新型植物病害抗生剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于应用生物发酵工程技术和生化工程技术的现代中药制造技术领域，特 别涉及以中药材为原料的新型植物病害抗生剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 新型植物病害抗生剂具有安全、高效、快速的特点，还具有能同时抗杀多种引起植 物病害的真菌、细菌和病毒等致病微生物的功能。可广泛用于抗杀植物组织培养，细胞培 养和大棚栽培经济价值高的中药材和反季果蔬的植物病害。它优于目前在组织培养，细胞 培养和大棚中使用的抗菌农药与制剂。且杀菌功效也优于目前广泛使用的用于植物组织培 养，细胞培养及美国PPM抗杀剂产品。
[0003] 新型植物病害抗生剂具有以下的优势：①用量小；②对植物外植体、愈伤组织和 细胞的损伤小；③无残留。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种新型植物病害抗生剂及制备方法。以求用该抗生剂替代 市场上现有的用于植物抗菌素，来抗杀引起植物病害的真菌、细菌和病毒等致病微生物，并 对植物细胞工程培养中的外植体和细胞以及大棚中的作物幼苗和外植体均无危害作用。
[0005] 本发明的具体工艺制备步骤是这样的：
[0006] 步骤一，先将清洗好的主原料三七、龙胆草、银柴胡分别放入蒸煮器里浸泡、煮沸， 之后将三种所得药液经过滤、灭菌后按1 : 4 : 2重量比例混合均匀制成培养液，然后在培 养液中按特定"容积/重量"配比加入（NH4)2HPCV KH2P04、1^047!120、恥(：1、？650 47!120、蔗糖 和葡萄糖；再将培养液进行接种培养发酵，从而产生能杀灭致病微生物的核心抗生液，再对 该抗生液进行灭菌处理获得主原料提取液一"生物发酵抗生液"；
[0007] 生物发酵抗生液的发酵菌种为："米曲霉Aspergillus oryzae"。
[0008] 在该步骤所述的接种培养发酵操作中，每1000ml培养液加入（NH4) 2HPO4O. 5g~ lg，KH2PO4O. 3g ~0· 8g，MgSO40.0 3g ~0· 08g，NaClO. 5g ~I. 5g，FeSO40.0 2g ~0· 05g，蔗糖 2g~6g和葡萄糖(λ 5g~L 5g ;培养温度30±1°C，培养时间7~14天。
[0009] 步骤二，将清洗好的辅原料苦参、大黄、升麻、蒲公英，分别放入蒸煮器里浸泡、煮 沸，之后过滤、灭菌处理获得四种辅料提取液。
[0010] 步骤三，将步骤一和步骤二所获得的生物发酵抗生液、苦参、大黄、升麻、蒲公英提 取液按3:2:2:I:1的重量配比混合均匀。
[0011] 由上述制备方法制成的"新型植物病害抗生剂"，是以中药材为原料，应用生物发 酵工程技术及生化工程技术制备的一种多功效植物病害抗生剂，能同时有效抗杀引起植物 病害的真菌、细菌和病毒等致病微生物，且对植物细胞工程培养中的外植体和细胞以及大 棚中的作物幼苗和外植体的生长均无危害作用，安全可靠。而且无论在生产及使用过程中， 均无污染物产生。是目前在组织培养和细胞培养中广泛使用的同类药物制剂的理想替代产 品。
[0012] 本发明具有效果好，无毒副作用的特点。能安全、高效、快速、广泛地杀灭由致病微 生物引起的植物、中药材、反季果蔬的植物病害，是国家社会种植业急需的新型植物病害抗 生剂产品，市场前景非常广阔。
【附图说明】
[0013] 图1为本发明实施例的工艺流程图
【具体实施方式】
[0014] 下面结合附图对本发明的实施例进行说明：
[0015] 参考附图1，在本发明实施例中，首先将主原料三七、龙胆草、银柴胡分别洗涤、浸 泡24小时后，放入蒸煮器里按10 %的原材料加入90 %的纯净水煮沸，之后将三种所得药 液经过滤、灭菌后按1 : 4 : 2重量比例混合均匀制成培养液，然后在每1000 ml培养液中 加入（NH4)2HPO 4O. 8g，KH2PO4O. 5g，MgSO40.0 5g，NaCl lg，FeSO40.0 3g，蔗糖 3g 和葡萄糖 lg。 分装在5瓶500ml三角瓶中，每瓶200ml。高压灭菌，冷却后，再接种"米曲霉Aspergillus oryzae"并培养发酵，培养温度30±1°C，培养时间12天。从而产生能杀灭致病微生物的核 心抗生液，再对该抗生液进行灭菌处理获得主原料提取液一"生物发酵抗生液"；
[0016] 然后，将辅原料苦参、大黄、升麻、蒲公英分别洗涤、浸泡24小时，放入蒸煮器里浸 泡、煮沸，之后过滤、灭菌处理获得四种辅料提取液。最后，再将所获得的生物发酵抗生液、 苦参、大黄、升麻、蒲公英提取液按3 : 2 : 2 : I : 1的重量配比混合均匀，灭菌后获得新 型植物病害抗生剂。
[0017] 本发明的实施例是应用生物发酵工程技术及生化工程技术汲取三七、龙胆草、银 柴胡、苦参、大黄、升麻、蒲公英等中药原料中的有效成分，所配制成的这种多功效新型植物 病害抗生剂，能同时有效抗杀引起植物病害的真菌、细菌和病毒等致病微生物，但对植物细 胞工程培养中的外植体和细胞以及大棚中的作物幼苗和外植体均无危害作用。对由致病微 生物引起的植物、中药材、反季果蔬的植物病害，能安全、高效、快速、广泛地予以杀灭，是当 前种植业急需的新抗生剂产品，也是目前在组织培养和细胞培养中广泛使用的同类药物制 剂的理想替代产品。
[0018] 本发明的实施例已经用于植物组培和细胞培养，如豆科植物、兰科植物、木兰科植 物和桦木科类植物等的植物病害处理。用于三七，铁皮石斛，反季黄瓜，西红柿，彩椒等反季 果蔬及名贵中药材等。
[0019] 以下是三个具体应用案例：
[0020] 1.种子消毒
[0021] 植物种子消毒采用双因素处理，浓度梯度为1%，2%，3%，时间采用分别消毒 3min，5min，8min，12min，20min寻找最优消毒浓度及时间。该药现配现用，需用无菌水配，每 次种子消毒后都要用无菌水浸泡洗涤三次，不要使抗生剂残留。种子消毒标准既要彻底，又 不影响其发芽率，只有看种子萌发后是否染菌，才能辨别。
[0022] 具体设计表格如下：
[0023]
【主权项】
1. 新型植物病害抗生剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤： 步骤一，先将清洗好的主原料三七、龙胆草、银柴胡分别放入蒸煮器里浸泡、煮沸，之后 将三种所得药液经过滤、灭菌后按规定的重量比例混合均匀制成培养液，然后在培养液中 按特定"容积/重量"配比加入（NH4)2HP04、KH2P04、MgS04、NaCl、FeS04、蔗糖和葡萄糖；并将 培养液进行接种培养发酵，从而产生能杀灭致病微生物的核心抗菌液，再对该抗菌液进行 灭菌处理获得主原料提取液一"生物发酵抗生液"； 步骤二，将清洗好的辅原料苦参、大黄、升麻、蒲公英，分别放入蒸煮器里浸泡、煮沸，之 后过滤、灭菌处理获得四种辅料提取液； 步骤三，将步骤一和步骤二所获得的主、辅原料提取液按重量配比混合均匀。
2. 根据权利要求1所述的新型植物病害抗生剂制备方法，其特征在于：步骤一所述制 成培养液的三七、龙胆草、银柴胡三种提取液按重量混合比例为三七1份、龙胆草4份、银柴 胡2份。
3. 根据权利要求1所述的新型植物病害抗生剂制备方法，其特征在于：在步骤一接种 培养发酵操作中，每1000 ml培养液加入（NH4)2HPO4 0. 5g~lg，KH2PO4 0. 3g~0. 8g，MgSO4 0? 03g~0? 08g，NaCl0? 5g~I. 5g，FeSO4 0? 02g~0? 05g，鹿糖 2g~6g和葡萄糖 0? 5g~ I. 5g;培养温度30±I°C，培养时间7~14天。
4. 根据权利要求1所述制备方法制成的新型植物病害抗生剂，其特征在于，该抗生剂 由下列原料按重量配比混合制成：生物发酵抗生液3份、苦参提取液2份、大黄提取液2份、 升麻提取液1份、蒲公英提取液1份。
5. 根据权利要求4所述的新型植物病害抗生剂，其特征在于：生物发酵抗生液的发酵 菌种为："米曲霉Aspergillusoryzae"。
【专利摘要】新型植物病害抗生剂及其制备方法，是应用生物发酵工程技术及生化工程技术汲取三七、龙胆草、银柴胡、苦参、大黄、升麻、蒲公英等中药原料中的有效成分，并按特定工艺和配方配制成的一种新型多功效植物病害抗生剂。该抗生剂能同时有效抗杀引起植物病害的真菌、细菌和病毒等致病微生物，但对植物组织培养、细胞工程培养中的外植体和细胞以及大棚中的作物幼苗和外植体的生长均无危害作用。而且无论在生产还是使用过程中，均无污染物产生。是目前在组织培养和细胞培养中广泛使用的同类药物制剂的理想替代产品。本发明具有效果好，无毒副作用的特点。能安全、高效、快速、广泛地杀灭由致病微生物引起的植物、中药材、反季果蔬的植物病害，是国家社会种植业急需的新型植物病害抗生剂产品，市场前景非常广阔。
【IPC分类】A01P1-00, A01P3-00, A01N65-32
【公开号】CN104782675
【申请号】CN201510116696
【发明人】周应揆, 周汝敏, 周礞, 周诺
【申请人】云南明侍达生物科技有限责任公司
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年3月18日