一种南酸枣的组织培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物无性繁殖领域，具体为一种南酸枣的组织培养方法。
【背景技术】
[0002]南酸枣是我国南方优良速生用材树种，其木材结构略粗，心材宽，淡红褐色，边材狭，白色至浅红褐色，花纹美观，刨面光滑。材质柔韧，收缩率小，可加工成工艺品。果实甜酸，可生食、酿酒和加工酸枣糕；果核可做活性炭原料；树叶可做绿肥；树皮还可作为鞣料和栲胶的原料。分布于浙江、福建、湖北、湖南、广东、广西、云南、贵州等处。南酸枣果实营养丰富，含糖量多，并含有钙、蛋白质、脂肪铁、磷、钙及维生素等，尤其是维生素C和P每100克鲜果分别高达1200毫克和2000毫克，比山楂高12.4倍，比猕猴桃高2倍，比苹果高几十倍。
[0003]由于南酸枣的经济价值高，现在有大量的地区开始发展南酸枣的种植，使得南酸枣的树苗供应紧张。南酸枣为雌雄异株，这就使得自然种植繁殖时，雌雄树木的数量难以控制，造成结果的南酸枣比例偏低，不利于南酸枣作为果树来种植；因此发展现代科技育苗技术运用在南酸枣育苗上大有可为。现代育苗技术中，组织培养运用是很好的选择，组织培养是在无菌的条件下将活器官、组织或细胞放置在适宜的培养基内，并放在适宜的环境中，进行培养而重新形成的细胞、组织或个体。还可以控制该技术已广泛应用于农业生产、医药开发等研究。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种南酸枣的组织培养方法。
[0005]本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:
[0006]本发明的一种南酸枣的组织培养方法，包括以下步骤:
[0007](I)取3月份的南酸枣腋芽，标记树木的性别，外表面消毒，剥外层芽孢，取基部和内皮，放入已灭菌的装有MS培养基的广口培养瓶内，黑暗培养5天，弃去感染的腋芽，余下为消毒腋芽；
[0008](2)将南酸枣果消毒腋芽放入诱导培养基中培养，培养条件:温度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培养 6 周；
[0009]所述诱导培养基为MS培养基加入1.5mg/L的6_BA、0.03mg/L的TDZ、0.3mg/L的IBA、1%的蔗糖、2.0g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121°C灭菌15min ;
[0010](3)将步骤(2)中诱导培养后的腋芽转入继代培养基中培养，培养条件:温度15-20°C、光照 2000LX、8h/d ;培养 4 周；
[0011]所述继代培养基为MS培养基加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、0.4mg/L的IBA,0.02%。的活性炭、0.01 %。的Vc、2 %的蔗糖、2.5g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121°C 灭菌 15min ；
[0012](4)将步骤(3)中继代培养基中培养的腋芽转入生根培养基中培养，培养条件??温度 15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培养 4 周；
[0013]所述生根培养基为1/2MS培养基加入1.0mg/L的6_BA、0.0lmg/L的TDZ、0.6mg/L的IBA,0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121°C 灭菌 15min ；
[0014]优选的，步骤(I)中的南酸枣腋芽外表面消毒是先用无菌水冲洗20min，再分别用75%的乙醇和0.1 %的氯化汞浸泡1min。
[0015]本发明的南酸枣桑的组织培养方法的优点:
[0016]1.本发明的南酸枣的组织培养方法，可以通过记录采集母本的性别，来定向控制培育南酸枣苗木的性别。
[0017]2.本发明的南酸枣的组织培养方法，不受季节的限制，可以最大程度的保留原植株的生物学特性。繁殖速度快，生根率在98%以上。
[0018]3.本发明的南酸枣的组织培养方法，在继代培养基和生根培养基中添加0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc可以很好防止在培养的过程中发生褐化。
【具体实施方式】
[0019]以下结合具体实施例对本发明作进一步说明:
[0020]实施例
[0021]配制各步骤的培养基:
[0022]诱导培养基:量取MS培养基，按比例加入L 5mg/L的6-BA、0.03mg/L的TDZ、
0.3mg/L的IBA、1%的蔗糖、2.0g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121°C灭菌15min ;
[0023]继代培养基:量取MS培养基，按比例加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、
0.4mg/L的ΙΒΑ、0.02%。的活性炭、0.01%。的Vc、2%的蔗糖、2.5g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121。。灭菌15min ；
[0024]生根培养基:量取1/2MS培养基，按比例加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、
0.6mg/L的ΙΒΑ、0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121°C灭菌15min ；
[0025]实验操作:
[0026](I)取3月份的南酸枣腋芽，标记树木的性别，外表面消毒，剥外层芽孢，取基部和内皮，放入已灭菌的装有MS培养基的广口培养瓶内，黑暗培养5天，弃去感染的腋芽，余下为消毒腋芽；
[0027](2)将南酸枣果消毒腋芽放入诱导培养基中培养，培养条件:温度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培养 6 周；
[0028](3)将步骤(2)中诱导培养后的腋芽转入继代培养基中培养，培养条件:温度15-20°C、光照 2000LX、8h/d ;培养 4 周；
[0029](4)将步骤(3)中继代培养基中培养的腋芽转入生根培养基中培养，培养条件:温度 15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培养 4 周。
【主权项】
1.一种南酸枣的组织培养方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)取3月份的南酸枣腋芽，标记树木的性别，外表面消毒，剥外层芽孢，取基部和内皮，放入已灭菌的装有MS培养基的广口培养瓶内，黑暗培养5天，弃去感染的腋芽，余下为消毒腋芽； (2)将南酸枣果消毒腋芽放入诱导培养基中培养，培养条件:温度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培养 6 周； 所述诱导培养基为MS培养基加入1.5mg/L的6-BA、0.03mg/L的TDZ、0.3mg/L的IBA、I %的蔗糖、2.0g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121°C灭菌15min ; (3)将步骤(2)中诱导培养后的腋芽转入继代培养基中培养，培养条件:温度15-20°C、光照2000LX、8h/d ;培养4周； 所述继代培养基为MS培养基加入1.0mg/L的6-BA、0.01mg/L的TDZ、0.4mg/L的IBA、0.02%。的活性炭、0.01%。的Vc、2%的蔗糖、2.5g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121。。灭菌 15min ； (4)将步骤(3)中继代培养基中培养的腋芽转入生根培养基中培养，培养条件:温度15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培养 4 周； 所述生根培养基为1/2MS培养基加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、0.6mg/L的IBA,0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的琼脂，调整PH值6.0，培养基121。。灭菌15min02.根据权利要求1所述的南酸枣的组织培养方法，其特征在于:所述步骤(I)中的南酸枣腋芽外表面消毒是先用无菌水冲洗20min，再分别用75%的乙醇和0.1 %的氯化汞浸泡 1min0
【专利摘要】本发明公开了一种南酸枣的组织培养方法，包括：取南酸枣腋芽，外表面消毒，MS培养基培养，筛选消毒腋芽；将消毒腋芽放入诱导培养基中培养，培养条件：温度10-12℃、光照1800LX、8h/d；培养6周；转入继代培养基中培养，继续增殖，培养4周；转入生根培养基中培养，生根培养，培养4周；该组织培养方法可以通过记录采集母本的性别，来定向控制培育南酸枣苗木的性别，不受季节的限制，最大程度的保留原植株的生物学特性，繁殖速度快，生根率在98％以上，可以很好防止在培养的过程中发生褐化。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN104996300
【申请号】CN201510456557
【发明人】孟祥松, 王雨艨
【申请人】合肥一诺生物科技有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年7月27日