混合,均匀铺展育秧盘里,铺至厚度2cm,在恒温28℃,保湿RH≥80%的条件下,培养7d,再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物,风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后,过200目筛,收集得到棘孢木霉HN孢子粉。

步骤四:上述棘孢木霉HN孢子粉、生化黄腐酸、木质素、苏云金杆菌按(60:10:3:27)质量比混合,配制成棘孢木霉HN组合物。

步骤五:将上述棘孢木霉HN组合物、ProDisMC9、WgwinDKF、LT-8601、白炭黑、无明粉按50:6:1:16:6:9质量比混合,配制成棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂。

将本实施例棘孢木霉HN组合物的可湿性粉剂直接用于灌根可以防治大豆根腐病。

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