一种防治烟草花叶病毒病的植物源杀菌剂及制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种植物源农药，尤其涉及一种由细辛、丁香、藜芦、瑞香狼毒四种植 物中提取活性成分混合后制备的植物源杀菌剂，以及该杀菌剂的制备方法。
【背景技术】
[0002] 由植物病毒引起的病毒病，是农业生产上的一类重要病害，烟草花叶病毒（TMV)每 年造成的经济损失就超过1亿美元。由于病毒在植物细胞内绝对寄生，其复制所需的能量、 物质、场所完全由寄主细胞提供，加之植物没有完整的免疫代谢系统，这使得植物病毒病的 防治更加困难，并且目前所使用的化学抗病毒剂只能在一定程度上起到延缓或减轻病毒病 症状的作用，不能根除病毒，对植物病毒病治疗效果甚微，因此植物病毒病的防治一直是植 物病害及病毒学研宄的难点和热点问题。
[0003] 植物源农药以其独特的优势，成为天然抗病毒活性物质研宄的主要来源，也使发 展新型植物源抗病毒类植物源农药己越来越受到人们重视。我国从80年代后期至今，许多 学者做了大量的工作，到目前发现含有植物病毒抑制物质的植物有几十种，但均未成为商 品。
[0004] 目前，农业生产中防治病毒病主要还是通过选育抗病品种、种子消毒、加强田间管 理(农事操作和传播媒介)等措施。常用的一些化学药剂效果不佳，还容易带来环境污染、易 产生抗药性等弊端。鉴于此，本发明从植物中提取有效成分，按不同比例制成防治烟草花叶 病毒病的药剂，从而为农业生产更好的服务。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术的不足，本发明提供一种防治烟草花叶病毒病的植物源杀菌剂，本 发明的植物源杀菌剂具有高效、低毒、低残留、与环境和协、提高寄主免疫力的特点。本发明 还公开了该植物源杀菌剂的制备方法。
[0006]本发明防治烟草花叶病毒病的植物源杀菌剂由细辛Miq)全株、丁香（5知7於? 花蕾、藜芦（Kerat??? L)全株、和瑞香狼毒 (SteWera L.)根四种植物的混合提取物以及助剂和溶剂制成。
[0007] 本发明防治烟草花叶病毒病的植物源杀菌剂的制备方法包括如下步骤： (1) 将细辛全株、丁香花蕾、藜芦全株、瑞香狼毒根四种植物不同部位分别烘干、粉碎通 过20-40目筛，备用； (2) 将（1)制备的原料按质量份分别称取细辛1 一 3、丁香3 - 12、藜芦5 - 8、瑞香 狼毒6 - 15,混合均匀后倒入提取罐，加入4-7倍原料质量份的有机溶剂，搅拌中加热至 40-60°C，回流提取4-6小时或恒温浸提5-8小时，备处理； (3)将（2)制备的提取液减压浓缩后得到膏状物，备用； (4)将（3)制备的膏状物质量1-3倍的助剂与膏状物混合均匀后，再加入膏状物质量 100-300倍的20%乙醇溶液或水，制成防治烟草花叶病毒病的植物源杀菌剂。
[0008] 所述的有机溶剂为甲醇、乙醇或丙酮的一种或几种有机溶剂的混合液。
[0009]所述的助剂为吐温类，如吐温80。
[0010] 所述的植物细辛（Asar腫Miq)为马兜铃科、细辛属多年生草本；是我 国特有的传统中药。中医用于治疗风寒头痛、关节疼痛、鼻塞及口腔糜烂等。细辛所含的 挥发油对黄曲霉（5/7.)、黑曲霉（5/7.)、白色念珠菌（t/a 5/7.)、伤寒杆菌（免办5/7.)有抑菌作用；对黑斑病菌（^teraaria /7a/?ar)、疫病菌 (/%_7(〇/7力从cactora?)和番前灰霉病菌ciflerea)等植物病原真菌均有较好 的抗菌效果。
[0011] 丁香（aro?a (ictt?)为桃金娘科植物丁香（ Thunb)的干燥花蕾，又称公丁香。丁香味辛性温，用于治疗脾胃虚寒、呃逆呕吐、食少吐泻、 心腹冷痛和肾虚阳瘘；丁香含挥发油（即丁香油)，油中主要成分为丁香酚，具有消炎、杀菌、 驱虫、镇痛等功效，尤其以丁香花蕾为原料提取的挥发油其效果更加突出。
[0012] 藜芦（Veratrum nigrum L)属多年生草本植物。别名大叶芦，山葱。性味辛、苦， 寒；有毒。其主要活性成分为生物碱，如藜芦碱等，有催吐，祛痰，杀虫抑菌的功能。
[0013] 瑞香狼毒（SteJrJrera cAaffiaej'as?? L.)属瑞香科狼毒属植物。以根入药，含有黄 酮类化合物、香豆素类化合物、二萜类物质和木脂体类成分等，其主要活性成分为狼毒素， 属黄酮类物质，具有杀虫抑菌作用。
[0014] 本发明的防治烟草花叶病毒病的植物源杀菌剂的药效试验 1、室内盆栽药效实验 I. 1供试杀菌剂的制备 (1) 将细辛全株、丁香花蕾、藜芦全株、瑞香狼毒根四种植物不同部位分别烘干、粉碎通 过30目筛，备用； (2) 将（1)制备的原料按质量份分别称取细辛2、丁香8、藜芦6、瑞香狼毒10,混合均 匀后倒入提取罐，加入5倍原料质量份的乙醇，热回流提取5小时，备处理； (3) 将（2)制备的提取液，减压浓缩后得到膏状物，备用； (4) 将（3)制备的植物提膏状物加入膏状物质量2倍的吐温80,混合均匀后，再加入膏 状物质量300倍的净水，制成防治烟草花叶病毒病的植物源杀菌剂。
[0015] 试验方法 保护作用试验选择5-6叶期，长势一致、健壮的植株供试。试验以施药后Id接种TMV 的番茄苗为处理组，分别用供试药剂300倍液进行喷雾以及灌根，只接种不施药的番茄苗 为空白对照组。TMV接种浓度为1:20 (W/V)。接种后14d、30d检查番茄叶片上的枯斑数， 计算抑制率。每处理20株苗，试验重复3次。
[0016] 治疗作用试验以接种TMV后施药的为处理组，以只接种不施药对照组。接种毒 源TMV，接种浓度为1:20 (W/V)，接种后5d进行药剂处理。处理为供试药剂300倍液喷雾 和灌根，分别于用药后14d、30d检查番茄新生叶片上的枯斑数，计算抑制率。每处理20株 苗，试验重复3次。
[0017] 抑制率=(对照平均枯斑数-处理平均枯斑数）/对照平均枯斑数X 100 1. 3结果与分析 实验结果见下表1、表2。
[0018] 表1本发明杀菌剂对番茄病毒病保护作用测定结果
从表1和2可以看出，在保护作用中，以不同方式处理后，其14天对TMV的抑制效果都 在90%以上；而在治疗作用中，以灌根方式更为有效，30天后的抑率仍有86. 97%。
[0019]保护作用是指喷药后对病害发生情况影响，而治疗作用是指作物感染病毒后药物 对其的治疗作用，从本实验来看地，保护作用在14天时比较明显，治疗作用以灌根方式更 为有效，这也表明本药剂对TMV有很好的抑制作用，且持效期较长，可达30天左右。
[0020] 、田间药效实验 2. 1试验方法 试验在山西省晋中市太谷县山西农业大学进行，小区试验随机区组排列，小区面积100 m2。试验田为连作露地番茄，管理水平一般，番茄花叶病毒病中度发生。试验于2014年6 月18号开始处理，将上述制备好的药剂稀释300倍，采用田间小区试验方法进行喷雾和喷 雾加灌根处理，并设化学药剂对照和清水