一种促进园林植物生长的保健液的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于园林农业领域，具体涉及从一种促进园林植物生长的保健液。
【背景技术】
[0002] 蚌兰叶为鸭跖草科植物紫万年青的叶。春、秋均可采收，晒干或鲜用。
[0003] 原植物紫万年青为多年生草本，高50cm。茎较粗壮，肉质。节密生，不分枝。叶基生， 密集覆瓦状，无柄；叶片披针形或舌状披针形，长10-30cm，宽2-6cm，先端渐尖，基部扩大成 鞘状抱茎，上面暗绿色，下面紫色。聚伞花序生于叶的基部，大部藏于叶内；苞片2，蚌壳状， 大而扁，长3-4cm，淡紫色，包围花序，花多而小，白色;萼片3,长圆状披针形，分离，花瓣状； 花瓣3，分离，卵圆形;雄蕊6，花丝被长毛;子房3室。蒴果2-3室，室背开裂。花期5-7月。
[0004] 我国南方各地可露天种植，其他地区多温室栽培。
[0005] 目前尚未有报道证明蚌兰叶中具有促进园林植物生长的化合物。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种促进园林植物生长的保健液，该保健液中的活性成分是 一种从蚌兰叶提取分离得到的结构新颖的化合物，该化合物为首次报道。
[0007] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0008] -种促进园林植物生长的保健液，含有下述结构式的化合物(I)，
[0010] 进一步地，所述促进园林植物生长的保健液中所述化合物（I)的浓度为40~160μ g/ml〇
[0011] 所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将干燥的蚌兰叶粉碎，用75 ~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的 正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙酸 乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙醇洗脱8个柱体积， 收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏 用正相硅胶分离，依次用体积比为90 :1、65:1、30:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱 得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、15:1和5: 1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相 硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗 脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0012]进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0013] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为80%。
[0014] 所述的保健液在促进园林植物生长方面的应用。
[0015] 本发明的优点：
[0016] 本发明提供的促进园林植物生长的保健液中的活性成分是一种从蚌兰叶提取分 离得到的结构新颖的化合物，该化合物为首次报道，可以显著促进园林植物生长，安全无污 染。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0018] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0019] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0020] 制备方法：（a)将干燥的蚌兰叶（500g)粉碎，用80%乙醇热回流提取，合并提取液， 浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂， 先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙醇洗脱8个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓 缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积 比为90:1 (8个柱体积）、65:1 (8个柱体积）、30:1 (6个柱体积）、15:1 (8个柱体积)和1:1 (5个 柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分 离，依次用体积比为25:1 (8个柱体积）、15:1 (10个柱体积)和5 :1 (6个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用 体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩 得到纯的化合物（1)(5.3g)。
[0021] 结构确证：
[0022] 淡黄色针晶，HR-ESMS显示[M+H]+为m/z 295.1458,结合核磁特征可得分子式为 C18H18N2〇2，不饱和度为 11。核磁共振氢谱数据δΗ(ρρπι，CDC13，500MHz):H-3(4.08，br，s)，H-5 (3.49，d，J = 6.3Hz)，H-6a(3.39，dd，J=16.2,6.3Hz)，H-6b(2.64，d，J = 16.2Hz)，H-9 (7.48，d，J = 8.2Hz)，H-10(7.12，td，J = 8.2，1.3Hz)，H-ll(7.24，td，J = 8.2，1.3Hz)，H-12 (7.32，d，J = 8.2Hz)，H-14a(2.29，d，J=13.6Hz)，H-14b(2.25，d，J=13.6Hz)，H-17(5.13， s，2H)，NrMe (3 · 66，s)NfMe (2 · 43，s);核磁共振碳谱数据δ。(ppm，CDC13，125MHz): 134 · 3 (C， 2-C)，53.1(CH，3-C)，62.8(CH，5-C)，24.6(CH2,6-C)，107.5(C，7-C)，128.2(C，8-C)，119.4 (CH，9-C)，120.5(CH，10-C)，122.7(CH，n-C)，109.7(CH，12-C)，131.8(C，13-C)，34.2(CH2， 14-C)，124.5(C，15-C)，147.1(C，16-C)，72.3(CH2，17-C)，177.8(CH2，18-C)，30.4(CH 3，Ni-1^，39.4(013，仏-16)。红外波谱中在1665〇11_1尖锐吸收峰是由该化合物中的€^-不饱和内 酯基团产生;且UV谱图表明在227nm与285nm有紫外吸收，显示该化合物含有吲哚发色基团 。 13C-WR、DEPT和HSQC谱中显示有18个碳信号，包括两个甲基，三个亚甲基，六个次甲基，以 及七个季碳；以上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为五环结构。1Η-匪R谱与DEPT谱 显示一组无取代吲哚片段的质子信号知-97.48(lH，d，J = 8.2Hz)JH-1Q7.12(lH，td，J = 8.2， 1·3Ηζ)、δΗ-117.24(1!1汀(1，了 = 8.2，1.3抱）与3[1-127.32(1!1，(1，了 = 8.2抱）；两个1013质子信号 3!13.66(3!1，8，沁-]\^)与2.43(3!1，8，仏-]^) ;一对移向低场的连氧亚甲基质子信号511-175.13 (2!1，8) ;两组亚甲基质子信号3(1-633.39(1!1，(1(1，了=16.2,6.3取）与31^2.64(1!1，(1，了 = 16·2Ηζ)以及δΗ-14a 2.29(lH，d，J=13.6Hz)与δΗ-14b 2.25(lH，d，J=13.6Hz)〇13C NMR谱显示 该化合物中存在α，β_不饱和内酯结构环片段δ。-15124.5(C)Jc- 16147.1(C)Jc-18177.8(C)与 δ〇-1772.3(〇12)，吲哚结构片段3。-2134.3(〇、3。- 7107.5(〇、3。-8128.2(〇、3。-9119.4(〇1)、 Sc-10120·5(α〇、δ。-η122·7(α〇、δ。- 12l〇9.7(CH)与 δ。-13131.8(C)，两个甲基信号 SC30.4(CH3， N!-Me)与39.4(CH3，N4_Me)。另外COSY与HSQC波谱数据揭示该化合物中含有-NCHCH2-结构片 段(-N4_C 5-C6-y 与-N4-C3-CW-)。进一步分析 HMBC 谱，H-14a、H-14b、H-17 与 C-18 的相关性确 证了结构中存在α，β-不饱和内酯结构环片段，同时，通过HMBC谱中H-5与C-3，C-7和C-17、 H2-14与C-131-Me与C-2和C-13相关信号，可构建该化合物的相关碳氢连接方式。N0ESY谱 中，H-3与H-5的相关信号表明两者构型一致，为α构型。
[0023]综合氢谱、碳谱、HMBC谱和N0ESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定 该化合物如下式所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致，化学 结构及碳原子编号见下式：
[0025] 实施例2:促进园林植物生长的保健液的制备与效果
[0026] 先用适量的溶剂DMS0溶解化合物（I )，再用自来水稀释至所需浓度。化合物（I)的 浓度为lOOng/ml，在40~160μg/ml之间均可。
[0027] 使用方法:一个星期喷洒两次。
[0028] 以园林常见植物(红掌和香樟）的叶长、叶宽、叶片鲜重增长量和叶片干重增长量 作为考察指标，试验组一个星期喷洒两次本发明提供的保健液，对照组喷洒等量的自来水， 观察一个月。结果，试验组的叶长增长量比对照组高出45%，叶宽增长量比对照组高出 43%，叶片鲜重增长量比对照组高出52%，叶片干重增长量比对照组高出55%。
[0029] 上述结果表明，本发明提供的保健液具有促进园林植物生长的作用。
[0030] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种促进园林植物生长的保健液，其特征在于:含有下述结构式的化合物（I)， 2. 根据权利要求1所述的促进园林植物生长的保健液，其特征在于:所述化合物（I)的 浓度为40~160μg/ml。3. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于包含W下操作步骤：（a)将干燥 的蛛兰叶粉碎，用75~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙 酸乙醋和水饱和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物； (b)步骤(a)中乙酸乙醋萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙 醇洗脱8个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（C)步骤(b)中 75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为90:1、65:1、30:1、15:1和1:1的二氯甲 烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(C)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比 为25:1、15:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烧 基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个 柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。4. 根据权利要求3所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为AB-8型 大孔吸附树脂。5. 根据权利要求3所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述用乙醇热回流提取 采用的乙醇浓度为80 %。6. 权利要求1所述的保健液在促进园林植物生长方面的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种促进园林植物生长的保健液，本发明提供的保健液中含有一种从蚌兰叶提取分离得到的结构新颖的化合物，该化合物为首次报道，可以显著促进园林植物生长，安全无污染。本发明还提供了该化合物的制备方法，包括将干燥的蚌兰叶粉碎、乙醇热回流提取、溶剂液液萃取、乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂、正相硅胶和反相硅胶分离等步骤，得率高，成本低。
【IPC分类】A01N43/90, C07D491/22, A01P21/00
【公开号】CN105557718
【申请号】CN201610141311
【发明人】石鸿娟
【申请人】石鸿娟
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年3月11日