深海扇贝与栉孔扇贝的种间杂交与增养殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及海产品养殖方法，特别是深海扇贝的杂交养殖方法。
【背景技术】
[0002] 我国北方海域养殖的大型扇贝目前只有虾夷扇贝一种。虾夷扇贝由于个体大，味 道鲜美，成为目前高档酒店消费的主要扇贝品种，深受市场欢迎。近年来，虾夷扇贝养殖中 较高的死亡率使得产品的供应不够稳定，虾夷扇贝的不规则的可边缘使其容易失去水分， 因而货架寿命短，而且单一的品种不能满足市场的多样化需求。因此，扇贝养殖业需要更多 口味上佳、货架寿命长和供应稳定的大规格扇贝来支撑其持续发展。
[0003] 大西洋深海扇贝是产于美国和加拿大北大西洋沿 岸的大型扇贝，凭借其极佳的味道和完美的形态(大小、形状和色泽）而成为大西洋海域养 殖扇贝的最佳选择之一。因贝壳边缘十分光滑，所以其货架寿命长，而且其温度适应范围大 体上与我国大连海域的水温条件相近。因此，这种扇贝可能适合于在我国大连海域养殖，但 养殖方法尚属空白。
[0004] 近年来，大海海域的养殖扇贝接连遭遇大规模的死亡现象，使扇贝养殖业对新品 种的要求更加迫切。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是克服是上述不足问题，提供一种深海扇贝与栉孔扇贝的种间杂交 与增养殖方法，方法简单，成活率高，生长快，产品的品质优良。
[0006] 本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：深海扇贝与栉孔扇贝的种间杂交与 增养殖方法，包括亲贝、产卵和杂交、扇贝的养成，具体如下： 第一步、亲贝： 选用深海扇贝和栉孔扇贝，分别将两种扇贝的雌雄分开，按常规亲贝培育方法促熟，使 其达到同步成熟后，用于杂交试验； 第二步、产卵和杂交： 分别将两种扇贝的雌雄群体催产，将获得的卵子分别用同种的或异种的精子受精，获 得深海扇贝和栉孔扇贝的纯种自交后代，以及深海扇贝早X栉孔扇贝$、栉孔扇贝早X深 海扇贝6两种杂交受精卵；将所获得的受精卵在13-14°C孵化，在出现D型幼虫后定时观察 测定D型幼虫的比例，达到最大孵化率； 第三步、扇贝的养成： 在幼虫期，杂交扇贝的平均壳高生长速度为6-6. 3 m/天，在养成期的壳高、壳长、壳 宽和体重的生长。其杂交苗种主要用于浮筏养殖，次年4-5月份笼养成，一般养成周期为 10-12个月，达到商品规格7cm以上，养殖水温从低温5-6 °C--高温23-25 °C--低温 0-1 °C过程。
[0007] 所述第一步、亲贝：深海扇贝的亲贝方法如下： 株海扇贝的引种： 深海扇贝种贝引进放入隔离场暂养30天，经检验检疫合格后暂时挂养于海区； 深海扇贝的人工育苗和养殖： (1) 亲贝促熟： 将雌雄亲贝分开，分别放在不同的池中进行促熟，培育过程中使用未经加热的过滤海 水，亲贝开始促熟培育时自然水温约为3. 5-4. 5°C，在催产孵化以前，促熟培育水温逐步自 然升高至9-ll°C，亲贝经45-50天的促熟达到成熟， 亲贝促熟期间喂食单胞藻饵料，单胞藻饵料选自下述中的一种或多种：新月菱形藻，三 角褐指藻，牟氏角毛藻；叉鞭金藻，巴福藻；亚心形扁藻； (2) 产卵和孵化： 亲贝经促熟达到成熟后，进行产卵，催产时先阴干20-25分钟，然后放到12-14°C的水 中，雄性亲贝在处理后45-50分钟、雌性60-65分钟后均大量排放，表明促熟效果很好；雌 贝产卵移走亲贝后向池中加入适量精液并搅动，直至在显微镜下观察卵膜周围可见5-6个 精子；稍后测定的受精率接近100% ;水温在14-15度进行孵化，在受精后24-26小时首次 观察到膜内旋转，45-47小时开始出现D形幼虫，D形幼虫最初的平均规格为88. 9±3. 7 ym (N=30)，受精后约48-50小时，当大部分幼虫都发育到D形幼虫后，用筛絹网箱将幼虫选优 到新池中培育； (3) 幼虫培育： 在幼虫培育期间每日倒池换水一次，培育水温范围为14-15. 6°C;培育第3天到第16天 每日投喂1-3次金藻混合饵料，投喂量0. 5-3L/m3,第17-29日投喂3. 5~5 L/m3,混合单胞藻 饵料的平均密度为4 X IO6细胞/mL ; (4) 幼虫生长： 培育的幼虫生长率远高于同期在加拿大魁北克育苗场培育的幼虫，幼虫的平均壳高生 长率为5. 7-6 y m/天，壳长生长率为5. 6-5. 9 y m/天，幼虫在受精后16-17天大部分出现眼 点，第18天投附着基； (5) 附着变态： 将聚乙烯网片附着基投放到眼点幼虫培育池中，网片被裁成30X IOOcm大小（网径 Icm)，在一端绑一块小坠石以保证附着基可垂直漂浮在水中，网线的直径为0. 5_ ;幼虫投 池以后换水时均采用滤鼓虹吸法以保证附着基不会移动，幼虫在6-10天内附着，投附着基 10天后，将附着基取出，挂到海域保苗； (6) 自然海区保苗： 将附着基上的坠石去掉，先放入25-60目的网袋中，每8-15袋一串挂到海区筏架上，在 5月中旬水温15°C情况下，60-70天分苗到30目和18目的网袋中，养殖水深约为3-5米； 稚贝在初夏下海初期的壳长生长速度为35-39 ym/天，以后生长速度大幅度提高， 为壳长90-92 ym/天，在夏季高温期稚贝的平均生长速度略降，为45-48 ym/天，在秋初 然后随着水温的降低，生长速度再次提高，9月初到11月中旬的壳长平均生长速度达到 160-168 y m/天，在整个冬季生长速度均很低，平均为20-25 y m/天； (7) 深海扇贝在养成阶段的生长和存活： 深海扇贝在养成两年后平均规格达到杂交规格。
[0008] 所述第一步中（1)亲贝促熟：单胞藻饵料以250ml烧瓶保存藻种，然后扩种到20L 的大瓶中，最后扩种到5000L的开放水泥池中；在促熟培育的最初6天每日投喂2次，其后 每日投喂4次。
[0009] 所述第一步中（3)幼虫培育：金藻混合饵料是叉鞭金藻和巴福藻混合饵料。
[0010] 所述第一步中（6)自然海区保苗，采用底播方式，苗种暂养规格达到2. 5-3厘米， 10月中旬到12月中旬，向海底投放苗种，播放密度5500-6000枚/亩。
[0011] 所述第一步中（6)自然海区保苗，前期采取筏式养殖一年，扇贝规格达到4-5厘米 时再底播。
[0012] 所述第一步中（7)深海扇贝在养成阶段的生长和存活：深海扇贝在养成第一年壳 高的平均生长速度分别为117. 4 ym/天，第二年则降为98. 8 ym/天，养成两年后平均规格 达到杂交规格。
[0013] 所述第二步、产卵和杂交：两种纯系和深海扇贝早X栉孔扇贝$的孵化比较接 近，均在60-62小时时达到90-95%的最大孵化率，50%受精卵达到D型幼虫期的时间为 60-62小时；而栉孔扇贝早X深海扇贝$在64-66小时时达到75-78%的最大孵化率，50% 受精卵达到D型幼虫期的时间为62-64小时。
[0014] 本发明与同类技术相比，具有显著的优点：由于深海扇贝与栉孔扇贝的染色体数 均为2N=38,因此二者有可能进行种间杂交，培育出具有显著杂种优势的新品种。为此，我们 进行了深海扇贝与栉孔扇贝的种间杂交试验。本发明首次成功的将大西洋深海扇贝引进中 国海域，建立了适合于大西洋深海扇贝的人工促熟、产卵、孵化、幼虫培育及中间保苗的技 术与工艺，并成功进行大西洋深海扇贝规模化育苗；建立了大西洋深海扇贝筏式养殖和底 播增养殖模式，引进改良更新种质，提高苗种培育质量，解决病害及抗逆性差等问题，确保 种源质量和纯度，长期保障苗种繁育优良的供给；杂交育种提供了使深海扇贝快速适应本 发海域条件的有效途径，杂交后代的生长速度比深海扇贝明显提高，已接近虾夷扇贝的生 长速度，通过种间杂交的方法来有效利用深海扇贝这一有利种质资源，扩大扇贝养殖种类， 对稳定产业持续发展，促进渔民增产增收，提高增长方式的转变，推动现代海洋牧场建设。
[0015] 本发明分别采用了筏式养殖和底播增殖两种方法，均获得成功，筏式养殖结果表 明：大西洋深海扇贝能够适应大连海域的自然条件，并能够达到性成熟，前期在本地区的生 长速度与本地品种栉孔扇贝和虾夷扇贝相当，后期生长变缓，养殖三年到扇贝达到8厘米 左右时收获。底播增殖可以使扇贝有效避免夏季高温期的高死亡率，而且扇贝生长较快，壳 型完整美观。筏式养殖和底播增殖相结合，不仅提高养殖速度，而且存活率也有所提高。
【附图说明】
[0016] 图1是幼虫期生长曲线与同期加拿大培育的幼虫生长的比较图。
[0017] 图2是保苗期稚贝的生长曲线图。
[0018] 图3是深海扇贝养成期的壳高生长曲线图。
[0019] 图4是深海扇贝与栉孔扇贝和虾夷扇贝体重增长的比较图。
[0020] 图5是深海扇贝养成期的存活率曲线图。
[0021] 图6是深海扇贝、柿孔扇贝及其正反杂交后代的发育比较曲线图。
[0022] 图7是深海扇贝早X栉孔扇贝$与深海扇贝纯系在幼虫期的生长图。
[0023] 图8是杂交扇贝与同期的深海扇贝生长的比较图；其中（a)为壳重随年度生长曲 线；（b)为壳长随年度生长曲线；（C)为壳宽随年度生长曲线；（d)为总重量随年度生长曲 线。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明并不局限于具体实施 例。
[0025] 实施例1 第一步、亲贝： 深海扇贝的人工育苗和养殖 (1)亲贝促熟： 将雌雄亲贝分开，分别放在不同的池中进行促熟，培育过程中使用未经加热的过滤海 水。亲贝开始促熟培育时自然水温约为4°C。在催产孵化以前，促熟培育水温逐步自然升高 至 11。。。
[0026] 亲贝促熟期间的单胞藻饵料种类主要包括新月菱形藻Nitaschiaclosterium minutissima，三兔截览敷Phaeodactyhmtricornutum，年氏兔毛敷Chaetoceros muelleriDiatomsIsochrysiszhanjianggensis{lSO'),\^.^^Pavlova viridisiVtsS')、金_敷Chrysophyta).,andDunaliellasp?,览心你氣敷PlatymonassMcort/i/hrffiis，5/7/7.(绿藻 。以 250ml 烧瓶保存藻种，然后扩 种到20L的大瓶中，最后扩种到5000L的开放水泥池中。在促熟培育的最初6天每日投喂 2次，其后每日投喂4次。
[0027] (2)产卵和孵化： 亲贝经50天的促熟达到成熟，此时培育水温为11度。催产时先阴干20分钟，然后放到 14°C的水中，雄性亲贝在处理后50