一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食用菌种植技术领域，具体涉及一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产 量的方法。
【背景技术】
[0002] 常见的食用菌如香菇、平菇、双孢蘑菇等，味道鲜美、口感脆嫩，高蛋白、低脂肪，富 含多种氨基酸，具有丰富的营养和药用保健功能。因其栽培工艺简单、投资少、周期短、效益 好，在我国具有最大的栽培量、最广的栽培范围。传统的栽培方法产量低、品质差，不能满足 市场的需求。因此，如何提高食用菌的产量和品质一直是科研人员的研究热点。
[0003]DNA甲基化是研究最为透彻的表观遗传机制，DNA甲基化抑制基因的转录和表达。 〇嫩甲基化是由0嫩甲基转移酶催化的。5-氮杂胞苷（5-&抑〇 7^乜116,5-六0是常用的0嫩 甲基转移酶抑制剂，可引起DNA的去甲基化，从而造成可遗传性的基因表达改变。用5-AC 处理丝状真菌，可激活沉默的生物合成基因，诱导真菌产生未知的次级代谢产物。5-AC对食 用菌生产的影响尚未见报道。
【发明内容】
[0004] 本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量 的方法。
[0005]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其包括如下步骤： 1) 制备母种：将PDA培养基加热融化，然后冷却至45 - 50°C，加入5-氮杂胞苷溶液至 其终浓度为10 - 100ymol/1，混匀后倒平板，平板凝固后接入平菇天达300菌种，25±3°C 培养至菌丝发满平板，获得母种； 2) 制备栽培种：将步骤1)所得母种接入装有麦粒培养基的培养瓶中，25±3°C培养至 菌丝发满瓶，获得栽培种； 3) 栽培：将栽培培养基装袋，每袋重750g，120 - 125°C灭菌1 一 2h，然后每袋接入步 骤2)所得栽培种22±5g，常规管理出菇和采收。
[0006] 具体的，步骤2)中所述麦粒培养基组成为：麦粒5kg、糖100g、碳酸钙75 - 100g。
[0007]具体的，步骤3)中所述栽培培养基组成为：棉籽壳98%，石膏粉2%，含水量60 - 65%，pH自然。
[0008]和现有技术相比，本发明的有益效果： 本发明在制作平板菌种(也称为母种）时掺入5-氮杂胞苷，利用其引起DNA的去甲基 化，从而造成可遗传性的基因表达改变。用5-AC处理丝状真菌，可激活沉默的生物合成基 因，诱导真菌产生未知的代谢产物，提高菌丝的生物活性，从而显著提高了食用菌的产量。 本发明方法操作简单，效果明显，适合大规模化生产，极具推广应用价值。
【具体实施方式】
[0009] 以下结合实施例对本发明的技术方案作进一步地详细介绍，但本发明的保护范围 并不局限于此。
[0010] 下述实施例中，平菇天达300菌种：购自河南省农业科学院食用菌研究开发中心； 5_氮杂胞苷：购自上海拜力生物科技有限公司。
[0011] ?04培养基：马铃薯(去皮）20(^、葡萄糖2(^、琼脂2(^、水10001111411值自然。
[0012] 麦粒培养基组成为：麦粒5kg、糖100g、碳酸妈80g，具体经下述方法制得：将麦子 洗净后直接放入锅中加热煮沸，煮沸约10分钟后加入糖，继续煮至麦子熟而不烂，透明发 亮，取出滤去水分，摊开晾去表面水分，再放入盆中与碳酸钙拌和均匀后即可。
[0013] 栽培培养基组成为：棉籽壳98%，石膏粉2%，含水量60 - 65%，pH自然。
[0014] 实施例1 一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其包括如下步骤： 1) 制备母种：将PDA培养基加热融化，然后冷却至50°C，加入5-氮杂胞苷溶液至其终 浓度为10ymol/1，混匀后倒平板，平板凝固后接入平菇天达300菌种，25°C培养至菌丝发 满平板，获得母种； 2) 制备栽培种：用直径10mm的打孔器在平板菌种（即步骤1)所得母种）上打块，然后 取一块将其接入装有麦粒培养基的培养瓶中，25°C培养至菌丝发满瓶，获得栽培种； 3) 栽培：将栽培培养基装袋，每袋重750g，121°C灭菌1. 5h，然后每袋接入步骤2)所得 栽培种22g，常规管理出菇和采收。记录满袋天数、现蕾天数及平菇产量，结果见表1。
[0015] 实施例2 一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其步骤1)中5-氮杂胞苷的添加终浓 度为100ymol/1，其它同实施例1〇
[0016] 实施例3 一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其步骤1)中5-氮杂胞苷的添加终浓 度为1mmol/1，其它同实施例1。
[0017] 对照例 生产方法与实施例1不同之处为：不添加5-氮杂胞苷；其它同实施例1。
[0018] 试验结果 由下表1可以看出：当用浓度为10 - 100ymol/1的5-氮杂胞苷处理平菇时，菌丝满 袋时间和现蕾时间比对照提早了 1 一 2天，平菇产量比对照提高了 7. 60 - 8. 45% ;而当用 浓度为lmmol/1的5-氮杂胞苷处理平菇时，菌丝满袋时间和对照变化不大，平菇产量仅比 对照提高了 1.55%。说明5-氮杂胞苷的处理浓度并非越高效果就越好，其推荐处理浓度为 10 - 100ymol/l〇
[0019] 表1不同实施例用5-氮杂胞苷处理后对平菇产量的影响
【主权项】
1. 一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1) 制备母种：将PDA培养基加热融化，然后冷却至45 - 50°C，加入5-氮杂胞苷溶液至 其终浓度为10 - 100 y mol/1，混匀后倒平板，平板凝固后接入平菇天达300菌种，25±3°C 培养至菌丝发满平板，获得母种； 2) 制备栽培种：将步骤1)所得母种接入装有麦粒培养基的培养瓶中，25±3°C培养至 菌丝发满瓶，获得栽培种； 3) 栽培：将栽培培养基装袋，每袋重750g，120 - 125°C灭菌1 一 2h，然后每袋接入步 骤2)所得栽培种22±5g，常规管理出菇和采收。2. 如权利要求1所述利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其特征在于，步骤2) 中所述麦粒培养基组成为：麦粒5kg、糖100g、碳酸钙75 - 100g。3. 如权利要求1或2所述利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其特征在于，步骤 3)中所述栽培培养基组成为：棉籽壳98%，石膏粉2%，含水量60 - 65%，pH自然。
【专利摘要】本发明涉及一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其包括如下步骤：1）制备母种：将PDA培养基加热融化，然后冷却至45－50℃，加入5-氮杂胞苷（5-AC）溶液至其终浓度为10－100μmol/l，混匀后倒平板，平板凝固后接入平菇天达300菌种，25±3℃培养至菌丝发满平板，获得母种；2）制备栽培种：将母种接入装有麦粒培养基的培养瓶中，25±3℃培养至菌丝发满瓶；3）将栽培培养基装袋，每袋重750g，120－125℃灭菌1－2h，然后每袋接入栽培种22±5g，常规管理出菇和采收。该方法用5-AC处理丝状真菌，可激活沉默的生物合成基因，诱导真菌产生未知的代谢产物，提高菌丝的生物活性，从而显著提高了食用菌的产量。
【IPC分类】A01G1/04
【公开号】CN105103961
【申请号】CN201510580535
【发明人】邱立友, 张朝辉, 李慧儒, 范怡苹, 宋安东, 康源春, 袁瑞奇, 孔维丽, 徐柯, 邓柱, 王晓婷
【申请人】河南农业大学
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月14日