三叶连翘离体培养快速繁殖的方法与流程

文档序号:17917847发布日期:2019-06-14 23:54
三叶连翘离体培养快速繁殖的方法与流程

本发明涉及灌木类植物---连翘的种植,尤其是涉及一种三叶连翘离体培养快速繁殖的方法。



背景技术:

连翘为落叶灌木类,树形优美。连翘早春先叶开花,花期四到五月份,长达2多个月;花朵密生于枝条,花量大,花开时香气淡雅,满枝金黄,非常美观,是早春优良观花灌木。而且,连翘具有较强的适应能力和生存能力,作为一种盆景观赏植物,连翘可以通过盆景爱好者的修剪将其培育成盆景植株。

连翘不但可以是一种盆景观赏植物,而且可以是园林观赏植物。连翘可以种植在学校、花园、屋旁与路边,在溪旁、池畔、假山下也可以种植。因此,连翘的观赏价值十分高,在城市绿化中起到了重要的作用。

连翘生存能力、适应力强,对气候、土壤条件要求不严,在低温、干旱条件下均可生存。连翘既可以生长于半阴半阳或阳光充足的山坡上,也可以在水肥条件差、有机质含量低的沙坡上生存。它的根系十分发达,构成网状结构,扎根于土壤中,固着土壤能力强,同时它的吸水和保水能力强,因此连翘可以防止水土流失,具有很好的保持水土作用。连翘一年三次可以长出新梢,生长速度十分快,可以在三年内基本达到种植地面的完全覆盖,因此,连翘可以在短时间内实现它的生态价值。为了实现可持续发展,可以把连翘成片种植于山顶和贫瘠山坡,作为绿化西部荒山荒地的先锋植物,对于环境的改善和保护具有十分重要的积极作用。

连翘的有性繁殖从种子收集到成苗,期间需经历种子处理、播种、田间管理等操作,需要时间至少一年;至于无性繁殖的扦插、分株等至少需要六个月的时间。这些繁殖方式均存在速度慢,繁殖系数低的缺点。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种三叶连翘离体培养快速繁殖的方法,该方法操作简单,可以有效提高三叶连翘再生成完整植株的效率。

为实现上述目的,本发明可采取下述技术方案:

本发明所述的三叶连翘离体培养快速繁殖的方法,包括下述具体步骤:

第一步,取三叶连翘的幼茎剪成0.5~1.0cm的茎段,依次用水、75%酒精、0.2%氯化汞、无菌水进行冲洗,得到幼茎外植体;

第二步,将处理好的幼茎外植体垂直接种到分化培养基中,放入25℃培养箱中培养28~35天,使幼茎外植体上分化形成一定量的不定芽;其培养条件为:每天采用强度2000LX的光照射16h、黑暗8h;

第三步,将形成不定芽的植株接种到无激素的1/2MS培养基+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂中,放入第二步使用的培养箱中,同样的培养条件下培养15天;

第四步,从第三步的培养箱中取出的连翘植株接种到生根培养基中后再放回该培养箱,同样条件下持续培养28~32天,得到主根粗壮的幼苗;

第五步,将带有幼苗的培养基开盖,室温散光放置2~3天后移栽到栽培料中,28~32天即得到完整植株。

所述第二步所用的分化培养基由MS培养基+苄基腺嘌呤3.0mg/L+萘乙酸0.2mg/L+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂组成。

所述第四步所用的生根培养基由1/2MS培养基+吲哚丁酸0.2mg/L+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂组成。

所述第五步所用的栽培料由沙土和珍珠岩按6:1之重量份拌和而成。

本发明的优点在于操作方法简单,培养时间短,仅需三个月左右即可培养得到完整的植株,大大缩短了三叶连翘的培养生长周期,可有效提高三叶连翘再生成完整植株的效率。本发明对三叶连翘组织培养的外植材料的取得、外植体不定芽的分化、生根培养、炼苗移栽等的操作给予了具体指导,建立了完备的三叶连翘组织培养体系,具有极强的可实施性和可重复性,能够快速、大量的繁殖三叶连翘,成本低廉,成活率高,对环境绿化和环境保护具有深远意义。

附图说明

图1-图4是幼茎逐步分化形成的不定芽。

图5、图6为生根的情况。

图7为在栽培料中生长的连翘幼苗。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明方法做更加详细的说明,以便于本领域技术人员的理解。

本发明所述的三叶连翘离体培养快速繁殖的方法,包括下述具体步骤:

第一步,材料处理

取三叶连翘的幼茎置于超净工作台上,使用灭过菌的剪刀去掉叶片,并剪成0.5~1.0cm的茎段,在无菌培养皿中用自来水冲洗干净后,先放入75%酒精中消毒0.5min,后转入0.2%氯化汞中消毒4-5min,最后用无菌水冲洗3-4次,得到幼茎外植体;

第二步,幼茎分化形成不定芽

将处理好的幼茎外植体垂直接种到分化培养基(由MS培养基+苄基腺嘌呤3.0mg/L+萘乙酸0.2mg/L+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂组成)中,放入25℃培养箱中培养30天左右,培养条件为:每天采用强度2000LX的光照射16h、黑暗8h;使幼茎外植体上分化形成一定量的不定芽;图1为培养0天的幼茎外植体,图2为培养15天的幼茎外植体,图3为培养30天的幼茎外植体,图4为培养35天的幼茎外植体,从图中可以看出,外植体上分化出的不定芽量逐渐增多;30天出芽率可达655.5%,且叶子呈绿色,叶片大,长势较壮;

第三步,预培养

将形成大量不定芽的植株接种到1/2MS培养基+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂中,放入第二步使用的培养箱中,在同样的培养条件和方法下培养15天,生根率可达27.78%;

第四步,生根

经过预培养后的植株从培养箱中取出,接种到生根培养基(由1/2MS培养基+吲哚丁酸0.2mg/L+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂组成)中后再放回该培养箱,在同样的培养条件和方法下持续培养30天左右,得到主根粗壮的幼苗;图5是生根培养5天的幼苗,图6是培养15天的幼苗;

第五步,炼苗及移栽

将带有幼苗的培养基开盖(培养时,培养基成凝胶状,幼苗接种到培养基上并置于带盖的盒体内),室温、散光放置2~3天后移栽到栽培料(由沙土和珍珠岩粉按6:1之重量份拌和而成)中,30天左右即得到完整的连翘植株,如图7所示。

再多了解一些
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