一种观赏石榴组培方法及培养基的制作方法
【专利说明】-种观貫石檔组培方法及培养基
[0001]
技术领域
[0002] 本发明属于果树培育农业生物技术领域，尤其设及一种观赏石恼组培方法及培养 基。
【背景技术】
[0003] 观赏石恼花红色，果实红色，是园林绿化中观花、赏果的优良品种。石恼果实既有 很高的经济价值，又有突出的美化作用。观赏石恼果实颜色红色，果实饱满，结果丰盛，数量 多，石恼产量高，果实成熟后不易脱落，能发挥较好的观赏效果，可W长期观赏。因此观赏石 恼的需求急剧增加。目前，观赏石恼的繁殖方式主要W杆插为主，但是，杆插繁殖速度慢，受 季节的影响大，不能形成工厂化、标准化生产，生产的数量少、价格偏高。导致观赏石恼无论 从数量、质量和价格上都不能满足市场需求。组培快繁技术在观赏石恼上的应用大大加快 了幼苗的生产速度，形成工厂化、标准化生产，提高了幼苗的繁殖速度、质量，降低了生产成 本，满足了市场需求。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种观赏石恼组培方法，解决观赏石恼外植体选择、外植 体采集时间、外植体消毒方法、接种、培养室培养、炼苗等方面的技术难点，同时提供一种观 赏石恼培养基，解决快速大量繁殖观赏石恼，弥补传统技术的外植体污染率高、分化率低、 增殖系数低、移栽成活率低、成本高的问题。
[000引本发明是运样实现的， 一种观赏石恼培养基，包括诱导培养基、增殖培养基和生根培养基； 所述诱导培养基包括：1L培养基中含有MS基础培养基各工作液原料、6-节氨基嚷岭 0.6mg/L、糞乙酸0.3mg/L、薦糖 30000mg/L、琼脂10000-15000mg/l; 所述增殖培养基包括：1L培养基中含有MS基础培养基各工作液原料、6-节氨基嚷岭 l.Omg/L、糞乙酸0.3mg/L、薦糖 30000mg/L、琼脂10000-15000mg/l; 所述生根培养基包括：1L培养基中含有1/2MS基础培养基各工作液原料、吗I噪下酸 0.5mg/L、糞乙酸O.lmg/L、薦糖30000mg/L、琼脂10000-15000mg/ L。
[0006]进一步，所述的MS培养基的工作液包括:大量元素、微量元素、肌醇、有机溶液和铁 盐； 所述大量元素包括硝酸锭N也N03、硝酸钟KN03、氯化巧化Cl2 · 2也0、硫酸儀MgS化· 7也0 和憐酸二氨钟K也Κ)4 ; 所述微量元素包括舰化钟ΚΙ、棚酸也Β03、硫酸儘MnS〇4 · 4也0、硫酸锋aiS〇4 · 7也0、钢酸 钢Na2Mo〇4 · 2也0、硫酸铜CuS〇4 · 5也0和氯化钻CoCh · 6也0; 所述有机溶液包括烟酸、盐酸化唉醇和甘氨酸； 所述铁盐包括化s化· 7出ο和化2-邸ΤΑ · 2出ο。
[0007] 进一步，所述的MS培养基的工作液浓度为：硝酸锭Ν此Μ)3 1650 mg/L、硝酸钟KW)3 1900mg/L、氯化巧CaCl2 · 2此0 440mg/L、硫酸儀MgS〇4 · 7此0 370mg/L、憐酸二氨钟KH2PO4 170mg/l; 舰化钟ΚΙ 0.83mg/L、棚酸出B03 6.2mg/L、硫酸儘MnS〇4.4H2〇 22.3mg/L、硫酸锋 aiS〇4 · 7出0 8.6mg/L、钢酸钢Na2Mo〇4 · 2出0 0.25mg/L、硫酸铜CuS〇4 · 5出0 0.0025mg/L和 氯化钻CoCl2 · 6出Ο 0.0025mg/L; 肌醇：lOOmg/L; 烟酸0.5mg/L、盐酸化唉醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.5mg/L、甘氨酸2. Omg/L; FeS〇4 · 7出0 27.8mg/L、化2-邸ΤΑ · 2出0 37.3mg/L。
[000引进一步，所述诱导培养基抑值5.8-6.0，增殖培养基抑值5.8-6.0，生根培养基抑 值5.8-6.0。
[0009] 本发明另一目的在于提供一种利用观赏石恼培养基进行观赏石恼组培的方法，该 观赏石恼组培方法包括： 步骤一，在植物早春发芽时连续3天无雨后，采集健壮的无病虫害观赏石恼的嫩茎段， 作为组织培养的外植体，将采集到的外植体用洗衣粉水清洗干净，再放在流水下冲洗 30min，在超净工作台上于培养皿中用75%酒精消毒10-60S，再用无菌水冲洗3-5遍，之后用 质量百分比为0.1%的升隶消毒3-lOmin，无菌水冲洗3-5遍； 步骤二，将消毒后的外植体接种到诱导培养基上，送入培养室进行无菌培养，培养基为 MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.3mg/L+薦糖 30000mg/L+琼脂 10000-15000mg/l;经诱导分化后，得到 分化苗，将分化苗转移到增殖培养基中进行增殖培养，得到大量分化苗幼苗，增殖培养基为 MS+6-BA1. Omg/L+NAAO. 3mg/L+薦糖 30000mg/L+琼脂 10000-15000mg/l; 步骤Ξ，将分化苗幼苗接种在生根培养基中进行生根培养，生根培养基为1/2MS+ 18八0.5111旨/1+酷40.1111旨/1+薦糖30000111旨/1+琼脂10000-15000111旨/1，暗培养8-14(1，再光照培 养3周，得到扎根的组培苗； 步骤四，将扎根后的组培苗炼苗3-5d，移栽到赔石为基质的栽培盘中在拱棚内锻炼，当 组培苗移栽成活后40-60d，移栽到大田中。
[0010] 本发明提供的观赏石恼组培方法及培养基相对于现有技术具有的优点和进步在 于： 本发明方法提高了观赏石恼的繁殖系数，弥补了传统杆插繁殖技术的一些不足，如降 低了外植体的污染率、提高了诱导分化苗及继代增殖的繁殖系数，移栽成活率也大大提高， 增加了观赏石恼繁殖数量，加快了繁殖速度。外植体采集、消毒效果、超净工作台转接效果、 无菌培养室培养效果、生根诱导效果、生根苗移栽效果、幼苗扩大繁殖速度等均优于其它观 赏石恼的杆插繁殖技术，所建立的规模化、工厂化、标准化育苗体系稳定，生产周期短，加快 观赏石恼的繁殖速度，打破繁殖的季节、种性的限制。本发明的组培配方是观赏石恼大量扩 大繁殖的最佳组合配方，可W快速大量繁殖观赏石恼幼苗，满足市场需求。
【附图说明】
[0011] 图1是本发明实施例提供的观赏石恼组培方法流程图； 图2是本发明实施例提供的观赏石恼培养基分类示意图。
[0012]图中：1、观赏石恼培养基;2、诱导培养基;3、增殖培养基;4、生根培养基。
【具体实施方式】
[001引为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，W下结合实施例，对本发明 进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用W解释本发明，并不用于 限定本发明。
[0014] 下面结合附图对本发明的应用原理作进一步描述： 如图1: 一种利用观赏石恼培养基进行观赏石恼组培的方法，该观赏石恼组培方法包 括： S101，在植物早春发芽时连续3天无雨后，采集健壮的无病虫害观赏石恼的嫩茎段，作 为组织培养的外植体，将采集到的外植体用洗衣粉水清洗干净，再放在流水下冲洗30min， 在超净工作台上于培养皿中用75%酒精消毒10-60S，再用无菌水冲洗3-5遍，之后用质量百 分比为0.1%的升隶消毒3-lOmin，无菌水冲洗3-5遍； S102，将消毒后的外植体接种到诱导培养基上，送入培养室进行无菌培养，培养基为MS +6-BA0.6mg/L+NAA0.3mg/L+薦糖 30000mg/L+琼脂 10000-15000mg/l;经诱导分化后，得到分 化苗，将分化苗转移到增殖培养基中进行增殖培养，得到大量分化苗幼苗，增殖培养基为MS +6-BA1. Omg/L+NAAO. 3mg/L+薦糖 30000mg/L+琼脂 10000-15000mg/l; 5103, 将分化苗幼苗接种在生根培养基中进行生根培养，生根培养基为1/2MS + 18八0.5111旨/1+酷40.1111旨/1+薦糖30000111旨/1+琼脂10000-15000111旨/1，暗培养8-14(1，再光照培 养3周，得到扎根的组培苗； 5104, 将扎根后的组培苗炼苗3-5d，移栽到赔石为基质的栽培盘中在拱棚内锻炼，当组 培苗移栽成活后40-60d，移栽到大田中。
[0015] 如图2:-种观赏石恼培养基，该观赏石恼培养基1包括诱导培养基2、增殖培养基3 和生根培养基4; 所述诱导培养基2包括：1L培养基中含有MS基础培养基各工作液原料、6-节氨基嚷岭 0.6mg/L、糞乙酸0.3mg/L、薦糖 30000mg/L、琼脂10000-15000mg/l; 所述增殖培养基3包括:1L培养基中含有W上MS基础培养基各工作液原料、6-节氨基嚷 岭l.Omg/L、糞乙酸0.3mg/L、薦糖 30000mg/L、琼脂10000-15000mg/l; 所述生根培养基4包括：1L培养基中含有W上1/2MS基础培养基各工作液原料、吗I噪下 酸0.5mg/L、糞乙酸O.lmg/L、薦糖 30000mg/L、琼脂10000-15000mg/L。
[0016] 所述诱导培养基2抑值5.8-6.0，增殖培养基3 pH值5.8-6.0，生根培养基4 pH 值5.8-6.0。
[0017]所述MS培养基的工作液包括:大量元素、微量元素、肌醇、有机溶液和铁盐， 所述大量元素包括硝酸锭N出N03、硝酸钟KN03、氯化巧化C12 · 2此0、硫酸儀MgS化· 7出0 和憐酸二氨钟K出Κ)4 ; 所述微量元素包括舰化钟ΚΙ、棚酸出Β03、硫酸儘MnS〇4 · 4出0、硫酸锋aiS〇4 · 7出0、钢酸 钢Na2Mo〇4 · 2出0、硫酸铜CuS〇4 · 5出0和氯化钻CoCl2 · 6出0; 所述有机溶液包括烟酸、盐酸化唉醇和甘氨酸； 所述铁盐包括化s化· 7出ο和化2-邸ΤΑ · 2出ο。
[0018] 所述MS培养基的工作液浓度为：硝酸锭畑2Μ)3 1650 mg/L、硝酸钟ΚΝ化1900mg/L、 氯化巧CaCl2 · 2出0 440mg/L、硫酸儀MgS〇4 · 7出0 370mg/L、憐酸二氨钟K出P〇4 170mg/l; 舰化钟ΚΙ 0.83mg/L、棚酸出B03 6.2mg/L、硫酸儘MnS〇4.4H2〇 22.3mg/L、硫酸锋 aiS〇4 · 7出Ο 8.6mg/L、钢酸钢Na2Mo〇4 · 2出Ο 0.25mg/L、硫酸铜CuS〇4 · 5出Ο 0.0025mg/L和 氯化钻CoCl2 · 6出Ο 0.0025mg/L; 肌醇：lOOmg/L; 烟酸0.5mg/L、盐酸化唉醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.5mg/L、甘氨