一种用于人类睾丸及附睾精子冻存的微型保存装置的制作方法

本实用新型属于医疗器械领域，尤其涉及一种用于人类睾丸及附睾精子冻存的微型保存装置。

背景技术：

卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术的诞生是辅助生殖发展的里程碑，它解决了部分由于男性因素导致的不孕不育问题，该技术的发展和取精方法的改进给不可逆的梗阻性无精子患者带来了福音。目前，睾丸活检穿刺术(TESA)、经皮附睾精子抽吸术(PESA)是无精子症患者有效的取精方法。行TESA的患者，需取膀胱结石位，常规消毒铺巾局麻后由活检针刺入睾丸获取曲精小管，曲精小管经研磨后离心洗涤涂皿供ICSI注射用，TESA来源的精子常含有血细胞、研磨后的组织碎片、各级生精细胞等，杂质较多，多为不活动的精子；行PESA的患者，则用20ML注射器抽吸附睾液体，离心洗涤后涂皿供ICSI注射用，PESA来源的精子所含杂质较少，略有红细胞，多为活动精子。TESA、PESA来源的精子数量有限且获取流程复杂，这部分患者病史相对复杂，获取精子更为难得更显宝贵。随着冷冻技术的发展，为了避免取卵当日男方取精失败或者反复手术穿刺的痛苦、对器官组织的损伤以及经济上的负担，附睾、睾丸精子的冷冻在临床上成为需求，但是常规的精液冷冻技术并不适用于附睾、睾丸精子的冷冻保存，此外也无商品化的针对附睾睾丸精子冷冻的保存装置。

目前冷冻胚胎的微型装置包括开放性和封闭性的载体两种，冷冻环(cryloop)于1999年被首次报道，为开放型冷冻保存装置，该装置为一细尼龙丝制成的直径约2mm的环，安装在金属杆上，尼龙丝浸入液体后由于表面张力的作用会形成薄膜，该薄膜可装载胚胎进行冷冻，但需与液氮直接接触，避免不了污染的风险，目前临床上已极少使用。

Crytop是封闭性的载体，使用广泛，它是一个非常薄而窄的片状膜，连接一个手持杆，将卵子或胚胎和冷冻液的小微滴装载在薄膜上浸入液氮，带帽保存，在胚胎玻璃化冷冻中较为常用，且复苏率好，它是为卵子和胚胎设计的，因此装载量较小，约为2-3微升，但是TESA、PESA来源的精子富集后的体积要远远高于其装载量，因此无法用于睾丸附睾精子冷冻。

临床实践中，常规精液冷冻所用载体多为2ML细胞冻存管，该载体密封性差，在低温保存过程中液氮易渗入导致污染，解冻时易炸管，且固定性差，易翻倒，此外TESA、PESA来源精子经离心富集冷冻后通常只有0.2ml，放入大体积的细胞冻存管后不仅冷冻速率低下，管中过多的空气也增加了炸管的风险，同时解冻后需用移液管或枪头将精子从冻存管转移至ICSI皿，此间损耗过大，因此限制了该方法的应用。

目前公开的专利文献中，中国专利CN1803100A公开了运用空卵透明带(ZP)冻存睾丸精子的方法，以胞浆抽空的透明带为载体，将活检后的睾丸精子装入透明带。所述制备空透明带的方法过于繁琐难以获得(只有废弃卵子才有望去提取空透明带)，人力经济成本过高，且废弃卵子空透明带使用的伦理问题也带考量，因此限制了该方法在临床的推广和应用。

中国专利CN207185758U公开了一种TESA、PESA所获精子针式冷冻装置，该精子针式冷冻装置与显微镜操作臂配合，分吸入段和存储段，存储段精子的密封需要借助高温，这对管中精子的损伤也是显而易见的，此外这需要显微操作系统的熟练操作，技术要求较高，不易普及，睾丸附睾精子处理富集后常含有其他细胞和组织碎片，且睾丸精子多为不动精子，难以筛选，用吸入段抓取精子耗时过长，人力、技术成本过高。

麦管是一种一头为棉塞的塑料麦管，有0.25ml和0.5ml两种规格，0.25ml主要用于胚胎慢速程序化冷冻，具体用法是将含胚胎的微量液体装管后冷冻，但该麦管无吸取液体的配套装置，使用不便，随着玻璃化冷冻技术的发展已极少使用；0.5ml的常用于玻璃化冷冻，配有类似Crytop的薄膜载片的载杆，胚胎装载上薄膜后将载杆插入麦管投入液氮保存，同样载片的装载体积太小，该载体不适于睾丸附睾精子来源的精子冷冻。

技术实现要素：

实用新型目的：本实用新型目的是针对现有麦管不适于睾丸附睾精子冷冻，如操作不便、装载量小等问题，提供一种结构简单、操作方便、便于生产的冷冻附睾、睾丸精子的麦管。

技术方案：本实用新型包括麦管，所述麦管的一侧塞有棉塞，所述的麦管棉塞端连接有麦管吸球，另一端连接有麦管塞手柄，所述的麦管棉塞端还可以连接麦管塞沉重部，所述的麦管表层涂有无毒示温剂，外壁带有刻度线。

所述的麦管塞手柄一面为弧形，一面为长方形，通过手柄连接杆与麦管连接，便于拿捏并进行患者信息的标记。

所述的手柄连接杆为实心管，其外径与麦管内径一致。

所述的麦管吸球通过连杆与麦管连接，所述的连杆为空心杆件，其外径与麦管内径一致，设置麦管吸球，避免了现有麦管无专有吸引装置带来的操作不便及污染源等风险。

所述麦管吸球的容积为0.25ml，从而有足够的吸力将麦管装满。

所述的麦管塞沉重部采用金属材质，其外径与麦管内径一致，避免标本在液氮中漂浮。

所述的麦管塞沉重部中间设有单向阀，避免解冻时空气膨胀引发炸管，同时起到很好的密闭作用，避免液氮中的交叉污染。

有益效果：本实用新型增设了麦管吸球，避免了现有麦管无专有吸引装置带来的操作不便及污染源的风险；麦管外壁带有刻度标记，可以提示操作人员冻存的体积，便于冻存精子总数的换算；麦管表层涂有无毒示温剂，在精子的液氮熏蒸过程中可以很好的监测其降温效果；麦管塞手柄一面设计成方形，容易拿捏并进行患者信息的标记；麦管塞沉重部为金属材质，避免标本在液氮中漂浮，且设计有单向阀，避免解冻时空气膨胀引发炸管，同时起到很好的密闭作用，避免液氮中的交叉污染。

附图说明

图1为本实用新型的结构示意图；

图2为本实用新型的麦管吸球示意图；

图3为本实用新型的麦管塞手柄示意图；

图4为本实用新型的麦管塞沉重部示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型作进一步说明。

如图1至图4所示，本实用新型包括麦管1、棉塞2、刻度线3、连杆4、麦管吸球5、手柄连接杆6、麦管塞手柄7、麦管塞沉重部尾部8、麦管塞沉重部头部9与单向阀10。麦管1的一侧塞有长50mm的棉塞2，麦管1棉塞端连接有麦管吸球5，避免了现有麦管无专有吸引装置带来的操作不便及污染源等风险；另一端连接有麦管塞手柄7，麦管1棉塞端还可以连接麦管塞沉重部。麦管1的外径为1mm，内径0.8mm，总长10cm，表面涂有耐低温的示温涂层，在精子的液氮熏蒸过程中可以很好的监测其降温效果，外壁带有刻度线3，可以提示操作人员冻存的体积，便于冻存精子总数的换算。

麦管吸球5通过连杆4与麦管1连接，连杆4为空心杆件，其外径与麦管1内径一致为0.8mm，长1cm，麦管吸球5容积为0.25ml，从而有足够的吸力将麦管1装满。设置麦管吸球5，可以避免现有麦管无专有吸引装置带来的操作不便及污染源等风险。

麦管塞手柄7一面为弧形，一面为长方形，通过手柄连接杆6与麦管1连接，便于拿捏并进行患者信息的标记。手柄连接杆6为实心管，其外径与麦管1内径一致为0.8mm，长1cm，麦管塞手柄7长2cm，直径为4mm。

麦管塞沉重部包括麦管塞沉重部尾部8、麦管塞沉重部头部9与单向阀10，麦管塞沉重部头部9的直径大于麦管塞沉重部尾部8。麦管塞沉重部采用金属材质，避免标本在液氮中漂浮，其中，麦管塞沉重部尾部8的外径与麦管1的内径一致。麦管塞沉重部尾部8长50mm，直径为0.8mm，麦管塞沉重部头部9的直径为4mm，麦管塞沉重部中间设有单向阀10，只允许麦管1由内向外排气，置入液氮罐后液氮无法进入麦管1，避免解冻时空气膨胀引发炸管，同时起到很好的密闭作用，避免液氮中的交叉污染。

具体操作过程为：

1)制备精子样本：冷冻前首先在麦管塞手柄7处标记患者信息，如姓名、病历号、精子来源等，TESA来源精子需研磨洗涤离心后富集，PESA来源精子直接离心洗涤富集，富集后的精子加入0.1ml培养液，同时加入等体积的冷冻液形成精子样本，混匀后的样本在室温放置10min；

2)装管：挤压麦管吸球5，同时将连杆4套入麦管1的棉塞端，将麦管1的另一端浸入空培养基，轻轻松开麦管吸球5，缓慢吸入20微升空培养基，将麦管1的管口脱离液面，吸入20微升空气柱，再将麦管1浸入所需冷冻的精子样本中，轻轻松开麦管吸球5，可见精子样本被缓慢吸入麦管1，关注吸入段的样本体积，约20微升(具体体积可根据精子情况调整)，再吸入一段20微升空气柱，之后再吸入一段20微升空培养基，继续松开麦管吸球5，直至第一步吸取的空培养基浸湿棉塞2，此时装管完成；

3)麦管密封：手持麦管塞手柄7，将手柄连接杆6塞入麦管1并旋紧，将麦管吸球5从麦管1棉塞端去除，同时将麦管塞沉重部尾部8旋入麦管1棉塞端；

4)液氮保存：将麦管1放于液氮盒上熏蒸30min，此时关注麦管1表层颜色的变化并记录监测样本的降温过程，投入液氮罐保存。