一种提高远志中有效成分含量的化学调控方法

文档序号:8516517阅读:819来源:国知局
一种提高远志中有效成分含量的化学调控方法
【技术领域】
[0001] 本发明属药材栽培技术领域,具体涉及一种提高远志中有效成分含量的化学调控 方法。
【背景技术】
[0002] 远志为远志科植物远志(细叶远志)ie/wi/b/ia Willd.或卵叶远志 sibirica L.的干燥根,含有皂苷类(三萜皂苷),fl山酮类和寡糖酯类等成分,具有显著的祛 痰镇咳、抗痴呆和脑保护等活性。随着社会老龄化趋势日益突出,临床对远志的需求量不断 攀升,市场缺口连年增大,但野生远志资源濒危,栽培品生产周期长、产量低、不同产地质量 差异明显,因此,寻找远志高效栽培技术,使其既能提高远志产量,又能提高远志质量,已成 为远志栽培管理的主要目标。

【发明内容】

[0003] 为了克服上述现有技术的不足,本发明的目的是提供一种提高远志中有效成分含 量的化学调控方法,在不改变药用植物原产地、种植方式等情况下,在远志幼苗期采用茉莉 酸甲酯对其叶面进行喷施,一方面发挥茉莉酸甲酯对远志植物体内养分状况的调控作用, 提高药材产量;另一方面发挥茉莉酸甲酯对远志的次生代谢产物的合成和积累的影响作 用,改善药材的质量,具有可调控性、操作简便和高效经济的特点。
[0004] 为了实现上述目的,本发明采用的技术方案是: 一种提高远志中有效成分含量的化学调控方法,包括以下步骤: 1) 大田栽培远志幼苗生长至5-6片真叶时,选取生长状况健康,长势一致的远志幼苗; 2) 采用茉莉酸甲醋(MeJA)进行叶面喷施,喷施浓度为0~2.5 mmol/L,当叶面开始 有液滴滴下时停止喷施,喷施后立刻用薄膜覆盖〇~1 h ; 3) 处理结束后,在喷施后2~10天定期采集全株; 4) 从采集的新鲜植株上剪取根部,经0~100 °C干燥处理,烘至恒重,粉碎,密封保存; 5) 进行远志根部总皂苷、总黄酮、远志_酮III和3, 6'-二芥子酰基蔗糖的含量测定,并 取未喷施的远志样品进行含量的对比。
[0005] 所述的茉莉酸甲醋(MeJA)喷施浓度为0· 01 mmol/L或0· 05 mmol/L或0· I mmol/ L 或 0· 5 mmol/L 或 L 0 mmol/L 或 2. 5 mmol/L
[0006] 所述的步骤3中定期采集全株的时间为0天或2天或4天或6天或8天或10天。
[0007] 所述的薄膜覆盖时间为〇· 5h。
[0008] 所述的干燥温度为70°C。
[0009] 本发明的有益效果是: 经本发明的处理方法处理后,采用低浓度(0. 05 mmol/L) MeJA喷施处理的远志幼 苗与未处理远志幼苗相比,远志根部总皂苷含量升高90. 58% (p〈0. 001),采用低浓度 (0. 01 mmol/L) MeJA喷施处理的远志幼苗与未处理远志幼苗相比,总黄酮含量升高12. 07% (p〈0. 001),远志_酮III含量升高22. 89% (p〈0. 001),3,6' -二芥子酰基蔗糖含量升高 12. 53%(p〈0. 001 ),与传统处理方法相比,有效增加了远志根部总皂苷、总黄酮、远志_酮III 和3, 6' -二芥子酰基蔗糖含量,提高了药材质量,为远志提供了有效的栽培技术方法,具有 可调控性、操作简便和高效经济的优点。
【具体实施方式】
[0010] 以下结合具体实施对本发明作进一步的叙述; 以下实施例仅采用茉莉酸甲酯喷施后第8天为例作以下对比。
[0011] 实施例1 一种提高远志中有效成分含量的化学调控方法,包括以下步骤: 1) 大田栽培远志幼苗生长至5-6片真叶时,选取生长状况健康,长势一致的远志幼苗; 2) 采用0.01 mmol/L外源茉莉酸甲酯(MeJA)进行叶面喷施,当叶面开始有液滴滴下 时停止喷施,喷施后立刻用薄膜覆盖0. 5 h ; 3) 处理结束后,在喷施后第8天采集全株; 4) 将从采集的新鲜植株上剪取根部,经70°C干燥处理,烘至恒重,粉碎,密封保存; 5) 进行远志根部总皂苷、总黄酮、远志_酮III和3, 6'-二芥子酰基蔗糖的含量测定,并 取未喷施的远志样品进行含量的对比。
[0012] ①总皂苷含量测定 吸取适量远志样品溶液,置于10.0 mL具塞试管中,加入0.2 mL 5%香草醛-冰醋酸 试剂(新鲜配置)和0.8 mL高氯酸,摇匀密塞后迅速置于60 °C下显色15 min后,冷水浴中 冷却5 min,最后加入5.0 mL冰醋酸稀释,摇勾密塞,静置15 min后,在585 nm处测定吸光 度。以吸光度为纵坐标,横坐标为对照品浓度(mg/mL ),绘制标准曲线,得远志皂苷元回归 方程为 y=4. 8829χ-0· 0725, r=0. 9999。
[0013] ②总黄酮含量测定 采用Al (NO3)3络合法测定远志根部总黄酮。吸取适量远志样品溶液,置于10.0 mL具 塞试管中,60%甲醇定容至2.0 mL,加入0.5 mL 10% Al (N03) 3,置于40°C下显色10 min后, 60%甲醇定容至6. 0 mL,摇勾,测定400 nm处吸光度。以吸光度为纵坐标,横坐标为对照品 浓度(mg/mL ),绘制标准曲线,得远志卩山酮III回归方程为y=3.7387x+0.0083,r=0.9990。
[0014] ③远志Ii酮III含量测定 用60%甲醇制成浓度为I. 0 mg/mL的远志β山酮III对照品溶液。精密称取0.1 g远志根 部和样品粉末,加入4.0 mL 60%甲醇,超声提取45 min,过滤,60%甲醇定容至4.0 mL,即 得远志样品溶液。色谱条件:流动相:乙腈(0. 03%磷酸)-水(0. 03%磷酸)系统梯度洗脱, 条件为:0-13 min :18% 乙腈;13-28 min :26% 乙腈;28-46 min :32% 乙腈;46-60min :60% 乙 腈;检测波长:320 nm ;流速:0. 8 mL/min ;进样量:10 yL ;柱温:30°C。
[0015] ④3, 6' -二芥子酰基蔗糖含量测定 用60%甲醇制成浓度为I. 0 mg/mL的3, 6'-二芥子酰基蔗糖对照品溶液。精密称取0. 1 g远志根部和样品粉末,加入4.0 mL 60%甲醇,超声提取45 min,过滤,60%甲醇定容至4.0 mL,即得远志样品溶液。色谱条件:流动相:乙腈(0.03%磷酸)-水(0.03%磷酸)系统梯度 洗脱,条件为:〇_13 min :18% 乙腈;13-28 min :26% 乙腈;28-46 min :32% 乙腈;46_60min : 60%乙腈;检测波长:320 nm ;流速:0· 8 mL/min ;进样量:10 μ L ;柱温:30°C。
[0016] 实施例2 一种提高远志中有效成分含量的化学调控方法,包括以下步骤: 1) 大田栽培远志幼苗生长至5-6片真叶时,选取生长状况健康,长势一致的远志幼苗; 2) 采用0.05 mmol/L外源茉莉酸甲酯(MeJA)进行叶面喷施,当叶面开始有液滴滴下 时停止喷施,喷施后立刻用薄膜覆盖0. 5 h ; 3) 处理结束后,在喷施后
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