047] 实施例3复配杀菌剂对梨树腐烂病室内抑菌与田间治疗效果研究
[0048] 1、材料与方法
[0049] I. 1抑菌剂的配制
[0050] 通过实验室前期的试验结果，选取szc :mjz = 2:1 (三唑醇：szc，嘧菌酯：mjz)为 基本杀菌剂，添加不同浓度的6-BA、NAA和液态有机硅（Si)，运用L9 (34)正交实验设计的方 法，设置九种复配药剂（表3-1)。
[0051] 1.2 PDA培养基的配置
[0052] 称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000 ml煮沸半个小时或高压煮20min 成泥状，纱布过滤，再加20g葡萄糖和20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，定至1000ml，高 压灭菌锅（121°C )灭菌20min左右后取出，铺平板。
[0053] 1. 3菌丝的制备
[0054] 腐烂病菌株分离自河北省保定市省力密植栽培标准化示范园发病的6年生雪青 梨树枝条，试验前将菌株在PDA培养基上活化3~4d，在25°C恒温培养箱中培养，待菌落长 至直径约40mm时，用直径为1mm打孔器切取菌落外缘制成菌丝块备用。
[0055] 1. 4平板制备
[0056] 将PDA培养基加热熔化，倒平板，每皿20ml，待其凝固，在培养皿背面确定好两个 位置，使其中间的距离固定，在培养基上将其中一个位置打孔注入药剂，另一个位置用来接 种菌块，如图3所示。注入的药剂按照各杀菌剂推荐使用浓度范围，每皿注入等量的相应浓 度的药剂，并设无菌水为空白对照。抑菌率（％)= d/DX 100%。
[0057] 1. 5供试梨树
[0058] 25年生的砀山酥梨梨树，果园粗放式管理，肥水较少，梨树枝干有腐烂病病斑。
[0059] 1.6病斑处理
[0060] 采用病斑环割法：用病疤环割刀沿着病疤扩展界限向外环割下0. 5cm的病组织 条，使病组织和健康组织隔离开，然后在病组织及其周围的健康组织上进行涂药，每种药剂 分别处理数个病疤，40d后调查病疤愈合及治愈率。
[0061] 2、结果与分析
[0062] 2. 1复配杀菌剂对病原菌菌丝生长抑制效果
[0063] 利用SPSS分析软件的单因素方差分析方法（One-way AN0VA)，对九种处理的 抑菌率分析，结果表明，处理l(l〇〇ug/ml 6-BA+100ug/ml熟4+0.025%3丨，1-1-1)、处理 6(200ug/ml 6-BA+100ug/ml NAA+0.025%Si，2-3-l)和处理 9(300ug/ml 6-BA+200ug/ml NAA+0. 075% Si, 3-3-2)的抑菌率分别为84%、83%和80%，与其它处理均达到了差异显著 性水平；药剂效果较差的有处理7和处理4。
[0064] 表3-1九种处理对腐烂病菌丝抑菌率差异显著性分析
[0065]
[0066] CN 105010353 A VL 下》 "10 贝
[0067] 注：不同小写字母表示P < 0. 05水平下显著性差异（F-test)
[0068] 根据九种复配药剂对梨树腐烂病病菌菌丝抑菌率，使用SPSS分析软件的正交试 验设计分析（Multivariate)，结果表明，6-BA和NAA对抑菌率差异不显著。有机硅（Si) 达到差异显著水平，但水平1(0.025% )和水平2(0. 075% )差异不显著，两者均与水平 3(0.15%)达到差异显著水平。其中200耶/11116-84、1501^/1111熟4和0.025%5丨三个 水平，抑菌效果最好；其次是300ug/ml 6-BA+200ug/ml ΝΑΑ+0. 075% Si抑菌效果较好； 100ug/ml6_BA+100ug/ml ΝΑΑ+0. 15% Si 抑菌效果最差。
[0069] 表3-2重复试验方差分析
[0070] 因变量：抑菌率
[0071]
[0072] 注：决定系数=0. 971 (校正后的决定系数=0. 885)。
[0073] 表3-3各因素不同水平之间的差异显著性分析 ?
[0074]
j
[0075] 注：不同小写字母表示P < 0. 05水平下显著性差异（F-test)
[0076] 从表3-2中可以看出，在0.05的水平下，Si对抑制梨树腐烂病病菌的生长是 显著的，在同等条件下，可以优先采用他们的最好水平。从表3-3可以看出6-BA的最好 水平是水平2(200ug/ml)，NAA的最好水平也是水平2(150ug/ml)，Si的最好水平是水平 1 (0. 025% )。从以上分析我们得出该正交设计的最佳抑制梨树腐烂病生长的抑菌剂浓度 配比：200ug/ml 6-BA+150ug/ml NAA+0.025%Si(2- 2- 1)或 300ug/ml 6-BA+150ug/ml ΝΑΑ+0. 025% Si(3-2- 1)。
[0077] 2. 2复配药剂对梨树腐烂病斑的田间治疗效果
[0078] (1)新发病斑数
[0079] 从数据分析看，除处理1、3、4组有新发病斑，其余组均无，所以由以上数据可以分 析出（参见表3-4)，利用刮刀刮治后在涂抹药剂在病斑上，可以有效治疗梨树腐烂病，从而 减少农业上的损失，减少经济上的损耗。
[0080] 表3-4涂抹植株新发病斑率
[0081]
[0082]
[0083] 备注：实验根据早期刮治涂抹药剂，40d后调查统计所得数据。
[0084] (2)病斑治愈率
[0085] 选取不同的病斑，对其刮治涂抹药剂后，40d后调查治愈率。（表3-5)
[0086] 表3-5病斑治愈率
[0087]
[0088] 从数据分析可以看出，这九组治愈率除第7组外，其余均达到75%以上的治愈率， 处理6愈合率达到100%。
[0089] 表3-6方差分析表
[0090] 因变量：愈伤率
[0091]
[0092]
[0093] 注：决定系数=0· 756 (校正后的决定系数=0· 025)。
[0094] 表3-7不同因素对病斑治愈率差异显著性分析
[0095]
[0096] 注：不同小写字母表不P < 0. 05水平下显著性差异（F-test)
[0097] 从表3-6中可以看出，在0. 05的水平下，6-BA，NAA，Si对梨树腐烂病斑防治的治 愈率均不显著，因此在同等条件下，可以优先采用他们的最好水平。从表3-7可以看出6-BA 的最好水平是水平3 (200ug/L)，NAA的最好水平也是水平2 (150mg/L)，Si的最好水平是水 平1 (0. 025% )，最佳治愈梨树腐烂病的药剂配比是：6-BA浓度200ug/l+NAA浓度150mg/ 1+Si 浓度 0· 025% (3-2-1)。
[0098] 综合室内抑菌试验和田间治疗效果试验，最终筛选最佳药剂：szc :mjz = 2:1 (三 P坐醇：szc，啼菌酯：mjz)为基本杀菌剂，添加 300ug/ml 6_BA+150ug/ml NAA+0.025 % Si (3 - 2- 1)。
【主权项】
1. 一种防治梨树腐烂病复配药剂，其特征在于，所述复配药剂含有选自戊唑醇、三唑 醇、嘧菌酯、三唑酮中的两种或三种杀菌剂。2. 根据权利要求1所述的防治梨树腐烂病复配药剂，所述复配药剂含有戊唑醇和三唑 醇、戊唑醇和三唑酮、戊唑醇和嘧菌酯、或者三唑醇和嘧菌酯。3. 根据权利要求1所述的防治梨树腐烂病复配药剂，所述复配药剂含有戊唑醇和三唑 醇、戊唑醇和三唑酮、戊唑醇和嘧菌酯、或者三唑醇和嘧菌酯；其中戊唑醇：三唑醇=2:1， 戊唑醇：三唑酮=1:1，戊唑醇：嘧菌酯=1:1或者1:2,三唑醇：嘧菌酯=2:1。4. 根据权利要求1所述的防治梨树腐烂病复配药剂，所述复配药剂含有三唑醇和嘧菌 酯，并且三唑醇：嘧菌酯=2:1。5. 根据权利要求1所述的防治梨树腐烂病复配药剂，所述复配药剂还含有6-BA和 NAA06. 根据权利要求5所述的防治梨树腐烂病复配药剂，其中6-BA的含量为200 y g/ml ; NAA的含量为150μg/ml。7. 根据权利要求1所述的防治梨树腐烂病复配药剂，所述复配药剂还含有液态有机硅 (Si)。8. 根据权利要求7所述的防治梨树腐烂病复配药剂，其中药剂中液态有机硅（Si)的质 量百分含量为0.025%。9. 权利要求1所述的防治梨树腐烂病复配药剂，所述复配药剂含有三唑醇、嘧菌酯、 6-BA、NAA和液态有机硅（Si)，并且三唑醇：嘧菌酯=2:1 ;6-BA的含量为200 y g/ml ;NAA 的含量为150 y g/ml ;液态有机硅（Si)的质量百分含量为0. 025%。10. 根据权利要求1-9任一项所述的防治梨树腐烂病复配药剂在防治梨树腐烂病方面 的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种防治梨树腐烂病复配药剂及其应用，所述复配药剂含有选自戊唑醇、三唑醇、嘧菌酯、三唑酮中的两种或三种杀菌剂，还含有促进伤口愈合的植物激素6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)和NAA(萘乙酸)以及药剂增效剂有机硅(Si)。试验证明该药剂对梨树腐烂病病菌具有较强的抑制作用，并且通过田间试验证明其对梨树腐烂病具有很好的防治作用，即其能够有效防治梨树腐烂病，从而减少农业上的损失，减少经济上的损耗，提高农民收入。
【IPC分类】A01P3/00, A01N43/54, A01P21/00, A01N43/653, A01N37/10, A01N55/10, A01N43/90
【公开号】CN105010353
【申请号】CN201510431631
【发明人】叶振风, 何家轩, 张海, 朱立武, 吴湘琴, 刘普
【申请人】安徽农业大学
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年7月20日