本发明涉及抑菌剂，具体涉及一种茶多酚锌抑菌剂的制备方法。
背景技术：
：茶多酚是茶叶中一类多羟基酚类化合物的总称，已被广泛用于医药、日化、食品等行业用作杀菌剂、防腐剂、保鲜剂等。然而，由于茶多酚分子结构中含有大量的酚羟基，性质非常活跃，结构很不稳定，导致茶多酚的制备条件要求高，从而导致生产成本高。不仅如此，茶多酚在贮藏过程中极易发生变化而导致其抑菌性能降低。因此，如何提高抑菌活性、降低生产成本是目前茶多酚应用中急需解决的难题。目前已发现植物的很多成分可以与金属元素形成配合物，且形成的金属配合物比原化合物生物活性更强。将金属离子与茶多酚在一定条件下进行反应可形成稳定的茶多酚金属配合物，例如cn102503964a报道了一种茶多酚金属配合物的制备工艺，它是以茶叶为原料，先对茶叶进行水浴浸提制备茶汤，然后向茶汤中加入水溶性金属盐反应制成。但是目前还没有将金属离子与茶多酚反应制备抑菌剂的报导。锌是人体必需的微量元素，是人体六大酶类、200种金属酶的组成成分或辅酶，对全身代谢起着重要作用。锌离子已被证实具有一定的抗菌活性，它通过使病原菌的蛋白质变性，破坏细菌细胞合成酶的活性，从而使细菌丧失分裂增殖能力而死亡。因此将茶多酚与金属锌离子配合形成茶多酚锌配合物，不仅可提高茶多酚的稳定性，而且还有可能会增强茶多酚的抑菌活性。我国夏秋茶资源丰富，据调查夏秋茶鲜叶产量占全年茶叶总产量的40％以上；然而，由于夏秋茶鲜叶质量不高，实际利用的不到三分之一，导致夏秋茶资源的大量闲置与浪费。本发明利用夏秋茶鲜叶为原料直接制备茶多酚锌抑菌剂，不仅可以降低生产成本，节约能源，避免茶多酚提取制备工艺中有机溶剂的使用，还能充分利用夏秋茶资源，推动茶叶经济的发展，提高茶产业发展水平。技术实现要素：本发明的目的是提供一种茶多酚锌抑菌剂的制备方法，旨在提高茶多酚的抑菌活性和稳定性。为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术措施：一种茶多酚锌抑菌剂的制备方法，包括以下步骤：1)采摘夏秋茶鲜叶，蒸汽杀青2～5min；2)向杀青叶中加入2～5倍重量的蒸馏水，放入打浆机中室温打浆至茶叶变为匀浆，离心得茶汁，用福林酚法检测茶汁中的茶多酚含量；3)向茶汁中加入锌盐，使锌离子与茶多酚的重量比为1：1～4，搅拌均匀后调节溶液ph值至5.5～7，继续搅拌10～40min，离心，收集沉淀，依次用水、无水乙醇和丙酮洗涤，真空冷冻干燥，得粉末状固体，即为茶多酚锌抑菌剂。优选地，所述锌盐为zncl2。优选地，所述锌离子与茶多酚的重量比为1：1.5。优选地，步骤3)中调节溶液ph值至6.5。与现有技术相比，本发明具有以下优势：1)抑菌活性高。通过将锌离子与茶多酚反应生成金属配合物，可大幅提高茶多酚的抑菌活性。试验表明，茶多酚锌配合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率均显著高于茶多酚、对它们的最小抑菌浓度均显著低于茶多酚，说明锌离子与茶多酚反应后产生了协同效应，极大地增强了茶多酚的抑菌活性。2)稳定性好。通过将锌离子与茶多酚反应生成配合物，避免了茶多酚分子结构中不稳定酚羟基的氧化，从而提高了茶多酚的稳定性，延长了储藏期。3)工艺简单，生产成本低。本发明以茶鲜叶为原料，让锌离子直接与杀青打浆所得茶汁中的茶多酚反应，省去了茶多酚制备工序，具有生产效率高、安全无毒、环境友好等优点。4)本发明减少了夏秋茶的资源浪费，推动了茶叶经济的发展，提高了茶产业发展水平。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步描述，但要求保护的范围并不局限于所述。实施例1采摘夏秋茶鲜叶，蒸汽杀青3min；向杀青叶中加入3倍重量的蒸馏水，放入打浆机中室温打浆至茶叶变为匀浆，离心得茶汁，用福林酚法检测茶汁中茶多酚的含量为4.2％；根据茶多酚的含量向茶汁中加入zncl2，使锌离子与茶多酚的重量比为1：1.5，搅拌均匀后调节溶液ph值至6.5，继续搅拌20min后离心，收集沉淀，依次用水、无水乙醇和丙酮洗涤，真空冷冻干燥，得粉末状固体，即为茶多酚锌抑菌剂，得率为53.1％。实施例2采摘夏秋茶鲜叶，蒸汽杀青5min；向杀青叶中加入2倍重量的蒸馏水，放入打浆机中室温打浆至茶叶变为匀浆，离心得茶汁，用福林酚法检测茶汁中茶多酚的含量为4.5％；根据茶多酚的含量向茶汁中加入zncl2，使锌离子与茶多酚的重量比为1：4，搅拌均匀后调节溶液ph值至5.5，继续搅拌30min后离心，收集沉淀，依次用水、无水乙醇和丙酮洗涤，真空冷冻干燥，得粉末状固体，即为茶多酚锌抑菌剂，茶多酚锌得率为32.5％。实施例3采摘夏秋茶鲜叶，蒸汽杀青2min；向杀青叶中加入5倍重量的蒸馏水，放入打浆机中室温打浆至茶叶变为匀浆，离心得茶汁，用福林酚法检测茶汁中茶多酚的含量为3.1％；根据茶多酚的含量向茶汁中加入zncl2，使锌离子与茶多酚的重量比为1：2，搅拌均匀后调节溶液ph值至7，继续搅拌10min后离心，收集沉淀，依次用水、无水乙醇和丙酮洗涤，真空冷冻干燥，得粉末状固体，即为茶多酚锌抑菌剂，茶多酚锌得率为26.3％。实施例4采摘夏秋茶鲜叶，蒸汽杀青3min；向杀青叶中加入4倍重量的蒸馏水，放入打浆机中室温打浆至茶叶变为匀浆，离心得茶汁，用福林酚法检测茶汁中茶多酚的含量为3.7％；根据茶多酚的含量向茶汁中加入zncl2，使锌离子与茶多酚的重量比为1：1，搅拌均匀后调节溶液ph值至6.0，继续搅拌15min后离心，收集沉淀，依次用水、无水乙醇和丙酮洗涤，真空冷冻干燥，得粉末状固体，即为茶多酚锌抑菌剂，茶多酚锌得率为44.6％。试验例1.对大肠杆菌的抑菌率抑菌剂对大肠杆菌的抑菌性能测定：分别准确称取0.02g茶多酚锌与茶多酚，紫外杀菌30min，超声溶于无菌水中，并采用倍半稀释法依次稀释为系列梯度的样品溶液。取对数生长期的大肠杆菌菌液1.0ml，依次接种于10.0ml上述不同浓度的溶液中，置于37℃、180r/min的摇床中振荡培养24h，平板计数，重复3次，观察细菌生长情况，并计算它们对大肠杆菌的抑菌率和最小抑菌浓度(mic)，结果见表1。表1对大肠杆菌的抑菌率和最小抑菌浓度浓度(mg/ml)茶多酚(％)茶多酚锌(％)0.0329.1296.820.0652.9199.12mic1.0000.125由表1结果可知，茶多酚与茶多酚锌对大肠杆菌都有抑制作用，且抑菌率随浓度增加而增加；但茶多酚锌的抑菌活性显著高于茶多酚，这说明茶多酚与锌离子反应生成配合物后显著增强了茶多酚的抑菌活性，茶多酚锌配合物具有更强的抑菌活性。2.对金黄色葡萄球菌的抑菌率抑菌剂对金黄色葡萄球菌的抑菌性能测定：分别准确称取0.02g茶多酚锌与茶多酚，紫外杀菌30min，超声溶于无菌水中，并采用倍半稀释法依次稀释为系列梯度的样品溶液。取对数生长期的金黄色葡萄球菌菌液1.0ml，依次接种于10.0ml上述不同浓度的溶液中，置于37℃、180r/min的摇床中振荡培养24h，平板计数，重复3次，观察细菌生长情况，并计算它们对金黄色葡萄球菌的抑菌率和最小抑菌浓度(mic)，结果见表2。表2对金黄色葡萄球菌的抑菌率和最小抑菌浓度浓度(mg/ml)茶多酚(％)茶多酚锌(％)0.0116.5480.200.0329.4695.61mic0.40.1由表1结果可知，茶多酚与茶多酚锌对金黄色葡萄球菌都有抑制作用，且抑菌率随浓度增加而增加；但茶多酚锌的抑菌活性显著高于茶多酚，这说明茶多酚与锌离子反应生成配合物后显著增强了茶多酚的抑菌活性，茶多酚锌配合物具有更强的抑菌活性。当前第1页12