一种红掌快速繁殖的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物栽培技术领域，具体涉及一种红掌快速繁殖的方法。
【背景技术】
[0002] 红掌，又称花烛，安祖花，系天南星科花烛属多年生附生常绿草本植物，原产于南 美洲热带雨林。近年来，红掌的品质越来越高，国内市场相对稳定，市场接受越来越好，销售 稳定，前景看好。1980年以来，组织培养技术得到快速发展。我国自20世纪80年代引进红 掌以来，由于其独特的花型，叶形别致，被赋予"大展宏图，热情"之意。收到了广大人民的 喜爱，但其核心技术一直受到国外垄断，因此价格也相当的昂贵。随着人们生活水平质量的 提高，对红掌的需求也越来越大，国内很多花卉公司将注意力转入生产成品红掌，仅仅依靠 进口种苗，已经不能满足国内市场的需求，红掌像其他时尚花卉一样，在改变其花形、花色， 缩短生长周期，增强品种抗性等已成为目前红掌育种的主要目标。
[0003] 我国对红掌组织培养的研究取得了一定进步，但是红掌在外植体接种后很容易褐 化现象和污染的等问题，外植体诱导率低、不易生根，而且在培养条件，激素配比等方面说 法迥异，因此探索一种适合红掌组织快殖的方法是很有必要的。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是克服现有红掌育种技术的不足，提供一种红掌快速繁 殖的方法，生长周期短，成本低，红掌观赏价值高。
[0005] 为了达到上述目的，本发明采用的技术方案是： 一种红掌快速繁殖的方法，包括如下步骤： 1) 红掌的预处理：选取红掌子株，在质量分数为1-5%抗氧剂中浸泡10-30min、然后再 进行消毒灭菌处理； 2) 诱导培养：将步骤1)灭菌处理后的红掌子株的茎段接种到诱导培养基中培养，先暗 培养5-10天，然后光照培养，光照时间4-8h/d，光照强度500-10001x，培养温度22-28°C，培 养时间15-25d，培养得到红掌愈伤组织； 3) 增殖培养：将步骤2)中诱导得到的红掌愈伤组织转接到增殖培养基中，光照时间 10-12h/d，光照强度3000-35001x，培养温度22-28°C，培养时间20-25d，分化出芽； 4) 生根培养：待步骤3)中分化出的芽长到l-2cm时，转接到生根培养基中，光照时间 5-8h/d，光照强度1500-20001x，培养温度22-28°C，培养时间20-30d，得到生根红掌。
[0006] 步骤1)中抗氧化剂为抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)或者亚硫酸钠中的至少 一种； 步骤1)中消毒灭菌方法为：将红掌子株在75%(体积百分比）乙醇中浸泡7-9秒，无菌 水淋洗三次，在质量百分比为〇. 1-1%的HgCl2浸泡3-10min，无菌水冲洗数次，洗去残留的 HgCl20
[0007] 步骤2)诱导培养基为：MS，细胞分裂素2-8mg/L，生长激素0· 2-2mg/L，活性炭 l-l〇g/L (防止褐化），蔗糖20-30g/L，琼脂5· 5-7. Og/L，ρΗ=5· 2-5. 8,其中细胞分裂素为 6-糠基氨基嘌呤（KT)，6-苄基氨基嘌呤（6-ΒΑ)中的一种或两种混合，生长激素为吲哚乙 酸（IAA)，萘乙酸（NAA)，2, 4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D)，吲哚丁酸（IBA)中的一种或几种 混合。诱导培养基优选为：MS，细胞分裂素3-5mg/L，生长激素0. 2-lmg/L,活性炭5-10g/ L (防止褐化），蔗糖25-30g/L，琼脂5. 5-6. 5g/L，pH=5. 2-5. 8 ;进一步优选为：MS，细胞分 裂素3-4mg/L，生长激素0· 5-1. Omg/L，活性炭5-10g/L (防止褐化），蔗糖25-30g/L，琼脂 5. 5-6. Og/L，ρΗ=5· 5-5. 8。
[0008] 步骤3)增殖培养基为：MS，细胞分裂素0. 2-6mg/L，生长激素3-5mg/L，蔗 糖20-30g/L，琼脂5. 5-7. Og/L，pH=5. 2-5. 8,其中细胞分裂素为6-糠基氨基嘌呤（KT)， 6-苄基氨基嘌呤（6-BA)中的一种或两种混合，生长激素为吲哚乙酸（IAA)，萘乙酸 (NAA)，2, 4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D)，吲哚丁酸（IBA)中的一种或几种混合。增殖培养基优 选为：MS，细胞分裂素0· 2-5mg/L，生长激素3. 2-4. Omg/L，蔗糖25-30g/L，琼脂5. 5-6. 5g/ L，pH=5. 2-5. 8 ;进一步优选为：MS，细胞分裂素0. 2-1. 0mg/L，生长激素3. 5-4. 0mg/L，蔗糖 25-30g/L,琼脂 5. 5-6. 0g/L，ρΗ=5· 5-5. 8 步骤4)生根培养基为：1/2MS，生长激素0· l-2mg/L，蔗糖15-25g/L，琼脂5· 5-7. 0g/L， pH=5. 2-6. 0，其中生长激素为吲哚乙酸（IAA)，萘乙酸（NAA)，吲哚丁酸（IBA)中的一种或 几种混合。生根培养基优选为：1/2MS，生长激素0. 2-lmg/L，蔗糖15-20g/L，琼脂6-6. 5g/ L，ρΗ=5· 5-6. 0 ;进一步优选为：1/2MS，生长激素 0· 8-1. 2mg/L，蔗糖 20g/L，琼脂 6. 5g/L， pH=5. 6-5. 8 ； 诱导培养步骤优选控制条件为：将灭菌处理后的红掌子株的茎段接种到诱导培养基中 培养，先暗培养5天，然后光照培养，光照时间8h/d，光照强度ΙΟΟΟΙχ，培养温度24°C，培养 时间15d，培养得到红掌愈伤组织，愈伤组织诱导率达到98% ; 增殖培养步骤优选控制条件为：将红掌愈伤组织转接到增殖培养基中，光照时间IOh/ d，光照强度30001x，培养温度26°C，培养时间25d，分化出芽； 生根培养步骤优选控制条件为：待分化出的芽长到l-2cm时，转接到生根培养基中，光 照时间8h/d，光照强度18001x，培养温度28°C，培养时间30d，得到生根红掌，生根率100% 有益效果：本发明提供了一种红掌快速繁殖的方法，通过对红掌的茎尖进行诱导、分 化、增殖，结合对培养基及其培养条件研究，获得红掌快速繁殖的方法，该方法可以缩短红 掌组培时间，最快60天就可以生根，降低成本，提高成活、分化、生根率。
【具体实施方式】
[0009] 下面结合具体实施实例对本发明做进一步描述，可以更好地理解本发明。然而，本 领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说 明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明本。
[0010] 本发明中所采用的MS培养基的配方见表1。以下实施例中的百分比均为质量百分 比。
[0011] 实施例1 诱导培养基：MS，KT 3 mg/L，NAA 0.5mg/L，IAA 0.2 mg/L 活性炭 2g/L，蔗糖 25g/L， 琼脂 6g/L. ρΗ=5· 6 ; 增殖培养基：MS，6-BA 0· 7mg/L，NAA3mg/L，蔗糖 30g/L，琼脂 7g/L. ρΗ=5· 6 ; 生根培养基：1/2MS，NAAO. 2mg/L，蔗糖 15g/L，琼脂 6· 5 g/L，ρΗ=5· 6-5. 8 ; 选取红掌茎尖作为外植体，在3%抗坏血酸中浸泡lOmin，无菌水冲洗三次，在75%乙 醇中浸泡8秒，无菌水淋洗三次，在0. 1% HgCl2浸泡8min，无菌水冲洗去HgCl 2，在无菌环 境下将其接种于诱导培养基中培养，先暗培养5天，然后光照培养，光照时间8h/d，光照强 度ΙΟΟΟΙχ，培养温度24°C，培养20d，茎尖开始产生黄绿色愈伤组织，愈伤组织诱导率达到 98%，转入增殖培养基，光照时间10h/d，光照强度30001x，培养温度26°C，培养20d平均每块 愈伤组织分化7-8个不定芽，待不定芽长到l-2cm时转入生根培养基，8h/d的光照，17001x 光照强度，28°C培养培养22d，每个不定芽都生根，生根率100%。
[0012] 实施例2 诱导培养基：MS，6-BA 5 mg/L，2,4-D I mg/L，活性炭 2 g/L，鹿糖 28 g/L,琼脂 6g/L， pH=5. 6 ； 增殖培养基：MS，6-BA 0· 5 mg/L，NAA3. 5 mg/L，蔗糖 30g/L，琼脂 5· 8 g/L，ρΗ=5· 6 ; 生根培养基：1/2MS，NAA 0· 6 mg/L，蔗糖 20 g/L，琼脂 6 g/L，ρΗ=5· 6-5. 8 ; 选取红掌茎尖作为外植体，在3%聚乙烯比咯烷酮中浸泡10min，无菌水冲洗三次，在 75%乙醇中浸泡5秒，无菌水淋洗三次，在0. 4% HgCl2浸泡8min，无菌水冲洗去HgCl 2，在无 菌环境下将其接种于诱导培养基中培养，先暗培养10天，然后光照培养，光照时间7 h/d， 光照强度8001x，培养温度26°C，培养25d，茎尖开始产生黄绿色愈伤组织，愈伤组织诱导率 达到96%，转