一种微小种子的培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种种子的培养方法，具体涉及一种微小种子的培养方法，属于植物培养技术领域。
【背景技术】
[0002]目前，微小种子(如拟南芥种子)的培养方式主要采用泥炭和蛭石的混合营养介质与营养液培养两种方式，其中，液体培养是常见的栽培方式。但是液体培养的方法存在严重的不足，其最大的特点是不能直接液体培养，需要在固体培养基上或土壤基质中培养一定的时间，然后转入液体培养基中。这直接增加了微小种子的液体培养难度，同时在幼苗的转移过程中造成严重的伤害。如果能直接在种子萌发2-3天内移入液体培养装置中，就克服了传统技术的缺陷，提高工作效率和成苗率，尤其是微小种子，如拟南芥、芝麻等种子。
[0003]因此，为解决上述技术问题，确有必要提供一种创新的微小种子的培养方法，以克服现有技术中的所述缺陷。
【发明内容】
[0004]为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种操作方便，出苗率高，且幼苗健壮的微小种子的培养方法。
[0005]为实现上述第一目的，本发明米取的技术方案为:一种微小种子的培养方法，其包括如下步骤:
I )，微小种子用NaClO消毒，再用蒸馏水种子冲洗3-5遍，放入冰箱冷藏2天；
2)，先用标签纸将培养管顶部的洞口堵住，将培养管倒置在桌面上，用移液器将已经加热溶解的0.8%的琼脂加入到培养管上，静置片刻待其凝固；
3)，在培养皿中加入已经加热溶解的0.48%的琼脂至0.4 cm高，静置片刻待其凝固；
4)，将已经凝固了的培养管顶部的标签纸撕去，在每个培养管的顶部用镊子点上2-3粒种子；
5)，将带有种子的培养管插入到含有琼脂的培养皿中，紧密排列，用封口膜将培养皿密封好，放入正常的光周期下于温室中培养3天，等待种子发芽；
6)，将发芽的培养管插入具有孔的支撑板上，放入装有培养液的培养容器中。
[0006]本发明的微小种子的培养方法进一步为:所述微小种子为拟南芥种子。
[0007]本发明的微小种子的培养方法进一步为:所述步骤I)中，NaClO的浓度为5%，消毒时间 5-10 min。
[0008]本发明的微小种子的培养方法进一步为:所述步骤5)中，所述温室的室温为23°C, 16小时光照，8小时黑暗。
[0009]本发明的微小种子的培养方法还为:所述步骤6)中，所述培养液包含KNO3 (浓度为:5mM)，KH2PO4 (浓度为:ImM)，MgSO4 (浓度为:ImM)，Ca (NO3) 2.4H20 (浓度为:1.5 mM)，NH4Cl (浓度为:lmM)，Fe-EDTA (浓度为:50μΜ)，H3BO3 (浓度为:50μΜ)，MnSO4.5Η20(浓度为:ΙΟμΜ)，CuSO4.5Η20 (浓度为:0.32μΜ)，ZnSO4.7Η20 (浓度为:0.77μΜ)，Na2MoO4.2Η20 (浓度为:0.58μΜ)，NH4VO3 (浓度为:0.25μΜ)。
[0010]与现有技术相比，本发明具有如下有益效果:本发明的微小种子的培养方法具有操作方便，出苗率高，且幼苗健壮等诸多优点。
【附图说明】
[0011]图1为拟南芥种子萌发后，采用正常培养液(CK)和采用缺镁培养液(MD)进行培养，叶片鲜重对比图。
[0012]图2为拟南芥种子萌发后，采用正常培养液(CK)和采用缺镁培养液(MD)进行培养，根鲜重对比图。
【具体实施方式】
[0013]本发明为一种微小种子的培养方法，其包括如下步骤:
1)，微小种子用NaC1消毒，再用蒸馏水种子冲洗3-5遍，放入冰箱冷藏2天；其中，所述微小种子为拟南芥种子；NaC10的浓度为5%，消毒时间5-10 min ；
2)，先用标签纸将培养管顶部的洞口堵住，将培养管倒置在桌面上，用移液枪将已经加热溶解的0.48%的琼脂加入到培养管上，静置片刻待其凝固；
3)，在培养皿中加入已经加热溶解的0.48 %的琼脂至0.4 cm高，静置片刻待其凝固；
4)，将已经凝固了的培养管顶部的标签纸撕去，在每个培养管的顶部用镊子点上2-3粒种子；
5)，将带有种子的培养管插入到含有琼脂的培养皿中排列紧密，用封口膜将培养皿密封好，放入正常的光周期下于温室中培养3天，等待种子出芽；其中，所述温室的室温为23°C，其能提供16小时光照，8小时黑暗。
[0014]6)，将出芽了的培养管插入具有孔的支撑板上，放入装有培养液的培养容器中；所述培养液包含KNO3 (浓度为:5mM)，ΚΗ2Ρ04(浓度为MgSO4 (浓度为
Ca (NO3) 2.4Η20 (浓度为:1.5 mM)，NH4Cl (浓度为:ImM)，Fe-EDTA (浓度为:50μΜ)，H3BO3 (浓度为:50μΜ)，MnSO4.5Η20(浓度为:10μΜ)，CuSO4.5Η20 (浓度为:0.32μΜ)，ZnSO4.7Η20 (浓度为:0.77μΜ)，Na2MoO4.2Η20(浓度为:0.58μΜ)，NH4VO3 (浓度为:0.25μΜ)。
[0015]其中，步骤6中，在拟南芥种子萌发后，在PH: 5.8，光照:16小时光照，8小时黑暗，光强:4000Lux，湿度:60%的条件下，采用上述培养液(CK)和采用缺镁培养液(MD)进行培养，叶片鲜重对比、根鲜重对比如附图1和附图2所示。
[0016]以上的【具体实施方式】仅为本创作的较佳实施例，并不用以限制本创作，凡在本创作的精神及原则之内所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本创作的保护范围之内。
【主权项】
1.一种微小种子的培养方法，其特征在于:包括如下步骤: I )，微小种子用NaC1消毒，再用蒸馏水种子冲洗3-5遍，放入冰箱冷藏2天； 2)，先用标签纸将培养管顶部的洞口堵住，将培养管倒置在桌面上，用移液器将已经加热溶解的0.8%的琼脂加入到培养管上，静置片刻待其凝固； 3)，在培养皿中加入已经加热溶解的0.48%的琼脂至0.4 cm高，静置片刻待其凝固； 4)，将已经凝固了的培养管顶部的标签纸撕去，在每个培养管的顶部用镊子点上2-3粒种子； 5)，将带有种子的培养管插入到含有琼脂的培养皿中，紧密排列，用封口膜将培养皿密封好，放入正常的光周期下于温室中培养3天，等待种子发芽； 6 )，将发芽的培养管插入具有孔的支撑板上，放入装有培养液的培养容器中。
2.如权利要求1所述微小种子的培养方法，其特征在于:所述微小种子为拟南芥种子。
3.如权利要求1所述微小种子的培养方法，其特征在于:所述步骤I)中，NaClO的浓度为5%，消毒时间5-10 min0
4.如权利要求1所述微小种子的培养方法，其特征在于:所述步骤5)中，所述温室的室温为23°C，16小时光照，8小时黑暗。
5.如权利要求1所述微小种子的培养方法，其特征在于:所述步骤6)中，所述培养液包含 KNO3 (浓度为:5mM)，KH2PO4 (浓度为:ImM)，MgSO4 (浓度为:ImM)，Ca (NO3) 2.4H20 (浓度为:1.5 mM)，NH4Cl (浓度为:lmM)，Fe-EDTA (浓度为:50μΜ)，H3BO3 (浓度为:50μΜ)，MnSO4.5Η20(浓度为:10μΜ)，CuSO4.5Η20 (浓度为:0.32μΜ)，ZnSO4.7Η20 (浓度为:0.77μΜ)，Na2MoO4.2H2O (浓度为:0.58μΜ)，NH4VO3 (浓度为:0.25μΜ)。
【专利摘要】本发明涉及一种微小种子的培养方法，包括如下步骤：微小种子用NaClO消毒，再用蒸馏水冲洗，放入冰箱冷藏2天；用标签纸将培养管顶部的洞口堵住，将培养管倒置在桌面上，用移液器将已经加热溶解的0.48%的琼脂加入到培养管中，静置片刻待其凝固；在培养皿中加入已经加热溶解的0.48%的琼脂至0.4cm高，静置片刻待其凝固；将已经凝固了的培养管顶部的标签纸揭去，在每个培养管的顶部用镊子点上微小种子；将带有种子的培养管插入到装有琼脂的培养皿中，用封口膜将培养皿密封好，放入温室中发芽3天，种子发芽后；将发芽的培养管插入支撑板上，放入装有培养液的培养盒中。发明具有操作方便，出苗率高，且幼苗健壮等诸多优点。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104542304
【申请号】CN201510047183
【发明人】郭万里, 盛翊佳, 丁亚文, 傅媛烨
【申请人】浙江理工大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月30日