泽山葡萄园葡萄发病叶片上分离纯化所得，在PDA 斜面上于4°C冰箱培养保存。
[0036]PDA培养基：马铃馨200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml。
[0037]AEA培养基：酵母粉 5g/L，甘油 20血/L,M拆〇4〇. 25g/L，NaN〇36g/L，K化0. 5g/L， KH2PO4I. 5g/l，琼脂粉20旨/1，去离子水IL。
[0038] I. 3试验方法
[00測1. 3. 1药剂配制
[0040] 先用丙酬溶解原药，根据预备实验的结果将适量的两原药配成3个不同配比，再 用丙酬将各处理分别稀释成3个浓度梯度待用，3个有效成分为60%的高效精甲霜灵与締 酷吗嘟不同配比有效成分之比分别为20:40 ;25:35 ;30:30。
[0041] 1.3. 2药剂处理
[0042] 将感染葡萄品种宅配在育苗盆中，置于溫室中培养，植株长至=至四个叶期后，采 集相同叶龄的叶片，用于葡萄霜霉病的测定和培养。
[0043]葡萄霜霉病采用活体植株法在20°C，1化光暗交替的条件下进行培养，每30天转 代培养一下。接种时用无菌水洗脱发病叶片上的分生抱子，配置成浓度为IXlO6个/ml的 抱子悬浮液。
[0044] 1.3. 3供试株敏感性测定
[0045] 采用叶碟保湿法进行毒力测定。先将采集的叶片制备成直径为1. 5cm的叶盘， 试验W不加药剂的处理为空白对照，浸泡结束后，叶子正面朝上摆放于相同浓度药液润湿 的吸水纸上，把叶盘上的药液吸干，将配置好的抱子悬浮液1化接种于叶盘中央，室溫放置 5min后，置于20°C、1化光暗交替的条件下培养，IOd后测定叶盘上的发病面积。
[0046] 在预备试验的基础上，用W上方法分别对单剂高效精甲霜灵与締酷吗嘟进行毒力 测定，二者的ECso分别是8. 3275mg/l和 3. 7421mg/l。
[0047] 根据病斑面积占叶盘面积的百分率划分病级
[004引 0级巧病；
[004引1级：抱子堆面积占整叶面积的5%W下；
[0050] 3级：抱子堆面积占整叶面积的6%-10%W下；
[0051] 5级：抱子堆面积占整叶面积的11%-20%W下；
[005引7级：抱子堆面积占整叶面积的21 % -50%W下；
[005引 9级：抱子堆面积占整叶面积的50%W上。
[0054] 1. 3. 4混剂毒力测定及结果分析
[00巧]用单剂毒力测定方法按照混配比例进行混剂的毒力测定。
[0056] 若对照死亡率巧％，不校正，对照死亡率在5%-20%之间，按公式2进行校正，对 照死亡率>20%，试验需重做。
[0057] W药剂浓度（mg/L)的对数值为自变量X，W校正死亡率的几率值为因变量y，分别 建立毒力回归方程式，采用DPS软件计算单剂及各配比混剂的ECw按照孙云沛方法计算共 毒系数（CTC)。共毒系数CTC，计算公式如下：（W高效精甲霜灵为标准药剂，其毒力指数为 100)：
[005引締酷吗嘟的毒力指数灯I)=高效精甲霜灵的ECs。/締酷吗嘟的ECwX100 [005引 M的真实毒力指数（ATI)=高效精甲霜灵的ECsd/M的ECsdX100
[0060] M的理论毒力指数（TTI)=高效精甲霜灵的TIXP高效精甲霜灵+締酷吗嘟的 TIXP締酷吗嘟
[0061] M的共毒系数（CTC) =M的ATI/M的TTIX100
[0062] 式中：
[0063] M为高效精甲霜灵与締酷吗嘟不同配比的混合物
[0064] P局效精甲霜灵为局效精甲霜灵在混剂中所占的比例
[0065] P締酷吗嘟为締酷吗嘟在混剂中所占的比例。
[0066] 2. 1毒力测定结果
[0067] 表1高效精甲霜灵与締酷吗嘟对葡萄霜霉病的毒力测定
[0069] 从表中可W看出，不同比例配比的试验结果表明，按有效成分比例分别稀释均表 现出较强的增效作用，其中W高效精甲霜灵与締酷吗嘟为20:40 ;25:35 ;30:30的时候增效 效果佳，建议对适宜配比为20:40 ;25:35 ;30:30混配制剂进行进一步的田间药效试验，W 评价其田间实际应用效果。
[0070] 3田间试验防治黄瓜霜霉病，辣椒疫病的实验结果
[0071] 3. 1田间试验防治黄瓜霜霉病
[0072] 3. 1. 1试验方法
[0073] 试验在山东平度市黄瓜地，每小区调查4个点，每点调查2株，用分级法记载发病 程度，分级标准如下：
[0074]O级巧病；
[00巧]1级：抱子堆面积占整叶面积的5%W下；
[007引 3级：抱子堆面积占整叶面积的6% -10%W下；
[0077] 5级：抱子堆面积占整叶面积的11 % -20%W下；
[007引 7级：抱子堆面积占整叶面积的21 % -50%W下；
[0079] 9级：抱子堆面积占整叶面积的50%W上。
[0080] 3. 1. 2调查时间和次数
[0081] 试验共调查4次，药前基数调查、第一次药后7天、第二次药后7天及药后15天进 行调查。
[0082] 3. 1. 3药效计算方法
[0083] 病叶率（％)=病叶数/调查总叶数X100
[0084] 病情指数=E(各级病叶数X相对级数值）/(调查总叶数X9)X100
[0085] 防治效果（％ ) =〔1-(空白对照区药前病情指数X处理区药后病情指数）/(空 白对照区药后病情指数X处理区药前病情指数））X100。
[0086] 3. 1. 4药害调查方法
[0087] 施药后连续7d目测药剂对作物是否有药害。
[0088] 3. 1. 5试验结果及分析
[0089] 各处理防治黄瓜霜霉病的效果（表2)
[0090] 表2各处理防治黄瓜霜霉病的效果
[0092] 从表2中可W看出不同比例的混配药剂，按不同的用量进行试验，药后其对黄瓜 霜霉病的防治均优于对照药剂，杀菌效果随剂量的增加而递增。根据田间目测，在试验剂量 范围内，作物生长正常，各处理药剂均未出现对黄瓜的药害现象，说明其对黄瓜是安全的。 建议与作用机理不同的杀菌剂混合使用W延缓病菌抗药性的产生。
[0093] 3. 2田间试验防治黄瓜疫病
[0094] 试验设在山东省平度市黄瓜种植区，试验田为冬闲块，黄瓜疫病历年发生严重。田 间±壤肥沃，其他条件适中。
[0095] 品种为每处理重复4次，共20个小区，每小区面积30m2,随机区组排列。每小区随 机调查5个点，每点查5株，记录病株数、死株数或明显枯萎的植株数。
[0096] 分级方法：（按症状类型分级）
[0097] 0级：健康无症；
[009引1级她上部仅叶、果有病斑；
[009引 3级她上茎、枝有褐腐斑；
[0100] 5级：茎基部有褐腐斑；
[0101] 7级：地上茎、枝与茎基部均有褐腐斑，并且部分枝条枯死；
[0102] 9级：全株枯死。
[0103] 试验期间共调查4次，即药前病情指数调查，第一次药后7天、第二次药后7天及 药后15天进行调查。
[0104] 病株率（％)=病株数/调查总株数X100
[0105] 病情指数=E(各级病株数X相对级数值）/(调查总株数X9)X100
[0106] 防治效果（％ ) =〔1-(空白对照区药前病情指数X处理区药后病情指数）/(空 白对照区药后病情指数X处理区药前病情指数））X100。
[0107] 施药后连续7d目测药剂对作物是否有药害。
[010引各处理防治黄瓜疫病的效果（表3)
[0109] 表3各处理防治黄瓜疫病的效果
[0112] 由表3可知高效精甲霜灵与締酷吗嘟W25:35比例复配对于黄瓜疫病的防治效果 明显高于高效精甲霜灵与締酷吗嘟单剂复配制剂的效果，其见效快，持效期也较好，为理想 的的防治疫病的药剂，而且对辣椒安全，可有效延缓病菌抗药性的产生。
[0113] 综上所述，本发明含有高效精甲霜灵与締酷吗嘟的杀菌组合物，对葡萄及黄瓜霜 霉病、黄瓜疫病都有很好的防治效果，且其对祀标作物安全。复配制剂不仅提高了防效，而 且扩大了杀菌谱，拓宽使用范围，降低成本，对多种病害起到一药兼治的作用，减轻人力物 力，提高生产效益。所W，本复配制剂的发明与推广对社会具有十分重要的意义。
【主权项】
1. 一种含有高效精甲霜灵与烯酰吗啉的杀菌组合物，其特征在于：该杀菌组合物的有 效成分为高效精甲霜灵与烯酰吗啉二元复配，其余为辅助成分，其中有效成分为60%的高 效精甲霜灵与烯酰吗啉的质量比为20:40 ;25:35 ;30:30。2. 根据权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于：该杀菌组合物的剂型为乳油、悬浮 剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、水乳剂、微乳剂、颗粒剂、微胶囊剂。
【专利摘要】本发明涉及一种含有高效精甲霜灵与烯酰吗啉的杀菌组合物，其有效成分为高效精甲霜灵与烯酰吗啉二元复配。其中总质量分数60％的高效精甲霜灵与烯酰吗啉的质量比为20:40；25:35；30:30，其余为农药中允许使用和接受的辅助成分，本发明所述杀菌组合物的剂型为乳油、悬浮剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、水乳剂、微乳剂、颗粒剂、微胶囊剂。可用于葡萄、黄瓜等多种作物的霜霉病、疫病等药害。
【IPC分类】A01P3/00, A01N43/84, A01N37/46
【公开号】CN105340916
【申请号】CN201510966578
【发明人】葛尧伦, 雷吉新, 司国栋, 陈健, 王世玲
【申请人】青岛奥迪斯生物科技有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年12月19日