一种干细胞冻存盒的制作方法

本实用新型涉及细胞冻存盒领域，具体的说，是一种干细胞冻存盒。

背景技术：

在体外培养工作中，细胞随着生存时间得延长，传代次数增加，生物学特性会逐渐发生变化，为了长期保存细胞活性，或者保护稀有细胞，经常需要将细胞进行冷冻保存。

冻存原理：在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内外的水会形成冰晶，引起细胞内发生一系列变化，如机械损伤、电解质浓度升高、渗透压改变、pH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。向培养液加入保护剂(如二甲基亚砜，其对细胞无毒性，分子量小，溶解度大，易穿透细胞)，可增大细胞膜对水的通透性、降低细胞内水的冰点。在缓慢降温的冷冻条件下，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，冰冻在细胞外形成，从而避免对细胞的损害。因此缓慢降温对提要冻存细胞的活力显得尤为重要。

目前常用的细胞冻存方式有两种。传统冻存方式是先在4℃放置30-60 分钟，转入-20℃放置30-60分钟，再转入-80℃放置16-18小时(或过夜)，最后放入液氮中长期保存。传统冻存方式步骤多、耗时长，特别是放置在4℃和-20℃的时间长短不易把握，降温速率不均匀，对细胞的损伤相对较大，复苏后存活率不高。另一种是市场上出售的程序降温盒、梯度降温盒，将加有冻存液的细胞放入其中，直接放入-80℃过夜后，再转入液氮中长期保存，可以提供良好的缓慢降温速率。但是梯度降温盒费用贵，并且需要添加异丙醇。异丙醇有毒，易挥发，需要放在冰箱保存；使用5-6次后需要更换异丙醇，每次有损耗和浪费，维护成本高；重复使用间隔时间长，约1小时，使用需要观察液体刻度。

技术实现要素：

本实用新型所要解决的技术问题是提供一种干细胞冻存盒，在冻存干细胞时，能够使所有试管内的细胞均匀地梯度降温，缩短降温的时长，增加细胞的存活率。

本实用新型解决上述技术问题的技术方案如下：一种干细胞冻存盒，包括底座、若干个设置在底座上的安装柱、竖向设置在安装柱内且用于安装试管的安装孔、设置在安装柱上方的盖板和若干个设置在盖板上设有供所述安装柱的顶端插入的安装槽，所述的底座、安装柱和盖板均采用聚氨酯制成。

本实用新型的有益效果是：利用一个安装柱对应一个试管，能够使冷冻环境中的冷空气分布在安装柱与安装柱之间，从而使每个安装柱的外表面同时降温，使得试管能够与外界环境同步进行热交换而同时降温，避免冻存盒外围的试管先降温、冻存盒中部的试管后降温而导致整个降温时间增加，并且避免冻存盒中部的试管因为降温缓慢而导致部分细胞死亡，从而增加细胞的存活率。

在上述技术方案的基础上，本实用新型还可以做如下改进。

进一步，所述的安装柱为圆柱形，所述的安装孔与安装柱同轴设置。

采用上述进一步方案的有益效果是：使试管周围与外界的距离保持一致，从而便于试管各处均匀降温。

在上述技术方案的基础上，本实用新型还可以做如下改进。

进一步，所述的安装柱的顶部设置有小端朝上的圆台形连接部，所述的安装槽为圆柱形盲孔，所述的连接部的最大直径大于安装槽的内径，所述的连接部的最小直径小于安装槽的内径。

采用上述进一步方案的有益效果是：以此便于使安装柱与安装槽对准，从而使得盖板更容易盖上，利用连接部与安装槽那个实现过盈配合，以增加盖板与安装柱的连接强度。

在上述技术方案的基础上，本实用新型还可以做如下改进。

进一步，所述的安装柱等间距阵列分布。

采用上述进一步方案的有益效果是：便于加工制造。

在上述技术方案的基础上，本实用新型还可以做如下改进。

进一步，所述的安装孔的底部连通有小端向下的圆台形孔，所述的圆台形孔的最小直径小于试管的外径。

采用上述进一步方案的有益效果是：利用圆台形孔便于夹紧试管，防止试管松动，避免在运输的过程中发生晃动。

在上述技术方案的基础上，本实用新型还可以做如下改进。

进一步，所述的安装孔的内壁设置有用于防止试管晃动的凸起。

采用上述进一步方案的有益效果是：便于安装具有不同尺寸的试管，并防止试管松动。

在上述技术方案的基础上，本实用新型还可以做如下改进。

进一步，所述的安装柱的最小壁厚大于或等于3cm。

采用上述进一步方案的有益效果是：便于控制试管内冻存液的降温速度。

附图说明

图1为本实用新型底座与安装柱的结构示意图；

图2为本实用新型盖板的结构示意图；

图3为实施例2中底座与安装柱的结构示意图；

图4为实施例2中盖板的结构示意图；

图5为实施例3中安装柱的结构示意图；

图6为实施例3中安装柱的结构示意图；

附图中，各标号所代表的部件列表如下：

1、底座，2、安装柱，3、安装孔，4、盖板，5、安装槽，6、圆台形孔，7、连接部，8、凸起。

具体实施方式

以下结合附图对本实用新型的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本实用新型，并非用于限定本实用新型的范围。

实施例1：

如图1、图2所示，一种干细胞冻存盒，包括底座1、若干个设置在底座1上的安装柱2、竖向设置在安装柱2内且用于安装试管的安装孔3、设置在安装柱2上方的盖板4和若干个设置在盖板4上设有供所述安装柱2 的顶端插入的安装槽5，所述的底座1、安装柱2和盖板4均采用聚氨酯制成。将含有待冻存干细胞的冻存液装入试管内，再将试管放置在安装孔内，将盖板4上的安装槽5对准安装柱2并合上盖板4以起到遮挡的作用。为了便于将试管取出，所述的安装孔3的长度小于试管的长度，将盖板4合上之后，安装孔3的最低点与安装槽5最高点的距离大于试管的长度。装好试管之后，将冻存盒整体放入低温环境降温，低温环境的环境温度一般为 -80℃。

现有技术条件下的冻存盒，通过在整块结构上开设若干个孔以形成放置试管的安装孔，如冻存盒为整体结构，在冻存时，只能够由冻存盒的外表面与环境先进行热交换，再使冻存盒内相对外层的试管进行过降温，而导致冻存盒内相对内层的试管降温不及时，增加细胞的死亡率。本方案使安装柱2 间隔设置，能够让低温环境的冷空气分布在安装柱2与安装柱2之间，使每一个安装柱2都能够同时与外界环境进行热交换，从而能够使所有试管同时进行降温，避免不同试管先后进行降温而导致整个降温周期被延长，并防止降温不及时而导致细胞死亡率增加。

实施例2：

如图3、图4所示，在上述实施例的基础上，本实施例中，所述的安装柱2为圆柱形货棱柱形，所述的安装孔3与安装柱2同轴设置。所述的安装槽5相应的设置为圆柱形。将安装柱2设计为圆柱形能够使装在安装孔3 内的试管与外界的距离基本保持一致，从而使试管各处能够均匀的降温。本实施例中，其它未描述的内容与上述实施例相同，故不赘述。

实施例3：

如图5所示，在上述实施例2的基础上，本实施例中，所述的安装柱2 的顶部设置有小端朝上的圆台形连接部7，所述的安装槽5为圆柱形盲孔，所述的连接部7的最大直径大于安装槽5的内径，所述的连接部7的最小直径小于安装槽5的内径。在安装柱2的顶部设置圆台形的连接部7，能够利用连接部7的小端起到导向的作用，便于安装槽5与安装柱2对准，使得盖板4与安装柱2的安装更加方便快捷。使连接部7的最大直径大于安装槽5 的直径，利用连接部7本身的弹性，实现连接部7与安装槽5的过盈配合，从而避免盖板4脱落。本实施例中，其它未描述的内容与上述实施例相同，故不赘述。

实施例4：

在上述实施例2的基础上，本实施例中，所述的安装柱2等间距阵列分布。以此便于底座1与安装柱2整体一体加工成型。降低加工制造难度。本实施例中，其它未描述的内容与上述实施例相同，故不赘述。

实施例5：

如图5所示，在上述实施例的基础上，本实施例中，所述的安装孔3的底部连通有小端向下的圆台形孔6，所述的圆台形孔6的最小直径小于试管的外径。因为试管具有多种尺寸，为了一种直径尺寸的试管设计一种冻存盒会导致冻存盒种类数量过多、通用性差，增加使用成本。当安装孔3的直径大于试管直径时，试管放置在安装孔内会出现安装不稳、在移运时产生等晃动等现象。利用圆台形孔6能够与试管的底部进行过盈配合，从而通过圆台形孔6将试管夹紧以保持试管的稳定。防止在移运冻存盒时，使试管产生较大的晃动，并且使安装孔3适用于安装直径小于安装孔3直径的试管，从而提高冻存盒的适用范围，并降低使用成本。本实施例中，其它未描述的内容与上述实施例相同，故不赘述。

实施例5：

如图6所示，在上述实施例的基础上，本实施例中，所述的安装孔3的内壁设置有用于防止试管晃动的凸起8。所述的凸起8沿着安装孔3的轴线方向设置在安装孔3的内壁上，利用凸起8能够减小安装孔3的最小间距，当试管装入安装孔3之后，利用安装柱2的弹性使得试管被夹持在凸起8 与安装孔3的内壁之间，从而提高试管的稳定性。本实施例中，其它未描述的内容与上述实施例相同，故不赘述。

实施例6：

在上述实施例的基础上，本实施例中，所述的安装柱2的最小壁厚大于或等于3cm。由于盒体1和盒盖4由聚氨酯制成，可以使得冻存管内液体温度每分钟降低1℃，直至降低到-80℃，以此可以使细胞复苏存活率达到 99.5％，在同等实验条件下，冻存管距离外界环境2cm时，细胞复苏存活率为97％，冻存管距离外界环境1cm时，细胞复苏存活率为95％。本实施例中，其它未描述的内容与上述实施例相同，故不赘述。

以上所述仅为本实用新型的较佳实施例，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。