一种多肉植物玉露的组织培养快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物组织培养快速繁殖方法。
【背景技术】
[0002]玉露(Haworthiacooperivar.pilfera Μ.B.Bayer)为龙舌兰目独尾草科(也称日光兰科、芦荟科或阿福花科)十二卷属多肉植物中的软叶系品种，原产于南非，现世界多地可栽培。植株初为单生，以后逐渐呈群生状，肉质叶排列成莲座状，两边圃凸；叶尖呈透明或半透明状，称为“窗”，表面有纵向深色线条，顶端有细小的须，叶色碧绿；松散的总状花序，小花白色，有绿色纵条纹。玉露小巧玲珑，叶片晶莹剔透，如同玉石雕刻而成，奇特而美丽，如同有生命的工艺品，非常可爱，用小盆栽种点缀案头、书桌、窗台等处，清新典雅，是名贵的室内观赏花丼，是近年来人气较旺的小型多肉植物品种之一，受到多肉植物爱好者的追捧，具有良好的市场前景及经济价值。
[0003]玉露常见的繁殖方法有扦插、分株、叶插及播种等几种方法。但对于玉露来说，这些方法繁殖速度较慢，效率较低，并且利用种子播种也不利于保存稀有名贵的品系。而现有的玉露组织培养体系仅有一例，是利用玉露花茎或花茎子房作为外植体诱导丛生芽，材料的获得受到生长周期的限制，不利于投入生产。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题在提供一种玉露的组织培养快速繁殖方法。
[0005]解决上述技术问题所采用的技术方案由下述步骤组成:
[0006]1、外植体的选择与消毒
[0007]以玉露叶片为外植体，将表面清洗干净的玉露叶片在超净工作台上先用质量分数为0.1 %的氯化汞浸泡I分钟，再用质量分数为5 %的次氯酸钠水溶液浸泡5分钟，每次浸泡完后均用无菌水洗涤，得到无菌外植体。
[0008]2、丛生芽的诱导
[0009]将无菌外植体切成0.3?0.6cm的切片，接种于诱导丛生芽培养基中，在25 ± 2°C、光照强度1000?12001ux、光照时间为12?16小时/天、相对湿度50%?60%的环境下培养14?20天，得到丛生芽，其中诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入0.8?1.2mg 6-苄基腺嘌呤、0.8?1.2mg 6-糖基氨基嘌呤、25?30g蔗糖、5.0?6.0g琼脂，用NaOH调节pH值为5.5?6.0。
[0010]3、丛生芽生根
[0011]将丛生芽按3?4个芽为一株分离后直接转入生根培养基中生根培养3?6周，得到带根的完整植株；或者将丛生芽按3?4个芽为一株分离后先转入继代培养基中继代培养4?8周，然后将继代培养后的丛生芽按8?10个芽为一株分离，再转入生根培养基中生根培养3?6周，得到带根的完整植株。
[0012]上述的生根培养和继代培养条件均为:温度25±2°C、光照强度1000?12001ux、光照时间为12?16小时/天、相对湿度50%?60% ;所述的生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入0.08?0.12mg吲哚丁酸、25?30g蔗糖、5.0?6.0g琼脂，用NaOH调节pH值为5.5?6.0 ;所述的继代培养基是以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入0.15?0.25mg 6-苄基腺嘌呤、I?1.5g活性炭、25?30g蔗糖、5.0?6.0g琼脂，用NaOH调节pH值为5.5?6.0。
[0013]4、炼苗与移栽
[0014]将带根的完整植株在25±2°C培养箱内打开组培瓶瓶盖，加入自来水，炼苗I?2天后取出，将根上残留的生根培养基冲洗干净，置于阴凉处风干，移栽至沙性土壤中，遮荫，在温度为15?25 °C、相对湿度为50%?70%下生长。
[0015]上述步骤2中，优选诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入1.0mg 6-苄基腺嘌呤、1.0mg 6-糖基氨基嘌呤、25g蔗糖、5.0g琼脂，用NaOH调节pH值为5.8。
[0016]上述步骤3中，优选生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入0.1mg吲哚丁酸、25g蔗糖、5.0g琼脂，用NaOH调节pH值为5.8 ;优选继代培养基是以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入0.2mg 6-苄基腺嘌呤、Ig活性炭、25g蔗糖、5.0g琼脂，用NaOH调节pH值为5.8。
[0017]本发明利用玉露叶片为外植体，通过对玉露叶片组织培养获得了玉露的组培苗，该方法材料易得，消毒方便，成活率高，生产周期短，提高了玉露的繁殖系数和繁殖速度，并能较好的保持玉露的品系优势，能快速繁殖出大量适合移栽的优良玉露幼苗，满足了生产需求，提高了种植者的经济效益。
【附图说明】
[0018]图1是实施例1得到的丛生芽的照片。
[0019]图2是实施例1得到的带根的完整植株的照片。
[0020]图3是实施例2继代培养后得到的丛生芽的照片。
[0021]图4是实施例2生根培养后得到的带根的完整植株的照片。
【具体实施方式】
[0022]下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明，但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。
[0023]实施例1
[0024]1、外植体的选择与消毒
[0025]选取玉露叶片，用水洗净玉露叶片表面泥土再用流水冲洗5小时，用滤纸吸干水分。在超净工作台上先用质量分数为0.1 %的氯化汞浸泡玉露叶片I分钟，然后用无菌水洗涤3?5次，每次3?5分钟；再将玉露叶片转入质量分数为5%的次氯酸钠水溶液中浸泡5分钟，然后用无菌水洗涤4?6次，每次5?7分钟，得到无菌外植体。
[0026]2、丛生芽的诱导
[0027]将无菌外植体切成0.5cm左右的切片，接种于组培瓶内的诱导丛生芽培养基中，每瓶接种4?6片，在25±2 °C、光照强度lOOOlux、光照时间为14小时/天、相对湿度50%?60%的环境下培养14天，得到丛生芽。其中诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入l.0mg 6-苄基腺嘌呤、1.0mg 6-糖基氨基嘌呤、25g蔗糖、5.0g琼脂，用NaOH调节pH值为5.8。由图1可见，经过14天诱导培养，玉露叶片已经诱导形成丛生芽，且所有叶片上都能分化出10个以上的芽。
[0028]3、丛生芽生根
[0029]将丛生芽按3?4个芽为一株分离后转入组培瓶内的生根培养基中，每瓶3?4株，在温度25±2°C、光照强度lOOOlux、光照时间为14小时/天、相对湿度50%?60%的环境下培养3周，得到带根的完整植株。其中生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入0.1Omg吲哚丁酸、