一种杀菌剂组合物及其应用_2

文档序号:9356565阅读:来源:国知局
[0042] 混剂实际毒力指数(ATI)=(标准药剂的LC5。/混剂的LCJ X 100 ;
[0043] 混剂理论毒力指数(TTI) = A剂的TI X混剂有效成分中A的含量+B剂的TI X 混剂有效成分中B的含量;
[0044] 毒力指数(TI)=(标准药剂的LC5。/供试药剂的LC5。)X100(把A剂、B剂中的一 种作为标准药剂);
[0045] A剂、B剂分别为两种相混的活性成分,混剂为A剂和B剂相混后的混合物。
[0046] 测试实施例2为对本发明杀菌剂组合物用于田间试验中时的药效测试。
[0047] 测试实施例1
[0048] 在以下实施例中,A剂为申嗪霉素原药(95% ),B剂为稻瘟酰胺原药(95% ),选择 A剂作为标准药剂,将A剂和B剂分别以各自有效成分的重量为基准,配制成如表1所示的 混剂1至7。
[0049] 测试实施例1. 1水稻稻瘟病室内毒力测定
[0050] 试验靶标:水稻稻瘟病病菌,由中国农业大学农学院实验室提供。
[0051] 药剂配制:分别准确称取如表1所示的7种混剂和2种单剂,每种药剂均用丙酮配 置成母液,并用〇. 1重量%的吐温-80的水溶液将母液稀释成为具一定浓度梯度的系列药 剂。
[0052] 培养基:马铃薯培养基(PDA)。称取200g马铃薯置于2500mL的烧杯内,加入 1000mL蒸馏水煮沸30min,过滤,加入20g葡萄糖和20g琼脂,融化后用蒸馏水补足至 1000mL,分装灭菌(126°C,25min),备用。
[0053] 药剂处理:在无菌操作条件下,根据试验处理将预先融化的灭菌培养基定量加入 到无菌锥形瓶中,再从低浓度到高浓度依次定量吸取上述药液,分别加入上述锥形瓶中,充 分摇匀。然后等量倒入5个直径为9cm的培养皿中,制成不同浓度的含药平板。另设不含 药剂的处理作空白对照(加等量的0. 1重量%的吐温-80水溶液)以及只含有申嗪霉素或 稻瘟酰胺单一成分的效果对照,每一处理重复5次。
[0054] 接种:在无菌操作条件下,将培养3天的水稻稻瘟病原菌用直径5mm的灭菌打孔 器自菌落边缘切取菌饼,用接种器将菌饼接种于含药平板中央,菌丝面朝上,每个培养皿 放1个菌饼,每个浓度重复5次,空白对照同样按上述方法处理。将接种后的培养皿置于 (25 ± 1) °C f旦温培养箱中培养观察。
[0055] 调查与计算:根据空白对照培养皿中水稻稻瘟病菌菌落生长情况,待对照菌落直 径长至大于平皿直径2/3时,用卡尺测量菌落直径(mm)。每个菌落用十字交叉法垂直测量 直径各1次,取其平均值。计算菌丝生长抑制率,再根据浓度对数-菌丝生长抑制率几率值 分析(Bliss)法,用DPS 2000数据处理软件求出毒力回归方程和抑制中浓度(ECJ (半数 效应浓度,引起受试对象50%个体产生一种特定效应的药物剂量)的值。然后根据孙云沛 (Sun-Y-P)介绍的方法,求出不同配比混配剂的共毒系数(CTC),结果见表1。
[0056] 菌落增长直径=菌落直径一菌饼直径
[0057]

[0060] 测试实施例1.2水稻稻曲病室内毒力测定
[0061] 试验靶标:水稻稻曲病病菌,由中国农业大学农学院实验室提供。
[0062] 药剂配制:分别准确称取如表1所示的7种混剂和2种单剂,每种药剂均用丙酮配 置成母液,并用〇. 1重量%的吐温-80的水溶液将母液稀释成为具一定浓度梯度的系列药 剂。
[0063] 培养基:马铃薯培养基(PDA)。称取200g马铃薯置于2500mL的烧杯内,加入 1000mL蒸馏水煮沸30min,过滤,加入20g葡萄糖和20g琼脂,融化后用蒸馏水补足至 1000mL,分装灭菌(126°C,25min),备用。
[0064] 药剂处理:在无菌操作条件下,根据试验处理将预先融化的灭菌培养基定量加入 到无菌锥形瓶中,再从低浓度到高浓度依次定量吸取上述药液,分别加入上述锥形瓶中,充 分摇匀。然后等量倒入5个直径为9cm的培养皿中,制成不同浓度的含药平板。另设不含 药剂的处理作空白对照(加等量的〇. 1重量%的吐温-80水溶液)以及只含有申嗪霉素或 稻瘟酰胺单一成分的效果对照,每一处理重复5次。
[0065] 接种:在无菌操作条件下,将培养3天的水稻稻瘟病原菌用直径5_的灭菌打孔器 自菌落边缘制备碟菌,并将菌碟接入含药平板上,每个浓度重复5次,空白对照同样按上述 方法处理。将接种后的培养皿置于(28±1)°C恒温培养箱中黑暗培养14天。
[0066] 调查与计算:根据空白对照培养皿中水稻稻瘟病菌菌落生长情况,待对照菌落直 径长至大于平皿直径2/3时,用卡尺测量菌落直径(mm)。每个菌落用十字交叉法垂直测量 直径各1次,取其平均值。计算菌丝生长抑制率,再根据浓度对数-菌丝生长抑制率几率值 分析(Bliss)法,用DPS 2000数据处理软件求出毒力回归方程和抑制中浓度(ECJ (半数 效应浓度,引起受试对象50%个体产生一种特定效应的药物剂量)的值。然后根据孙云沛 (Sun-Y-P)介绍的方法,求出不同配比混配剂的共毒系数(CTC),结果见表2。
[0067] 菌落增长直径=菌落直径一菌饼直径
[0068]

[0071] 测试实施例1. 3水稻纹枯病室内毒力测定
[0072] 试验靶标:水稻纹枯病病菌,由中国农业大学农学院实验室提供。
[0073] 药剂配制:分别准确称取如表1所示的7种混剂和2种单剂,每种药剂均用丙酮配 置成母液,并用〇. 1重量%的吐温-80的水溶液将母液稀释成为具一定浓度梯度的系列药 剂。
[0074] 培养基:马铃薯培养基(PDA)。称取200g马铃薯置于2500mL的烧杯内,加入 1000mL蒸馏水煮沸30min,过滤,加入20g葡萄糖和20g琼脂,融化后用蒸馏水补足至 1000mL,分装灭菌(126°C,25min),备用。
[0075] 药剂处理:在无菌操作条件下,根据试验处理将预先融化的灭菌培养基定量加入 到无菌锥形瓶中,再从低浓度到高浓度依次定量吸取上述药液,分别加入上述锥形瓶中,充 分摇匀。然后等量倒入5个直径为9cm的培养皿中,制成不同浓度的含药平板。另设不含 药剂的处理作空白对照(加等量的〇. 1重量%的吐温-80水溶液)以及只含有申嗪霉素或 稻瘟酰胺单一成分的效果对照,每一处理重复5次。
[0076] 接种:在无菌操作条件下,将培养3天的水稻纹枯病原菌用直径5mm的灭菌打孔 器自菌落边缘切取菌饼,用接种器将菌饼接种于含药平板中央,菌丝面朝上,每个培养皿 放1个菌饼,每个浓度重复5次,空白对照同样按上述方法处理。将接种后的培养皿置于 (25 ± 1) °C f旦温培养箱中培养观察。
[0077] 调查与计算:根据空白对照培养皿中水稻纹枯病菌菌落生长情况,待对照菌落直 径长至大于平皿直径2/3时,用卡尺测量菌落直径(mm)。每个菌落用十字交叉法垂直测量 直径各1次,取其平均值。计算菌丝生长抑制率,再根据浓度对数-菌丝生长抑制率几率值 分析(Bliss)法,用DPS 2000数据处理软件求出毒力回归方程和抑制中浓度(ECJ (半数 效应浓度,引起受试对象50%个体产生一种特定效应的药物剂量)的值。然后根据孙云沛 (Sun-Y-P)介绍的方法,求出不同配比混配剂的共毒系数(CTC),结果见表3。
[0078] 菌落增长直径=菌落直径一菌饼直径
[0079]
[0080] 表 3
[0081]
~~从表1至3可以看出,杀菌剂中的活性组分申嗪霉素和稻瘟酰胺的重量比为1 : (0. 1-100)时,对稻瘟病、稻曲病和纹枯病病菌均可实现协同增效作用;且当其重量比为1 : (10-30)时,共毒系数(CTC)在200以上,增效作用更显著。
[0083] 测试实施例2
[0084] 先按照以下实施例及对比例中的配方配置杀菌剂,然后测试其在田间防治水稻稻 瘟病、稻曲病和纹枯病中的效果。其中,申嗪霉素购自上海农乐生物制品股份有限公司;稻 瘟酰胺购自江苏丰登作物保护股份有限公司;木质素磺酸钠购自高唐华东木质素有限公 司;黄原胶购自淄博叶胜实业有限公司;硅酸镁铝购自济南永泰化工有限公司;有机硅消 泡剂购自上海迈图高新材料集团;脂肪醇聚氧乙烯醚购自南京太化化工有限公司;十二烷 基苯磺酸钙购自南京太化化工有限公司;膨润土购自信阳市鑫鼎矿业有限公司;油酸甲酯 购自沧州大洋化工有限责任公司;萘甲醛缩聚物磺酸盐购自上海是大高分子材料有限公 司;十二烷基硫酸钠购自北京泰博鸿化工有限公司;淀粉购自吴江市天翔化工有限公司; 高岭土购自家庄辰兴高岭
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