西昌高原鳅的人工繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明属于珍稀水生动物多样性保护和种群资源增殖技术之领域，具体为西昌高原鳅的人工繁殖方法。该方法可应用于西昌高原鳅自然种群增殖之研究和人工养殖等方面。
【背景技术】
[0002]西昌高原嫩(Triplophysaxichangensis)隶属趣形目(Cypriniformes)、解火科(Cobitidae)、条鳅亚科(Nemacheilinae)、高原鳅属(Triplophysa)，仅分布于我国四川省西昌市境内流入安宁河的海拔2040-2100米的某些支流中。西昌高原鳅个体较小，喜栖息于急流多砾石的河流中，为杂食性鱼类，主要以浮游动物、小型底栖动物和腐植质为食。由于受生态环境和人类活动的影响，西昌高原鳅栖息与生存环境日趋恶化，雅砻江和安宁河梯级水电站的修建更使其生存空间受到极大的压缩，致使其种质资源量急剧减少，2000年被列入四川省新增重点保护野生动物名录。由于西昌高原鳅属冷水性鱼类，生长慢，个体小，绝对怀卵量相对较小，自然繁殖力较弱，种群自然增值速率较慢，生态环境的改变对其种群的繁衍与生存影响较大，因此，在保护其栖息地的同时，人工繁殖是增加其自然种群数量、研究其繁殖生物学和生活史等物种多样性保护工作中普遍采用的一种行之有效的科学技术方法，这也是目前我国大多数珍稀水生动物自然种群增殖与保护的有效途径之一。
[0003]西昌高原鳅是我国特有物种，也是四川省高海拔地区比较重要的鱼类之一，现有工作主要限于高原鳅属生物学描述、物种订正、系统分类学及早期发育等研究，较少见西昌高原鳅人工繁殖技术的研究。我们经过近三年的研究和试验，发明出一种可应用于西昌高原鳅繁育的人工繁殖技术和方法，该方法显著地提高了受精率、孵化率和苗种成活率。
【发明内容】
[0004]本发明目的在于提供了西昌高原鳅的人工繁殖方法，利用本发明提供的方法，可显著的提高西昌高原鳅的受精率，孵化率和苗种成活率，是一种适用于大规模推广的方法。
[0005]为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施:
[0006]西昌高原鳅的人工繁殖方法，包括:
[0007]采用两针催产，第一针，雌鱼注射促黄体素释放激素A2(LHRH-A2)0.1?0.15mg/kg+绒促性素(HCG)6000?10000IU/kg，注射部位为胸鳍腋窝处或者背部肌肉，雄鱼不注射。12 ?16h 后注射第二针，雌鱼剂量为 LHRH-A2 0.3 ?0.4mg/kg+HCG 20000 ?30000IU/kg，雄鱼第二针注射剂量减半；之后采用自然产卵方式进行授精，出膜后的鱼苗采用熟鸡蛋黄为开口饲料。
[0008]选用IV +期的雌鱼作为繁殖亲鱼时，先在其胸鳍腋窝处注射LHRH-A2,剂量为I μ g/kg。待性腺发育至IV ++期时，按上述方法注射催产针。
[0009]其余步骤为西昌高原鳅常规人工繁殖方法。
[0010]优选的，西昌高原鳅的人工繁殖方法，包括以下步骤:
[0011](I)亲鱼的选择与培育
[0012](a)亲鱼的选择
[0013]选取体重为10?20g性成熟的西昌高原鳅作为繁殖亲本，轻压雄鱼亲鱼腹部应有白色精液流出，雌鱼卵巢应发育至IV+或IV ++期。
[0014]所述的亲本，要求活力强、体态匀称、体表无伤。
[0015](b)亲鱼的强化培育
[0016]将雄雌亲本分别放入各自的亲鱼培育池中进行暂养，暂养密度为10?20尾/m2，暂养期间可投喂少量的水蚯蚓，催产前5?7天停食，同时做好日常管理工作。
[0017]所述的亲鱼培育池，池底面光滑，进水可控制，排水顺畅，亲鱼培育池设计为半径为I?1.5m、深0.6?1.5m的圆形水泥池，池底铺设烁石和小卵石，池壁贴瓷砖，池中心为排水口，池外边缘是一根口径为12?15cm的控制水深的塑料管。池子进水管上安装有阀门，以控制进水水流的大小。放入待培育的亲鱼后，池中水深30cm，进水量每小时I?2m3。
[0018](2)人工催产:
[0019](a)挑选待催产的亲鱼:
[0020]将符合性腺发育要求的在亲鱼培育池中的西昌高原鳅雌雄鱼分别放入产卵池中；
[0021]所述的产卵池已消毒，水深0.1?0.25m。
[0022](b)催产药物种类及其剂量:
[0023]剂量和注射方式为:第一针，注射LHRH-A2 0.1?0.15mg/kg+HCG 6000?10000IU/kg，注射部位为胸鳍腋窝处或者背部肌肉，雄鱼不注射。待12?16h后注射第二针，雌鱼剂量为LHRH-A2 0.3?0.4mg/kg+HCG 20000?30000IU/kg，雄鱼第二针注射剂量减半。
[0024]选用IV +期的雌鱼作为繁殖亲鱼时，先在其胸鳍腋窝处注射LHRH-A2,剂量为I μ g/kg。待性腺发育至IV ++期时，按上述方法注射催产针。
[0025]以上所述方案中，LHRH-AjP HCG均现配现用。
[0026]每条鱼的注射量为0.1mL?0.3mL，注射器与鱼体呈45°角注射。
[0027](c)授精方式:
[0028]将注射催产药物后的亲本放入产卵池中，雌雄比例为1:1?2，密度为10?14尾
/m3。
[0029]所述的产卵池中放置少许光滑的小卵石，盆上罩上网片，防止亲鱼跳出产卵池。
[0030](d)亲鱼发情效应时间
[0031]效应时间为14?16h。
[0032]⑷人工孵化:
[0033]将产卵后的亲鱼移出，孵化期间及时剔除长了水霉的卵。
[0034]在此水温下，出苗时间一般为72?76h。
[0035](5)鱼苗(水花)培育:
[0036]将出膜后的鱼苗移入培育池中，出膜后24h即可投喂熟鸡蛋黄，投喂量为1.5?2.0万尾鱼苗投喂半个蛋黄，早晚各一次。三天后投喂小型轮虫、草履虫，10天后投喂浮游动物如小型枝角类。
[0037]经过15?20天的培育，鱼苗从出膜时的0.3?0.4cm长至I?1.3cm时便完成了鱼苗水花阶段的培育。
[0038]以上所述方法中，培育池中鱼苗密度为5 000尾/m2。鸡蛋黄先用120目的尼龙筛絹布过滤。
[0039]以上所述方法中，所述的水质条件均应满足《渔业水质标准》，同时，水温19?21 °C，透明度为0.5?0.7m，溶氧在5?7mg/L范围内，pH = 7.0?7.5，总硬度S 450mg/L(以CaC(U+ )。催产、自产和孵化阶段池中进水流速控制在0.01?0.03m 3/min。
[0040]鱼苗培育阶段的日常管理包括喂食、清污、挑出死鱼、放置空气充氧气栗等。
[0041]本发明中的亲鱼培育池、产卵池及培育池均已消毒，水池消毒采取本领域的常规方式，优选的，消毒采用20ppm的高锰酸钾溶液或者20ppm的聚维酮碘溶液。消毒方法是全池泼洒，浸泡30min后用池水冲洗干净。
[0042]本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果:
[0043]1、西昌高原鳅是我国特有的鱼类，仅在流入四川省安宁河的几条支流中被发现，分布狭窄，生态空间小，资源现存量少，2000年被四川省列为重点保护野生动物名录，本人工繁殖方法的发明并申请专利突显生物多样性保护之意义。迄今为止，未见西昌高原鳅人工繁殖方法公开。
[0044]2、催产药物及其剂量设计科学。在鱼的人工繁殖中，催产药物的选择、配比及其剂量，以及打针注射方式等是最为重要和关键的技术。本发明根据西昌高原鳅生物学特性和生殖生理特征，在人工可控制的水质和培育条件下，对亲鱼采用两针催产，使雌雄鱼性腺发育基本同步。以LHRH_A2+HCG为组合催产药物，以一定的剂量分二次注射的方式获得了理想的催产效果，催产率达到了 100%。该技术在西昌高原鳅的人工繁殖上是首次应用。
[0045]3、授精孵化方式先进。鱼类受精卵的获得主要有两种途径:人工授精和自然产卵授精。申请者反复试验了这两种方法，最后根据西昌高原鳅的生态特性，研究出了在小型池子里(特别的，指塑料盆)进行自产的授精方式，实现了很高的受精率。在本发明实施例1中，受精率为97.2%。并且高的受精率也直接形成了之后的高的孵化率。
[0046]4、生产方式独特。体现在所采用的塑料盆既是产卵池和孵化池，也是鱼苗(水花)培育池，这大大节约了生产或研究成本，减轻了劳动强度，使人工繁殖中各个环节的技术控制变得精确和容易，并有助于鱼苗成活率的提高。该模式在苗种规模化生产中具有较大的实用价值。
[0047]5、鱼苗(水花)的开口饵料投喂方法独特。在鱼的人工繁殖中，鱼苗开口吃食是苗种成活最重要的保证。由于刚出膜的西昌高原鳅全长仅0.4cm，口裂直径0.15cm，常卧于盆底且活动能力较差，因而采用熟鸡蛋黄作为开口饵料，效果较好，待发育至全长为0.7cm左右时