灭草烟的组合的形式使用， 比例分别为26. 25和8. 75g每公顷或42和14g每公顷。
[0051] 本发明还涉及一种种植大麦作物的方法，包括播种本发明的种子，并在合适的条 件下培育所述种子和得到的植物来生产作物。
[0052] 优选用作所述作物的抗除草剂大麦通过诱变产生，更优选通过化学诱变产生。
[0053] 所述抗除草剂作物还更优选为 NCHMB 41547、NCHMB 41548、NCHMB 41549、NCHMB 41550、ΜΠΜΒ 41551或其具有抗除草剂特征的植物，或从上述株系衍生而来的植物。
[0054] 下面的非限制性实施例说明本发明。
[0055] 实施例1 :突变体的产生
[0056] 将33. 3kg大麦变种Buloke (大约812195粒种子）浸泡在0· 25%甲基磺酸乙酯 (EMS)中并用鼓风机干燥。亲代Buloke是高产变种，能生产麦芽制造品质的谷物。意外的 是，Buloke适于种植于雀麦草为患的区域。选择此品系，本发明人希望开发可种植于雀麦 草和其他杂草可被咪唑啉酮除草剂防治的条件下可生长的抗咪唑啉酮大麦变种。
[0057] 实施例2 :M1代
[0058] 2006年在澳大利亚维多利亚霍舍姆（Horsham，Victoria，Australia)将来自实施 例1中的诱变大麦种子播种于0. 5公顷的样地中。管理与推荐的用于本地区大麦管理方式 一致。大麦成熟时用试验田收割机收割所述样地。从每个装满种子的容器中拿出300g样 本，并堆积在一起形成代表性的较小混合群（150kg)而剩余的种子堆在一起作为混合样品 (600kg) 〇
[0059] 实施例3 :M2代
[0060] 2007年在澳大利亚维多利亚霍舍姆将来自实施例2的200kg突变大麦种子（大约 488万粒种子）播种于2公顷土地中。用ON DUTY ?以8〇g/ha(活性成分，甲咪唑烟酸 42g+灭草烟14g)的比例喷洒出苗的植株，手工分别收获20株存活植株并保存。
[0061] 实施例4 :初步评估M2选择植株对咪唑啉酮除草剂的抗性
[0062] 鉴定出实施例3中具有最大干物质和种子产量的十株植株并命名 为 BUL0KE-EMS05*06HI001、 BUL0KE-EMS05*06HI002、 BUL0KE-EMS05*06HI003、 BUL0KE-EMS05*06HI004、 BUL0KE-EMS05*06HI005、 BUL0KE-EMS05*06H1006、 BUL0KBE-EMS05*06HI007、 BUL0KE-EMS05*06HI008、 BUL0KE-EMS05*06HI009 和 BUL0KE-EMS05*06HI010〇
[0063] 将每种选择植株的30粒种子播种于温室中的10个盆中（每盆3粒种子）。用 ON DUTY?以5〇g/ha (活性成分，甲咪唑烟酸26. 25g+灭草烟8. 75g)的比例喷洒每种选 择的半数盆，并根据后代的反应以对ON DUTY?的抗性对每种选择植株分类。若植株表 现出未受ON DUTY ?的影响（没有可见症状）则认定其有抗性，若被ON DUTY ?杀死 则认定其易感。
[0064] ?鉴定出以下纯合易感选择植株（在大田筛选中未选出）并停止对其进一步的评 估出1]1!)1^4]^05*06!11001、81]11)1^4]^05*06!11004 和81]11)1^4]^05*06!11008。
[0065] ?鉴定出以下纯合抗性选择植株并将抗性植株聚积在一起进行评 估：BUL0KE-EMS05*06HI002、BUL0KE-EMS05*06HI005、BUL0KE-EMS05*06HI006、 BUL0KE-EMS05*06HI009 和 BUL0KE-EMS05*06HI010。
[0066] ?尽管是对ON DUTY有抗性的纯合植株，但还是就影响植株类型的基因将 BUL0KE-EMS05*06HI009分离，并收获单植株，分别用于进一步评估。
[0067] ?鉴定出杂合易感/抗性选择植株，并收获各个抗性植株，用于进一步评估： BUL0KE-EMS05*06HI003 和 BUL0KE-EMS05*06HI007。
[0068] 选择代表每个原始M2抗性选择植株的纯合抗除草剂株系用于提交至NCHMB和进 一步评估。给这些株系新的较短的名称一一表2所示一一以利于交流：
[0069] 表2 :纯合抗除草剂株系的初始的和新的名称
[0071 ] 实施例5:田间评估对interrtx ?啲耐受性
[0072] a)筛诜对咪晔啉酮除草剂有抗件的纯合株系
[0073] 2007年在澳大利亚维多利亚霍舍姆将在温室（实施例4)中选择的单植株的种子 以5m双行播种并在出苗后以0. 75L/ha喷洒丨ntervix ? (活性成分，咪草啶酸33g/kg+灭 草烟15g/kg)，将可见的未受除草剂影响的行收获并且进一步评估（未出示数据）。鉴定得 到纯合抗咪唑啉酮株系VBHT0803和VBHT0806并提交至NCHMB。
[0074] b)评估对咪晔啉酮除草剂的抗件
[0075] 在2007年和2008年在澳大利亚维多利亚霍舍姆和2008年在澳大利亚新南威尔 士马里纳（Marinna, NSW, Australia)的实验中将突变株系 VBHT0805、VBHT0806 和 VBHT0810 与野生型Buloke和Hindmarsh的咪唑啉酮抗性相比较。在霍舍姆，以裂区设计（split plot design)在2007年用2个重复，2008年用3个重复播种实验样品；并在Marinna，以因子设 计使用3个重复播种实验样品。在霍舍姆，将基因型（选择植株）分配作为副区（subplot)， 而除草剂处理分配作为主区。除草剂处理为：
[0076] ?霍舍姆2007-未施用Intervix?和出苗后以〇· 75L/ha (活性成分，24. 75g咪草 啶酸+11. 25g灭草烟）施用Intervix?
[0077] ?霍舍姆2008 -未施用Intermix?和出苗后以〇· 375L/ha (活性成分，12. 375g 咪草啶酸+5. 625g灭草烟）、0. 75L/ha (活性成分，24. 75g咪草啶酸+11. 25g灭草烟）、1. 5L/ ha (活性成分，49. 5g咪草啶酸+22. 5g灭草烟）施用Intervix?e
[0078] ?马里纳2008年-未施用丨ntervix?和出苗后以〇. 375L/ha(活性成分，12. 375g 咪草啶酸+5. 625g灭草烟）、0. 75L/ha (活性成分，2475g咪草啶酸+11. 25g灭草烟）、1. 25L/ ha (活性成分，41. 25g咪草啶酸+18. 75g灭草烟）施用I ntervix'
[0079] 所有实验的管理除lntervix#條草剂的施用外都与商业惯例一致。用小的样地 收割机收割样地，对种子称重，转换为以t/ha为单位的产量并用REML分析。用已有方法对 来自重复1的未施用丨nter\rix~的500克样品评估其麦芽制造品质（参见实施例10)。
[0080] 与对照处理（未施用Intervix)相比，所有三个实验（表3、4和5)中以所有比例 施用的Intervix?都显著地减少了变种Buloke和Hindmarsh的谷物产量。两种情况下所 有Interval处理的样地中的植物都变黄，生长停止并死亡。相反，与对照处理（未施用 Intervix)相比，当用In奴rvix?以任意比例处理时VBHT0805、VBHT0806或VBHT0810在谷 物产量方面未见明显不同。此外，用丨处理的VBHT0805、VBHT0806或VBHT0810 的样地未见可见的伤害症状。VBHT0805、VBHT0806或VBHT0810都是衍生于用EMS处理的 Buloke，并且与野生型亲代Buloke和栽培种Hindmarsh相比，均对以0. 375L/ha(活性成 分，12. 375g咪草啶酸+5. 625g灭草烟）至1. 5L/ha (活性成分，49. 5g咪草啶酸+22. 5g灭 草烟）的比例施用的Intervix?明显地表现出增强的抗性。
[0081] 实施例6 :田间评估比较咪唑啉酮抗性突变大麦株系与Buloke的产量。
[0082] 在澳大利亚9个地区比较了咪唑啉酮抗性突变株系VBHT0805、VBHT0806或 VBHT0810与Buloke的产量（t/ha)。位于南澳大利亚州的帕斯基维尔（Paskeville)和卡 林顿（Callington)，位于新南威尔士的福布斯（Forbes)、特莫拉（Temora)和朱尼里夫斯 (Junee Reefs)，位于维多利亚的丁布拉（Dimboola)、埃尔莫尔（Elmore)和芒特默瑟（Mt Mercer)，和西澳大利亚的 Northam early 和 late。
[0083] VBHT0805和VBHT0802在所有地区都具有最高产量，比Buloke平均高出4%，表明 诱变过程没有产生显著影响澳大利亚的谷物产量的不利突变。另外，VBHT0806比Buloke产 量低4%。这些结果在表6中显示。
[0084] 实施例7 :咪唑啉酮抗性突变大麦株系和Buloke的形态学和DNA比较
[0085] 将咪唑啉酮抗性突变大麦株系 VBHT0802、VBHT0803、VBHT0805、VBHT0806、 VBHT0807、VBHT0809和VBHT0810与野生型Buloke的的形态学特征和DNA比较。表7描述了 鉴定到的明显不同的形态学和DNA特征，VBHT0803与Buloke不同在于其具有紫芒（purple awn)并且比Buloke矮小但不是矮化植株。VBHT0809有紫芒并且是矮化植株并有匍匐生长 的习性。
[0086] VBHT0805、VBHT0807和VBHT0810具有同样的单体型，显示它们是单一突变事件 的衍生株系。VBHT0802、VBHT0803、VBHT0806和VBHT0809都具有可能是用于诱变的初始 Buloke样本内异质性所致的独特单体型，并显示每种都代表一种独特的抗咪唑啉酮除草剂 变异事件。VBHT0805、VBHT0807和VBHT0810的单体型与Buloke参照样本（VB0105*12)在 1424个单核苷酸多态性（SNP)位点有41个位点不同。
[0087] 实施例8 :咪唑啉酮抗性突变大麦株系的AHAS基因的DNA测序。
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