一种长枝木霉T6菌株可湿性粉剂及其应用的制作方法

本发明属于生物农药技术领域，具体涉及一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂及其应用。

背景技术：

近年来，苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病严重影响我国苹果的生产，其主要危害苹果叶片，发生后可导致果树叶片大量脱落，严重影响苹果树的正常生长、花芽形成、果实增大和来年苹果的产量与品质。发生严重时，可造成树体提前落叶、落果，果实不能成熟，严重造成减产和经济损失。目前，国内外对于苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病的防治仍以化学杀菌剂作为主要的防治措施，但是化学杀菌剂的使用带来了果实质量下降和有害物质超标，以及生态破坏和环境污染等问题，严重影响了食物安全和人类健康。因此，生物防治可作为一种环境友好型的病害防治技术，是目前替代化学农药的一种有效措施，已成为国内外研究的热点。木霉(trichodermaspp.)是一类分布广泛的土壤习居菌。据报道，木霉菌对一些土传植物病害具有较好防治作用，尤其国内外有关哈茨木霉(t.hatzianum)和绿色木霉(t.viride)应用于蔬菜病害防治方面已有较多的研究和报道，但关于长枝木霉t6菌株可湿性粉剂的研制和防治苹果斑点落叶病及苹果炭疽叶枯病等方面尚未报道。同时，在木霉菌应用过程中如何保持其生防活性、提高生防活力、延长货架期和保持田间生防效果稳定性等是目前急需解决的问题和研究的主要方向。因此，开发长枝木霉t6菌株可湿性粉剂是提高微生物菌体生防效果的有效途径，对于苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病的防治具有重要的理论和实践价值。

技术实现要素：

针对上述问题和现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种新型的生物农药制剂，即一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂，按重量百分数计算，该可湿性粉剂的有效活性成分包含10％的长枝木霉t6菌株分生孢子粉。

进一步地，按重量百分数计算，该粉剂还包括0.6％的润湿剂，5％的分散剂，0.05％的粘着剂，0.1％的孢子萌发促进剂，0.3％的紫外保护剂，余量载体滑石粉。

进一步地，所述的润湿剂为十二烷基硫酸钠，其浓度为60μg/ml。

进一步地，所述的分散剂为木质素磺酸钠。

进一步地，所述的粘着剂为黄原胶。

进一步地，所述的孢子萌发促进剂为硫酸锌，其浓度为10μg/ml。

进一步地，所述的紫外保护剂为炭黑。

进一步地，按所述的长枝木霉t6菌株可湿性粉剂质量为1g计，各组分配比为：

另外本发明还提供了一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂在防治苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病中的应用。

本发明的有益效果在于：

①研发获得的新型高效长枝木霉t6菌株可湿性粉剂为苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病的防治提供新的生物药剂；

②研制的长枝木霉t6菌株可湿性粉剂能够有效替代化学农药所产生的农药残留、污染环境、病原菌产生抗药性和人畜中毒等弊端，对苹果产业向绿色和有机化方向发展具有重要的意义。

③研制的长枝木霉t6菌株可湿性粉剂可有效防治苹斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病的发生和危害，对于苹果产业的提质、增产、增效具有显著的经济和社会效益。

附图说明

图1：不同药剂对苹果斑点落叶病菌的抑菌效果图；

图2：不同药剂对苹果炭疽叶枯病菌的抑菌效果图；

注：a：对照；b：长枝木霉t6菌株可湿性粉剂。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分，而不是发明的全部。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

下列实施例所用到的实验材料和仪器包括：

供试生物材料：苹果斑点落叶病菌、苹果炭疽叶枯病菌和长枝木霉t6菌株均由甘肃农业大学植物保护学院植物病原学实验室保存并提供。

农药助剂：润湿剂十二烷基硫酸钠由亨斯迈公司生产、分散剂木质素磺酸钠由亨斯迈公司生产、粘着剂黄原胶由天津市光复精细化工研究所生产、孢子萌发促进剂硫酸锌由上海金山化工厂生产、紫外保护剂炭黑由郑州正浩化工产品有限公司生产、载体滑石粉由天津市光复精细化工研究所生产

供试仪器：高压蒸汽灭菌锅、摇床、显微镜、血球计数板、手动喷雾器、气流粉碎机(上海华东理工大学华力索菲科技有限公司)、紫外灯管(上海毅辉仪器仪表有限公司)和小型高速喷雾干燥仪(上海世远生物设备有限公司)，其他未说明出处的仪器均为市售产品。

实施例1一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂配方

一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂按质量为1g计，各组分配比为：

实施例2实施例1中一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂的质量检测

在该组分配比下，长枝木霉t6菌株可湿性粉剂的孢子悬浮率为(80.11±0.89)％、总悬浮率为(76±1.23)％、润湿时间为(52±0.54)s、ph为(6.24±0.181)、含水量为(2.02±0.14)％、标准筛过筛率为(97±0.54)％和活孢子数为2.67×10⁹个/g，符合国家可湿性粉剂及生物制剂的相关标准。

实施例3实施例1中的一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂配方的抑菌作用测定

将实施例1制备的长枝木霉t6可湿性粉剂加入pda培养基中，轻轻摇动使之混匀制成平板，以加入等量无菌水的平板作为对照。然后，分别挑取苹果斑点落叶和苹果炭疽叶枯病菌的菌饼接种到平板中央，每个处理和对照均3个重复。在温度为(25±1)℃的培养箱中培养，并于培养后第3d开始采用“十字交叉法”测量苹果斑点落叶和苹果炭疽叶枯病菌的菌落直径，用以下公式计算各处理抑菌率。

抑菌率(％)＝[(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-0.5)]×100

注：式中0.5为接入菌饼的直径(cm)。

选择苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病对长枝木霉t6可湿性粉剂的防治效果进行测定。由表1得出，长枝木霉t6可湿性粉剂在室内对苹果斑点落叶病菌和苹果炭疽叶枯病菌的抑菌率分别为80.63％和93.75％。抑菌效果如图1、2所示。

表1不同药剂对苹果斑点落叶病菌和苹果炭疽叶枯病菌的抑菌效果

实施例4实施例1中的一种长枝木霉t6菌株可湿性粉剂配方防治效果测定

将从试验果园采集的健康苹果新稍叶片扦插于盛有无菌水的三角瓶中，每瓶8枝，并采用喷雾接种的方法分别将培养的苹果斑点落叶和炭疽叶枯病菌的孢子悬浮液(浓度为1×10⁷个/ml)接种于供试苹果叶片的正反面，塑料罩保湿(相对湿度约90％)，并置于25℃的气候箱中培养。待接种病原菌培养3d后，采用喷雾法将研发的长枝木霉t6菌株可湿性粉剂(800倍液)均匀喷施于接种病原菌的叶片正反面。试验中每个处理和对照均3个重复，即3瓶共24个枝条。然后，待培养7d后，根据苹果斑点落叶和炭疽叶枯病的发生分级标准进行发病情况调查统计，计算防治效果。

防治效果(％)＝[(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数]×100

选择长枝木霉t6菌株可湿性粉剂对苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病的防治效果进行测定。由表2得出，长枝木霉t6可湿性粉剂对苹果斑点落叶病和苹果炭疽叶枯病的防治效果分别为80.12％和84.54％。

表2不同药剂对苹果斑点落叶病菌和苹果炭疽叶枯病防治效果