一种百香果快速组培方法与流程

文档序号:17917832发布日期:2019-06-14 23:54

技术特征:

1.一种百香果快速组培方法,其特征在于:包括获取外植体及预处理、初代诱导、继代培养、生根培养、壮芽培养及炼苗移栽工序,具体操作步骤如下:

(1)获取外植体及预处理:选取健壮无病虫害的百香果植株,截取3-5cm的茎段,用温水清洗3-5次后,在放入含有酒精和壳寡糖的消毒液中浸泡20-30min,再用清水清洗干净,用灭菌纸将外植体表面的水分吸干;

(2)初代诱导:将消毒灭菌好的百香果外植体横向每0 .2cm-0 .4cm划刀,并用刀片在茎段表面纵向划几刀,然后接种在诱导愈伤组织的培养基上培养获得愈伤组织,所述诱导愈伤组织的培养基配方为:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0mg/L+抗坏血酸0.5mg/L+海藻粉2g/L+蔗糖50g/L+缬氨酸0.5mg/L+叶酸0.2mg/L;

(3)继代培养:当愈伤组织生长至2-3cm后,分割成 2mm-3mm 小块,继续转入继代培养基培养,得继代不定芽;所述继代培养基配方为:MS+细胞分裂素0 .5mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖15g/L+蛋白胨10mg/L+壳寡糖0.5mg/L+腐殖酸0.5g/L;

(4)生根培养:将继代不定芽转移至生根培养基上培养至每苗长出3-5条根;所述生根培养基的配方为:1/4MS+IBA 0 .8mg/L+IAA1 .5mg/L+蜜糖10mg/L+维生素B12 0 .5mg/L+柠檬酸0 .5mg/L;

(5)壮芽培养:将生根的幼苗转至壮芽培养基进行壮芽培养7-10d,所述壮芽培养基的配方为:MS+6-BA0 .5mg/L+ZT0 .5mg/L+NAA0 .2mg/L+蔗糖30g/L+腐殖酸5mg/L+啤酒酵母2mg/L+氨基酸5mg/L;

(6)炼苗:将壮芽处理后的幼苗,打开瓶口3-5d进行炼苗,取出植株用清水清洗干净后,装入装有育苗基质的育苗杯中,按照常规方法进行苗木管理后即可移栽。

2.根据权利要求1所述百香果快速组培方法,其特征在于:步骤(1)所述的消毒液酒精的浓度为5-10%。

3.根据权利要求1所述百香果快速组培方法,其特征在于:所述消毒液中壳寡糖的使用量为5-10g/L。

4.根据权利要求1所述百香果快速组培方法,其特征在于:步骤(2)的培养条件在温度22±2℃、暗培养、无菌环境下进行。

5.根据权利要求1所述百香果快速组培方法,其特征在于:步骤(3)、(4)、(5)的培养条件是在温度25±2℃、光照强度3000-5000lx、光照时间8-10h/d、无菌环境下进行。

6.根据权利要求1所述百香果快速组培方法,其特征在于:所述育苗基质由塘泥、菌糠、蚓粪、珍珠岩和羊粪。

7.根据权利要求6所述百香果快速组培方法,其特征在于:所述育苗基质中各组分的重量比为:100:10-15:1-3:5-10:3-5。

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