一种黄花狸藻的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种黄花狸藻的快速繁殖方法。
【背景技术】
[0002]黄花狸藻(Utricularia aurea Lour.)为狸藻科，一年生草本植物。多生长在水田中或静水池塘的浅水地方。在大型水体上设置立体绿化或水面绿化的区域种植，可增加水体的景观多样性。但其栽培较难，要求水质清洁，无污染。为了防止黄花狸藻野生资源灭绝，保证黄花狸藻资源的可持续利用，需要对黄花狸藻进行种苗繁育技术研究，以保障充足的种苗为园林水体景观大规模使用。现有技术中未见黄花狸的组织培养技术报到。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种黄花狸藻的快速繁殖方法，能够有效快速地生产黄花狸藻种苗，实现黄花狸藻种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。
[0004]本发明通过以下技术方案达到上述目的:一种黄花狸藻组培苗的快速繁殖方法，包括以下步骤:
[0005](1)外植体的选择与消毒:取黄花狸藻的枝叶作为外植体，依次用2￥八％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升0.lv/v%升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水，
[0006](2)获得无菌试管苗步骤(1)得到的外植体在超净工作台上接种到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天，后获得无菌试管苗，其中培养基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
[0007](3)试管苗快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗，其中MS繁殖培养基中添加1.0-3.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.3-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
[0008](4)炼苗与移栽:步骤(3)获得的试管苗，在室温为20_30°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入自来水至容积的2/3，炼苗2-4天，洗净培养基，移植至水草水簇箱。
[0009]本发明的突出优点在于:
[0010](1)采用组织培养技术繁育黄花狸藻种苗具有繁殖速度快、种苗质量均一，且不受时间、空间、季节限制等突出优点，缩短了种苗繁育周期，提高了种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。
[0011](2)采用本发明所述的培养方法得到的黄花狸藻试管苗繁殖系数达到30-50倍，移植至水草水簇箱成活率达到95-98 %。
【具体实施方式】
[0012]下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。
[0013]实施例1
[0014]本发明所述黄花狸藻的快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤:
[0015](1)外植体的选择与消毒:取黄花狸藻的枝叶作为外植体，依次用27八％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升0.lv/v%升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水，
[0016](2)获得无菌试管苗步骤(1)得到的外植体在超净工作台上接种到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天，后获得无菌试管苗，其中培养基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
[0017](3)试管苗快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗，其繁殖系数达到30倍，其中MS繁殖培养基中添加1.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.3mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
[0018](4)炼苗与移栽:步骤(3)获得的试管苗，在室温为20_30°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入自来水至容积的2/3，炼苗2-4天，洗净培养基，移植至水草水簇箱，成活率达到95 %。
[0019]实施例2
[0020]本发明所述黄花狸藻的快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤:
[0021](1)外植体的选择与消毒:取黄花狸藻的枝叶作为外植体，依次用27八％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升0 Λν/ν%升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水，
[0022](2)获得无菌试管苗步骤(1)得到的外植体在超净工作台上接种到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天，后获得无菌试管苗，其中培养基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
[0023](3)试管苗快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗，其繁殖系数达到50倍，其中MS繁殖培养基中添加2.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、
0.3mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.5mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为
5.8ο
[0024](4)炼苗与移栽:步骤(3)获得的试管苗，在室温为20_30°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入自来水至容积的2/3，炼苗2-4天，洗净培养基，移植至水草水簇箱，成活率达到98 %。
[0025]实施例3
[0026]本发明所述黄花狸藻的快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤:
[0027](1)外植体的选择与消毒:取黄花狸藻的枝叶作为外植体，依次用2￥八％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升Ο.lv/v%升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水，
[0028](2)获得无菌试管苗步骤(1)得到的外植体在超净工作台上接种到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天，后获得无菌试管苗，其中培养基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
[0029](3)试管苗快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗，其繁殖系数达到43倍，其中MS繁殖培养基中添加2.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.5mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
[0030](4)炼苗与移栽:步骤(3)获得的试管苗，在室温为20_30°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入自来水至容积的2/3，炼苗2-4天，洗净培养基，移植至水草水簇箱，成活率达到97 %。[0031 ] 实施例4
[0032]本发明所述黄花狸藻的快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤:
[0033](1)外植体的选择与消毒:取黄花狸藻的枝叶作为外植体，依次用27八％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升0 Λν/ν%升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水，
[0034](2)获得无菌试管苗步骤(1)得到的外植体在超净工作台上接种到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天，后获得无菌试管苗，其中培养基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
[0035](3)试管苗快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗，其繁殖系数达到39倍，其中MS繁殖培养基中添加3.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、
0.5mg/L的吲哚乙酸IAA、1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为
5.8ο
[0036](4)炼苗与移栽:步骤(3)获得的试管苗，在室温为20_30°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入自来水至容积的2/3，炼苗2-4天，洗净培养基，移植至水草水簇箱，成活率达到96.3%。
【主权项】
1.一种黄花狸藻的快速繁殖方法，其特征在于:该方法包括以下步骤: (1)外植体的选择与消毒:取黄花狸藻的枝叶作为外植体，依次用2v/v%洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了 2-3滴吐温-20的100毫升0.1￥八％升汞消毒8-lOmin、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水， (2)获得无菌试管苗步骤(1)得到的外植体在超净工作台上接种到MS+1.0mg/L6-BA+.0.5mg/LNAA培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天，获得无菌试管苗，其中培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8， (3)试管苗快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗，其中MS繁殖培养基中添加1.0-3.011^/1的苄基腺嘌呤6-84、0.1-0.511^/1的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.3-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8， (4)炼苗与移栽:步骤(3)获得的试管苗，在室温为20-30°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入自来水至容积的2/3，炼苗2-4天，洗净培养基，移植至水草水簇箱。
【专利摘要】一种黄花狸藻的快速繁殖方法，包括如下步骤：(1)取黄花狸藻枝叶为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体接种到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培养基上诱导发芽得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗分株置于繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得大量试管苗；(4)将试管苗进行炼苗后移植至水草水簇箱。采用本发明所述的繁殖方法黄花狸藻试管苗繁殖系数达到30-50倍，移植至水草水簇箱成活率达到95-98％，有效解决了黄花狸藻的规模化育苗问题。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105475134
【申请号】CN201510860634
【发明人】李林轩, 韦坤华, 韦范, 缪剑华, 李翠, 韦莹, 王一诺, 肖东
【申请人】广西壮族自治区药用植物园
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年11月30日