红细胞保存方法
【专利说明】红细胞保存方法
[0001]本发明要求2012年11月30日提交的美国临时专利申请系列第61/731，944号的优先权，其通过弓I用纳入本文。
[0002]本发明涉及血液保存方法，具体涉及供者的血液(即压积血红细胞(红细胞浓缩物))的保存。
[0003]发明背景
[0004]广泛使用的红细胞保存方法涉及:(例如，采用血楽分离置换法(apheresismethod)，或通过从供给的全血分离)从供者获得红细胞，所述红细胞为压积血红细胞形式(红细胞浓缩物)，并且具有含量减少的血液白细胞；和，后续在1°C?6°C的温度范围内使获得的红细胞浓缩物在塑料袋中IC存42天。例如，该方法目前通过采用Haemonetics公司(美国马萨诸塞州布伦特里)和Terumo BCT公司(美国科罗拉多州雷克伍德)生产的血浆分离置换设备，和用聚氯乙烯和塑化邻苯二甲酸双(2-乙基己基)酯(DEHP，CAS编号117-81-7)制备的血液成分包袋的集合(也与血浆分离置换设备一同供应)来进行。仅约20%的RBC采用该方法收集，大部分RBC是从供给的全血中分离得到。对于血小板而言则相反。
[0005]从供者收集用于输注的血红细胞(RBC)进入CPD或CP2D抗凝血剂保存溶液中。RBC通过离心法分离，随后添加用于长期贮存的溶液(例如，AS-3)。通过过滤去除血液白细胞，然后将RBC/AS-3贮存在DEHP塑化的PVC包袋中，输注前在1_6°C贮存至多42天。熟知DEHP塑化剂对RBC具有重要保护作用，其降低贮存过程中溶血的量。希望使该贮存溶血以及其它贮存损伤最小化以对输注受者提供最大的治疗性益处，并使与RBC输注相关联的潜在负面后遗症最小化。DEHP塑化剂(用于制备所述包袋)在RBC的贮存过程中，于溶细胞浓缩物中部分溶解，由此从包材料扩散并发挥附加的红细胞保护作用。据文献(Dumont LarryJ.等.Exploratory in vitro study of red blood cell storage 容器 s formulated withan alternative plasticizer (采用替代性塑化剂制备的血红细胞存容器的体外探索研宄).Transfus1n，2012年7月52(7): 1439 - 1445)显示，DEHP塑化剂的存在使红细胞浓缩物贮存过程中裂解的红细胞的数量减少。
[0006]红细胞浓缩物中的DEHP塑化剂会分解成毒性成分，其中之一，即为邻苯二甲酸单-乙基己基酯(MEHP)。因此，在用含有DEHP塑化剂的材料制备的包袋中保存红细胞的弊处是，患者在输注红细胞浓缩物单位之后中毒的危险。所示负面结果可能会在多重输注病例中极其显著地增加。考虑到该情况，优选在用不含DEHP塑化剂的材料制备的包袋中贮存红细胞浓缩物。因为在某些高风险患者群中具有理论负面作用，希望找到RBC贮存包袋中DEHP的替代成分。然而，在该情况中，会丢失(由DEHP塑化剂的存在而造成的)保护作用，因而贮存过程中裂解的红细胞的数目会增加。
[0007]已知2010年I月14日公开的US 2010/0009334中描述了用于血小板保存的方法。该方法涉及:从获自个体的血液获得血小板浓缩物，使血小板血浆保持在3.5?5个大气压强下的含有65%?100%氙的气体介质中，随后将血小板浓缩物冷却至约1°C?6°C的温度范围内，并贮存在上述温度和气体介质压强条件下。血小板通过血浆分离置换法获得。该方法导致血小板的贮存期延长。
[0008]然而，实践经验显示，采用该方法来保存其它血液细胞(例如，红细胞)具有许多弊处。首先，假定该方法采用气体混合物，其除氙气以外包含氧气或大气空气。然而，在红细胞贮存过程中，氧气的存在刺激红细胞溶解(溶血)。红细胞在贮存过程中的溶血现象导致终产品的质量不能令人满意:即，红细胞浓缩物中的完整细胞数量低，这降低了输注至患者之后的功效。甚至更重要的是因输注的RBC中的高度溶血所致的输注的负面作用。在美国，如果多于I %的红细胞浓缩物经历溶血，则认为该红细胞浓缩物不能用于血液输注。在其它国家，对于能够用于血液输注的红细胞浓缩物而言，红细胞浓缩物的溶血的量必须低至 0.8%。
[0009]鉴于本领域目前的情况，需要开发保存红细胞浓缩物的方法，其使红细胞浓缩物贮存不少于42天的时间且不发生红细胞质量大幅劣化，并且该方法能够使用不采用DEHP塑化剂制备的塑料包袋。
【发明内容】
[0010]本发明涉及用于保存红细胞浓缩物的改进的方法，该方法确保红细胞浓缩物贮存不少于42天的时间且不发生红细胞质量的大幅劣化，并且能够使用不采用DEHP塑化剂制备的塑料包袋。
[0011]本发明涉及血液保存药剂，且具体涉及压积血红细胞(红细胞浓缩物)的保存。在本发明的一个非限制性实施方式中，提供红细胞保存方法，其中使红细胞浓缩物(预先从全血获得并置于包袋中)保持在不包括氧气的气体系统中。在该实施方式的一个非限制性方面，所述气体系统包含氙气成分，该气体天然存在于位于海平面的地球大气中。在该实施方式的另一个非限制性方面，该气体系统包含大于约10体积％的氙气。而在该实施方式的另一个非限制性方面，该气体系统包括大于约50体积％的氙气成分。在该实施方式的另一个非限制性方面，所述气体系统包含约65体积％?约100体积％的氙气成分。氙(Xe)是惰性(noble，inert)元素气体，其是海平面处空气中含量极低(少于1/1，000%)的常见组分。其在常规生物学条件下不具反应性或为“惰性”。氙是能够容易扩散的气体，其不由身体产生也不被身体利用。可任选地以O体积％?35体积％的含量使氣与一种或多种压载(ballast)气体(例如、氮气、惰性气体、二氧化碳)合并。与氙气或氙气和压载气体混合物掺混的氧气的量一般少于5体积％，通常少于2体积％，较通常地少于I体积％，更通常少于0.5体积%，而更加通常少于0.1体积%，且更为通常是约O体积%。所述气体系统中的氙的量可以是65体积％?100体积％的任何量(例如，65%、65.1%,65.2%....99.8%,99.9%、100% )，并且可包括所述数值中的任何范围。同样，当该气体系统中包含一种或多种压载气体时，该气体系统中压载气体的量可以是O体积％?35体积％的任何量(例如，0%,0.1%,0.2%....34.8%,34.9%,35% )，并且可包括所述数值中的任何范围。使用时，所述压载气体通常是氮气和/或氩气；然而也可对红细胞浓缩物采用其它惰性气体。向容器中的红细胞浓缩物引入所述气体系统以使所述红细胞浓缩物被所述气体系统部分或完全饱和。一般而言，所述红细胞浓缩物被所述气体系统至少约75 %饱和，通常被所述气体系统至少约80%饱和，较通常被所述气体系统至少约85%饱和，更通常被所述气体系统至少约90%饱和，而更加通常被所述气体系统至少约95%饱和，且更通常被所述气体系统至少约98%饱和。在一个非限制性安排中，所述容器的至少部分对所述气体混合物具有可透过性，从而所述气体混合物可经扩散通过该容器而被引入和/或从该容器移出；然而，这并非必需。在一个非限制性构造中，所述容器是聚氯乙烯制备的可包含或可不包含DEHP塑化剂的包袋形式。不限制容器的大小。容器的一个非限制性大小是能够包含至少200ml的红细胞浓缩物。在另一个非限制性构造中，所述容器位于带有对所述气体混合物具有可透过性的盖的密封器皿中。所述器皿可以或可以不对所述气体混合物具有可透过性。所述容器中的红细胞浓缩物可任选被保持在所述气体混合物的存在之下，并且处于高于I个大气压的压强下，而在所述容器位于所述密封隔室中时无需额外泵送所述气体混合物。可从气体混合物压强在所述密封隔室中稳定(该稳定由红细胞浓缩物和气体混合物的饱和所致)时刻起开始任选地使所述密封隔室中的红细胞浓缩物冷却。
[0012]在本发明的一个非限制性方面，当所述气体系统被引至红细胞浓缩物时，所述气体系统的压强一般不高于约4个大气压。一般而言，所述气体系统的压强是至少约I个大气压。出于本发明的目的，大气压强是I个大气压(760托)。一般而言，所述气体系统的压强低于约10个大气压。在本发明的一个非限制性实施方式中，在被引至红细胞浓缩物时，所述气体系统的压强是约I?4个大气压(例如，I个大气压、1.1.个大气压、1.2个大气压....3.8个大气压、3.9个大气压、4个大气压)，并且可包括所述值中的任何范围。在本发明的一个非限制性方面，在被引至红细胞浓缩物时，所述气体系统的压强高于大气压强(例如，I个大气压)。
[0013]在本发明的另一个和/或替代性非限制性方面，当红细胞浓缩物的温度高于所述红细胞浓缩物的凝固点，多至约300C (例如，0.01°C、0.02°C....29.98°C ^29.99°C、30°C )的温度时，可将所述气体系统引至所述红细胞浓缩物。当所述气体系统被引至所述红细胞浓缩物浓缩物时，容器中的红细胞浓缩物的温度可被保持在常温或变化(例如，降低、升高等)。在一个非限制性实施方式中，当红细胞浓缩物的温度为至多约25°C的温度时，可将所述气体系统引至红细胞浓缩物。在另一个非限制性实施方式中，当红细胞浓缩物的温度为至多约23°C的温度时，可将所述气体系统引至红细胞浓缩物。在另一个非限制性实施方式中，当红细胞浓缩物的温度为约6°C?23°C的温度时，可将所述气体系统引至红细胞浓缩物。
[0014]而在本发明的另一个和/或替代性非限制性方面，一般在从人或其它类型的哺乳动物移出血液后约98小时(例如，0.01小时、0.02小时....97.98小时、97.99小时、98小时)之内将所述气体系统引至红细胞浓缩物。在一个非限制性实施方式中，在从人或其它类型的哺乳动物移出血液之后约72小时之内将气体系统引至红细胞浓缩物。在另一个非限制性实施方式中，在从人或其它类型的哺乳动物移出血液之后约48小时之内将气体系统引至红细胞浓缩物。在另一个非限制性实施方式中，在从人或其它类型的哺乳动物移出血液之后约24小时之内将气体系统引至红细胞浓缩物。
[0015]而在本发明的另一个非限制性方面，在所述气体系统(即、氙气、氙气加压载气体