一种重口裂腹鱼精液保存方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及鱼类繁殖技术，属于水产养殖技术领域，具体涉及重口裂腹鱼精液保存方法。
【背景技术】
[0002]重口裂腹鱼(Schizothorax (Racoma) davidi)属鲤形目，鲤科，裂腹鱼亚科，裂腹鱼属，裂尻鱼亚属。俗称:雅鱼、重口、重口细鳞鱼、重唇细鳞鱼、细甲鱼。英文名:David’ sschizothoracin。分布于长江干支流中，尤以嘉陵江、眠江、拕江水系的峡谷河流中见多。此种鱼肉质肥美，富含脂肪。生长较快，个体也较大，一般可长至1-3公斤，最大个体可达10公斤。产量丰富，在产区的产量仅次于齐口裂腹鱼。在雅安一带，与齐口裂腹鱼统称“雅鱼”，与齐口裂腹鱼同以“雅安砂锅鱼头”而闻名四方。除肉可食用外，其卵虽有毒，煮熟后也可食。系长江上游各支流水系中重要的经济鱼类，也是当地发展中小型水体养殖业的放养对象。鱼类精液的超低温冷冻保存方法已经基本成熟，但是种属差异明显存在，在涉及重口裂腹鱼的精液保存领域中并没有这方面的报道。
【发明内容】
[0003]本发明主要解决的技术问题是提供一种重口裂腹鱼精液保存方法。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是:提供一种重口裂腹鱼精液保存方法，包括以下步骤:
[0005](I)精液采集:采集成熟度好的重口裂腹鱼精液，存放于5°C洁净的环境下备用；
[0006](2)稀释液配制:配制含重量比链霉素0.1%, NaCl 0.75%, KCl 0.32%、葡萄糖
2.1 %、蔗糖0.5 %、柠檬酸钠0.6 %、谷氨酸钠0.8%的水溶液，调节pH值为6.6 ；
[0007](3)精液稀释:将上述精液和稀释液以1: 5稀释比例混合稀释后，添加抗冻剂至终浓度为5%，并放于5°C条件下平衡28分钟；
[0008](4)精液冷冻:上述稀释平衡后的精液置于液氮液面上方5厘米处平衡18分钟，然后在液氮面上方I厘米处平衡8分钟后投入液氮保存备用。
[0009]所述精液采集步骤后进行质量检查:肉眼观察正常精液为乳白色，用普通显微镜，在10X40倍下，以清水激活，对平均活率大于80%的精液保存备用，否则，弃之。
[0010]所述的抗冻剂为体积比DMSO 20%、甘油25%、乙二醇35%、DMA 25%的组合物。
[0011]本发明的有益效果是:
[0012](I)提高了重口裂腹鱼镜子利用率以及杂交繁殖受精率；
[0013](2)本发明条件要求低，操作易于实现，适合于规模化养殖繁育。
【具体实施方式】
[0014]下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
[0015]本发明实施例包括:
[0016]实施例
[0017]一种重口裂腹鱼精液保存方法，包括以下步骤:(I)精液采集:采集成熟度好的重口裂腹鱼精液，存放于5°C洁净的环境下备用；
[0018](2)稀释液配制:配制含重量比链霉素0.1%, NaCl 0.75%, KCl 0.32%、葡萄糖
2.1 %、蔗糖0.5 %、柠檬酸钠0.6 %、谷氨酸钠0.8%的水溶液，调节pH值为6.6 ；
[0019](3)精液稀释:将上述精液和稀释液以1: 5稀释比例混合稀释后，添加抗冻剂至终浓度为5%，并放于5°C条件下平衡28分钟；
[0020](4)精液冷冻:上述稀释平衡后的精液置于液氮液面上方5厘米处平衡18分钟，然后在液氮面上方I厘米处平衡8分钟后投入液氮保存备用。
[0021]所述精液采集步骤后进行质量检查:肉眼观察正常精液为乳白色，用普通显微镜，在10X40倍下，以清水激活，对平均活率大于80%的精液保存备用，否则，弃之。
[0022]所述的抗冻剂为体积比DMSO 20%、甘油25%、乙二醇35%、DMA 25%的组合物。
[0023]利用本发明保存的重口裂腹鱼精液受精，在原肠中期受精率可达55%，高于目前市场22%左右。
[0024]以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【主权项】
1.一种重口裂腹鱼精液保存方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)精液采集:采集成熟度好的重口裂腹鱼精液，存放于5°c洁净的环境下备用；(2)稀释液配制:配制含重量比链霉素0.1 %、NaCl 0.75%, KCl 0.32%、葡萄糖2.1 %、蔗糖0.5 %、柠檬酸钠0.6 %、谷氨酸钠0.8%的水溶液，调节pH值为6.6 ； (3)精液稀释:将上述精液和稀释液以1: 5稀释比例混合稀释后，添加抗冻剂至终浓度为5%，并放于5°C条件下平衡28分钟； (4)精液冷冻:上述稀释平衡后的精液置于液氮液面上方5厘米处平衡18分钟，然后在液氮面上方I厘米处平衡8分钟后投入液氮保存备用。
2.根据权利要求1所述的重口裂腹鱼精液保存方法，其特征在于: 所述精液采集步骤后进行质量检查:肉眼观察正常精液为乳白色，用普通显微镜，在10 X 40倍下，以清水激活，对平均活率大于80 %的精液保存备用，否则，弃之。
3.根据权利要求1或2所述的重口裂腹鱼精液保存方法，其特征在于:所述的抗冻剂为体积比DMSO 20%、甘油25%、乙二醇35%、DMA 25%的组合物。
【专利摘要】一种重口裂腹鱼精液保存方法，包括以下步骤：精液采集，稀释液配制，精液稀释，精液冷冻的步骤。利用本发明的方法提高了重口裂腹鱼镜子利用率以及杂交繁殖受精率，且条件要求低，操作易于实现，适合于规模化养殖繁育。
【IPC分类】A01N1-02
【公开号】CN104814005
【申请号】CN201510135862
【发明人】谢光玉
【申请人】谢光玉
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年3月26日