本发明涉及的是一种马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法，属于海水珍珠养殖技术领域。
背景技术：
我国是盛产珍珠的大国，所产南珠更是盛誉中外，素有“西珠不如东珠，东珠不如南珠”之称。南珠所指的就是指北部湾所产之珍珠，即利用马氏珍珠贝培育出来的珍珠，尤以广西合浦所产为优。合浦所产南珠珠质凝重，光洁圆润，色彩斑瓓，是珠中极品。按理说如此好的珍珠应当有好的国际声誉和好的国际市场，然而事实却是不可乐观，我国南珠销售在国际市场销售总额中却只有不到10％的份额，市场占有额极不合理，究其原因，除了生产设备简陋，加工机械落后外，最主要的原因还是养殖珍珠质量上的低劣，高质量的珍珠必定需要有一个高质量的珍珠贝作为其产生的基础，有优质的马氏珍珠贝才是生产出高质量珍珠的保证。传统马氏珍珠贝种苗的孵化培育，均是自然孵化，不采用任何技术措施，这样长期的自然孵化，培育出来的种苗就会产生品种退化现象，孵化成活率低，珍珠贝个头小，抗病能力差，生长缓慢，用于人工养殖珍珠时，珍珠贝含珠率低，成活率低。因此，提供一种马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法，以提高马氏珍珠贝的质量，提高珠贝成活率同时也提高人工养殖珍珠的含珠率及成活率，显为尤为重要。
技术实现要素：
本发明的目的就是提供马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法，以克服传统马氏珍珠种苗自然孵化、放任性的培育所存在的孵化率低，种苗品质退化，培育质量低，珠贝质量差，个头小，抗病率差的不足。
上述发明目由下述具体技术措施实现，一种马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法，包括下述具体技术步骤：
(1)采集亲贝：于当年春季三月至五月或秋季八月至十月，采集北部湾海域野生马氏贝母贝原种3年龄至5年龄,贝壳完整,壳高7cm以上,放射线明显，腹缘鳞片突出,无病虫害感染,贝壳内壁珍珠层晶莹光润,色泽银白或彩虹色,性腺丰满的马氏珠母贝作为亲贝进行人工授精；其中成熟的雌贝性腺外观呈鲜黄或淡黄色,性腺丰满,表面光滑，挑取少许成熟卵子于载玻片上,滴上海水即散开，显微镜下成熟卵子,卵径为50μm-60μm，卵核大而明显,卵黄粒丰富成熟；雄性性腺外观呈乳白色,性腺表面粗糙,呈颗粒状，轻压生殖孔附近有生殖细胞流出,精液呈乳状，成熟精子在30mg/l-50mg/l的氨海水中显微镜下观察非常活泼；
(2)授精前准备：在人工授精前准备好经过沙滤过的干净海水置于玻璃培育缸中，加入氨水调整海水的酸碱度使海水略为弱碱性，至ph8.3-8.5，海水比重控制在1.018-1.021，水温控制在28-30℃，得到氨海水备用；
(3)诱导催产：取亲贝洗涮干净后,用浓度是5毫克/升的高锰酸钾溶液浸泡5-10分钟,用过滤海水冲洗干净,阴干2-3小时后,用流速20厘米/秒的常温海水刺激1-2小时，再将水温升高3℃-4℃,保持30分钟,移入常温海水待产；或取亲贝清洗、阴干，将亲贝置于温度为29℃～30℃、浓度为400毫克/升-600毫克/升的氨海水中浸泡20-30分钟后,移入常温海水待产；
(4)授精：采取自然授精或人工授精，其中：自然受精：经诱导催产的雌雄亲贝以8:1-10:1的比例放入盛有新鲜过滤海水的受精箱内进行受精,或将雌雄亲贝分置于不同的受精箱中排放卵、精，将收集的卵、精液混合，用玻璃棒轻轻搅拌均匀，混合液屮卵子浓度为100个/毫升-30个/毫升，精、卵排放收集时间控制在1小时内，受精箱的材质为玻璃钢或塑料,箱底面积1平方米-3平方米；人工授精：将淸洁干净的容器、解剖刀、胶头滴管、长吸管及筛绢网用5毫克/升的高锰酸钾溶液浸泡5-10分钟进行消毒处理,再用过滤海水冲洗干净后备用；将洗涮干净的亲贝用解剖刀剪断闭壳肌，去掉贝壳，剪去足丝、外套膜及鳃,使生殖腺裸露,用消毒脱脂棉擦去生殖腺上的体液和海水，手指挤压生殖腺腺体,用吸管吸取亲贝的精子、卵子,分别放入预先装有过滤海水的玻璃容器中，采精容器为2升装量以上的容器,采卵容器为20升装量以上的容器,容器中装入的海水以每个亲贝需20毫升计，取精时间≤30分钟、取卵时间≤25分钟，精、卵细胞液分别给150微米筛编网袋过滤冲洗后,将卵液先倒入5升的受精缸中,受精缸预先装1/2体积、浓度为30毫克/升-50毫克/升过滤氨海水,玻棒轻搅拌,静置5分钟-l0分钟,卵子胚泡消失后,倒入精液,轻搅充分混合，受精要求雌雄比例4:1-6:1；水温22-25℃:盐度23-32，受精缸卵子浓度为100个/毫升-300个/毫升受精时间30分钟；
(5)孵化：首先换水洗卵，受精后30分钟底部形成一层白色沉淀层,即可以开始换水洗卵，先用虹吸法吸除受精缸3/4/上层未下沉的多余精液和劣质卵子,迅速加满过滤海水,静置，第二次换水时用孔径40微米筛绢包住虹吸管口吸除，时间及频次是每隔30分钟至50分钟洗涤1次，洗涤2次-3次；
(6)担轮幼虫收集和暂养：受精5小时后,幼虫成白色条状，即可用虹吸法用孔径为50微米筛绢网袋收集受精缸中上浮的担轮幼虫，冲洗，移入500升大塑料桶孵化缸孵化暂养，每收集一次，重新加满过滤海水,静置，再收集，重复2次-3次，孵化暂养要求：营养水温26℃-29℃；盐度23-32；暂养密度50个/毫升-100个/毫升；暂养时间为12小时；持续微充气，气量以稍微鼓起气泡为准；
(7)幼虫培育：当幼虫发育至直线铰合幼虫期即d型虫期，即能分苗下池，用吸法将幼虫装入数有1/3过滤海水的培育池中，放养密度为2-4个/毫升，育苗水温为25℃-30℃,盐度23-32，育苗池要求:半埋式,地上高度0.7米，深度1.6米-1.8米，池内水位能保持1.4米-1.6米，池底倾斜度为2％-3％，幼虫下池后3天内,每天添加1/3的新鲜过滤海水,第3天加满至最高位,第4天开始换水，d型幼虫期换水量1/3,壳顶中后期换水1/2,变态附着阶段换水3/4以上,直至100％换水，全部附着后用沉淀海水换水，换水时依发育期分别用孔径为40微米、58微米、120微米的筛绢滤水，换水时温度差不超过2℃；在d形幼虫期开始投喂育苗饵料，育苗饵料有金藻、扁藻及盐藻，饵料要求处于生长繁殖旺盛期，浓度高，无病虫害的新鲜藻，换水后在上午8时和下午5时投放饵料，投饵量随幼体生长发育不同阶段而变化，从d型幼虫第1天至45天的幼苗收苗期，亚心形扁藻的投喂量逐日增加，从300个/毫升至3000-4000个/毫升，雷州半岛叉鞭金藻的投喂量从200个/毫升至600-1000个/毫升，在d型幼虫前期或加投放面包酵母，投喂量为0.2毫克/毫升-0.3毫克/毫升；连续微充气，保持水中溶氧量达5.0毫克/升以上；
(8)病虫害防治：为防止致病菌繁殖,幼虫变态前投放抗生素复方新诺明使浓度达以1毫克/升-3毫克/升、壳顶初期变态到壳顶中期投放硫酸链霉素使浓度达到1毫克/升，壳顶中期变态到壳顶后期及壳顶后期变态到附着投放土霉素，使浓度达到1毫克/升-2毫克/升；
(9)附苗：附苗器材质采用胶丝网布或聚乙烯塑料薄板,规格每片长宽为18厘米×20厘米,或18厘米×22厘米,或20厘米×20厘米,每串吊片10片-14片,片与片间隔10厘米-12厘米；附苗器投放前需经反复擦洗,清洁干净后,再用0.5％的盐酸浸泡2天进行消毒,用经过滤的海水冲洗干净备用，新启用的附苗器还需先清水浸泡10天,再如前述方法进行擦洗,消毒后备用；按每立方米水体附苗器投放量为100片-150片,2天-4天内投放完毕，当眼点幼虫有10％时,育苗池底部铺设胶丝网布；眼点幼虫20％时,按每立方米水体附苗器投放量为20片-40片；当眼点幼虫达40％,按每立方米水体附苗器投放量为100片-120片，直至最后投完附苗器，让幼虫附着附苗器生长。
(10)收苗：将附苗器从育苗池取出放入装有清洁海水的大塑料盆，用手轻抹附着片上泡沫、杂质，将附苗器浸入浓度为200毫克/升-250毫克/升的氨海水中10分钟，使贝苗自行从附苗器脱落、过滤、过滤海水冲洗后即能投入海水养殖池中养殖。
采取上述措施的本发明，采集野生原种为亲贝，通过调整培育液的海水ph值及盐度，营造了一个适合马氏珍珠贝繁殖的良好环境，在授精时采用了科学的卵子和精子比例，及时地吸除掉不授精的卵细胞和多余的精细胞及余存的组织细胞，有效的改善了珍珠贝的孵化水质，缩短珍珠贝的洗卵时间，提高了受精卵孵化密度，从而使孵化率提高。本发明孵化培育的马氏珍珠贝种苗健康强壮，品种优良，养殖成活率高，本发明方法容易实施，经济效益高。
具体实施方式
实施例1
(1)采集亲贝：于当年春季四月上旬，采集北部湾海域野生3年龄马氏贝母贝原种2000个,贝壳完整,壳高7cm以上,放射线明显，腹缘鳞片突出,无病虫害感染,贝壳内壁珍珠层晶莹光润,色泽银白或彩虹色,性腺丰满的马氏珠母贝作为亲贝进行人工授精；其中成熟的雌贝性腺外观呈鲜黄或淡黄色,性腺丰满,表面光滑，随机选择亲贝十个，挑取少许成熟卵子于载玻片上,滴上海水即见散开，显微镜下成熟卵子,卵径为50微米-60微米，卵核大而明显,卵黄粒丰富成熟；雄性性腺外观呈乳白色,性腺表面粗糙,呈颗粒状，轻压生殖孔附近有生殖细胞流出,精液呈乳状，成熟精子在30微克/升-50微克/升的氨海水中显微镜下观察非常活泼；
(2)授精前准备：在人工授精前准备好经过沙滤过的干净海水置于玻璃培育缸中，加入氨水调整海水的酸碱度使海水略为弱碱性，至ph8.3，海水比重控制在1.018，水温控制在28-30℃，得到氨海水备用；
(3)诱导催产：取亲贝洗涮干净后,用浓度是5毫克/升的高锰酸钾溶液浸泡5分钟,用过滤海水冲洗干净,经过2-3小时阴干,选择具有高低水位差的养殖池，用流速20厘米/秒的28℃海水冲洗刺激1小时，再将部份海水加热与常温海水调整温度至31℃继续冲洗剌激30分钟,移入28℃海水待产；
(4)授精：采取自然授精方法，经诱导催产的雌雄亲贝以8:1的比例分置于不同的箱底面积1平方米-3平方米的玻璃钢受精箱中排放卵、精，将收集的卵、精液混合，用玻璃棒轻轻搅拌均匀，混合液屮卵子浓度为100个/毫升-30个/毫升，精、卵排放收集时间控制在1小时内，在混合液中卵自然受精，得到受精卵液；
(5)孵化：在受精卵液中，受精卵自然下沉，然后换水洗卵，受精后30分钟底部形成一层白色沉淀层,即可以开始换水洗卵，先用虹吸法吸除受精缸3/4/上层未下沉的多余精液和劣质卵子,迅速加满过滤海水,静置，30分钟进行第二次换水洗涤，用孔径40微米筛绢包住虹吸管口吸除，再加入过滤海水静置；
(6)担轮幼虫收集和暂养：卵受精5小时后,观察到白色条状幼虫生成，即用虹吸法用孔径为50微米筛绢网袋收集受精缸中上浮的担轮幼虫，冲洗，移入500升大塑料桶孵化缸孵化暂养，每收集一次，重新加满过滤海水,静置，再收集，重复2次，孵化暂养的过滤的水温26℃-29℃；盐度23-32；暂养密度50个/毫升-100个/毫升；暂养12小时；其间持续微充气，气量以稍微鼓起气泡为准，12小时后幼虫发育成直线铰合幼虫；
(7)幼虫培育：当幼虫发育至直线铰合幼虫期即d型虫期，即能分苗下池，将幼虫装入有1/3过滤海水的培育池中，放养密度为2-4个/毫升，育苗水温为25℃-30℃,盐度23-32，育苗池要求是半埋式,地上高度0.7米，深度1.6米-1.8米，池内水位能保持1.4米-1.6米，池底倾斜度为2％-3％；幼虫下池后3天内,每天添加1/3的新鲜过滤海水,第3天加满至最高位,第4天开始换水，d型幼虫期换水量1/3,壳顶中后期换水1/2,变态附着阶段换水3/4以上,直至100％换水，全部附着后用过滤海水换水，换水时依发育期分别用孔径为40微米、58微米、120微米的筛绢滤水，换水时温度差不超过2℃；在d形幼虫期开始投喂育苗饵料，育苗饵料有亚心形扁藻、雷州半岛叉鞭金藻，饵料要求处于生长繁殖旺盛期，浓度高，无病虫害的新鲜藻，换水后在上午8时和下午5时投放饵料，投饵量随幼体生长发育不同阶段而变化，投饵量见表1
表1马氏珠母贝幼体不同发育阶段的饵料量参照表
在d型幼虫前期或加投放面包酵母，投喂量为0.2毫克/毫升-0.3毫克/毫升；连续微充气，保持水中型溶氧量达5.0毫克/升以上；
(8)病虫害防治：为防止致病菌繁殖,幼虫变态前投放抗生素复方新诺明、硫酸链霉素及土霉素，药物使用参见表
表2抗生素投放量参照表
(9)附苗：附苗器材质采用胶丝网布或聚乙烯塑料薄板,每片长为20-22厘米，宽为18-20厘米,每串吊片10片-14片,片与片间隔10cm-12cm；附苗器投放前需经反复擦洗,清洁干净后,再用0.5％的盐酸浸泡2天进行消毒,用经过滤的海水冲洗干净备用，新启用的附苗器还需先清水浸泡10天,再如前述方法进行擦洗,消毒后备用；按每立方米水体附苗器投放量为100片,2天-4d天内投放完毕，当眼点幼虫有10％时,育苗池底部铺设胶丝网布；眼点幼虫20％时,按每立方米水体附苗器投放量为20片-40片；当眼点幼虫达40％,按每立方米水体附苗器投放量为100片-120片，直至最后投完附苗器，让幼虫附着附苗器生长。
(10)收苗：将附苗器从育苗池取出放入装有过滤海水的大塑料盆，用手轻抹附着片上泡沫、杂质，将附苗器浸入浓度为200毫克/升的氨海水中10分钟，使贝苗自行从附苗器脱落、过滤、清洁海水冲洗后即能投入海水养殖池中养殖。
实施例2
(1)采集亲贝：于当年秋季9月上旬，采集北部湾海域野生5年龄马氏贝母贝原种2000个,贝壳完整,壳高7cm以上,放射线明显，腹缘鳞片突出,无病虫害感染,贝壳内壁珍珠层晶莹光润,色泽银白或彩虹色,性腺丰满的马氏珠母贝作为亲贝进行人工授精；其中成熟的雌贝性腺外观呈鲜黄或淡黄色,性腺丰满,表面光滑，随机选择亲贝十个，挑取少许成熟卵子于载玻片上,滴上海水即见散开，显微镜下成熟卵子,卵径为50μm-60μm，卵核大而明显,卵黄粒丰富成熟；雄性性腺外观呈乳白色,性腺表面粗糙,呈颗粒状，轻压生殖孔附近有生殖细胞流出,精液呈乳状，成熟精子在30mg/l-50mg/l的氨海水中显微镜下观察非常活泼；
(2)授精前准备：在人工授精前准备好经过沙滤过的干净海水置于玻璃培育缸中，加入氨水调整海水的酸碱度使海水略为弱碱性，至ph8.5，海水比重控制在1.021，水温控制在28-30℃，得到氨海水备用；
(3)诱导催产：取亲贝清洗、阴干，将亲贝置于温度为29℃～30℃、浓度为400毫克/升-600毫克/升的氨海水中浸泡20-30分钟后,移入常温海水待产；
(4)授精：采取人工授精：将淸洁干净的容器、解剖刀、胶头滴管、长吸管及筛绢网用5毫克/升的高锰酸钾溶液浸泡10分钟进行消毒处理,再用过滤海水冲洗干净后备用；将洗涮干净的亲贝用解剖刀剪断闭壳肌，去掉贝壳，剪去足丝、外套膜及鳃,使生殖腺裸露,用消毒脱脂棉擦去生殖腺上的体液和海水，手指挤压生殖腺腺体,用吸管吸取亲贝的精子、卵子,分别放入预先装有过滤海水的玻璃容器中，采精容器为2升装量以上的容器,采卵容器为20升装量以上的容器,容器中装入的海水以每个亲贝需20毫升计，取精时间≤30分钟、取卵时间≤25分钟，精、卵细胞液分别给150微米筛编网袋过滤冲洗后,将卵液先倒入5升的受精缸中,受精缸预先装1/2体积、浓度为30毫克/升-50毫克/升过滤氨海水,玻棒轻搅拌,静置l0分钟，卵子胚泡消失后，倒入精液，轻搅充分混合，受精要求雌雄比例4-6:1；水温22-25℃:盐度23-32，受精缸卵子浓度为100个/毫升-300个/毫升受精时间30分钟；
(5)孵化：在受精卵液中，受精卵自然下沉，然后换水洗卵，受精后30分钟底部形成一层白色沉淀层,即可以开始换水洗卵，先用虹吸法吸除受精缸3/4/上层未下沉的多余精液和劣质卵子,迅速加满过滤海水,静置，50分钟进行第二次换水洗涤，用孔径40微米筛绢包住虹吸管口吸除，再加入过滤海水静置；
(6)担轮幼虫收集和暂养：卵受精5小时后,观察到白色条状幼虫生成，即用虹吸法用孔径为50微米筛绢网袋收集受精缸中上浮的担轮幼虫，冲洗，移入500升大塑料桶孵化缸孵化暂养，每收集一次，重新加满过滤海水,静置，再收集，重复3次，孵化暂养的过滤的水温26℃-29℃；盐度23-32；暂养密度100个/毫升；暂养12小时；其间持续微充气，气量以稍微鼓起气泡为准，12小时后幼虫发育成直线铰合幼虫；
(7)幼虫培育：与实施例1步骤(7)相同；
(8)病虫害防治：与实施例1步骤(8)相同；
(9)附苗：与实施例1步骤(9)相同；
(10)收苗：将附苗器从育苗池取出放入装有过滤海水的大塑料盆，用手轻抹附着片上泡沫、杂质，将附苗器浸入浓度为250毫克/升的氨海水中10分钟，使贝苗自行从附苗器脱落、过滤、清洁海水冲洗后即能投入海水养殖池中养殖。