一种外施亚精胺对蓝莓抗旱影响的实验方法
【专利说明】
【技术领域】
[0001]本发明涉及蓝莓抗旱影响研究的技术领域，特别涉及一种外施亚精胺对蓝莓抗旱影响的实验方法。
【【背景技术】】
[0002]蓝莓又名越橘，是杜鹃花科，越橘属丛生灌木，小型浆果，有较高经济价值，其果实为蓝色或红色，果肉细腻，具清香味，鲜食风味极佳。除鲜食外，还可加工成果酒、果汁饮料、果酱、蜜饯、糖果等各种加工产品。果实中除含有糖、酸、VC和丰富的矿质元素外，还含有其它果品中含量很少的特种营养成分，如熊果甙、黄酮类化合物、维生素E、维生素A等。据美国科学家研究表明，蓝莓果实具有强心、延缓脑神经衰老及抗癌等独特功效。蓝莓因其丰富的营养成分而被联合国粮农组织列为五大健康水果之一。但是蓝莓是浅根系植物，根系主要集中分布在O?20cm的土层内，蓝莓因其不发达的根系，不能利用深层土壤水分导致了蓝莓很容易受到干旱的影响。
[0003]多胺是一类存在于生物体具有很强生理活性的低分子脂肪族含氮碱，在高等植物体中主要有腐胺(Putrescine，Put)、亚精胺(Spermidine，Spd)和精胺(Spermine，Spm)等。在生物体内多胺以游离态、结合态和束缚态三种形态存在，并且作为代谢产物参与了生物的整个生命活动。亚精胺(Spd)是多胺的一种，在生物体内不仅作为直接的胁迫保护物质，而且在胁迫信号转导中作为信号分子参与植物胁迫抗性机制的构建。为了增强蓝莓的抗旱性能，因此有必要提出一种外施亚精胺对蓝莓抗旱影响的实验方法。
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【发明内容】
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[0004]本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种外施亚精胺对蓝莓抗旱影响的实验方法，其旨在解决现有技术中蓝莓种植由于蓝莓易受到干旱的影响，抗旱性能较低，蓝莓结果率较低的技术问题。
[0005]为实现上述目的，本发明提出了一种外施亚精胺对蓝莓抗旱影响的实验方法，包括如下步骤:
[0006]步骤一、材料准备:
[0007]选择一年生高丛蓝莓植株作为实验材料，大小高矮均相似，并且结构完整，无病虫害、机械损伤和药剂喷施等情况。于实验开始前6个月移栽到大棚内部进行人工可控化管理，以适应大棚条件为主要目的。
[0008]步骤二、设定处理:
[0009]将通过步骤一准备好的蓝莓植株均用同一营养配比的土壤进行移栽，移栽之前，每一盆泥土在都需要进行浇水直至没有水滴滴落重量不再变化为止，然后进行称重，在种植好蓝莓植株之后再进行称重，所得差值为蓝莓植株重量，并将所有的蓝莓植株盆栽移至大棚内部进行人工可控化管理，以适应大棚条件为主要目的，大棚温度控制在25?30°C之间，湿度90%，光照适宜，常规养护6个月后进行试验，包括对照组共设以下6种处理:
[0010]①正常浇水，盆栽土壤水分含量为田间持水量的75%?80% ;
[0011]②正常浇水+喷施lmmol/L Spd；
[0012]③中度干旱，盆栽土壤水分含量为田间持水量的45%?50%;
[0013]④中度干旱+喷施lmmol/L Spd；
[0014]⑤重度干旱，盆栽土壤水分含量为田间持水量的20%?25%;
[0015]⑥重度干旱+喷施lmmol/L Spd；
[0016]处理方法:
[0017]将所有蓝莓植株盆栽分成6组，每组对应一种处理，根据移栽泥土的饱和田间持水量计算出每一个盆栽的相应重量控制范围，当盆栽含水量达到实验所需条件时，开始进行采样，采样时间为下午五点钟，采样好之后于下午五点半进行称重补水以及喷施Spd，喷施Spd的时候用小型喷雾器，以叶面和叶背面上附满小水滴不滴落为准，对照组喷施相对应的水为对照。
[0018]步骤三、含量及参数测定:
[0019]经过步骤二的处理后，以O天、2天、5天、9天、16天为实验采样时间，对每组的蓝莓植株进行采样，并测定采样后的每株蓝莓植株的叶片相对含水量、叶片相对电导率、比叶重、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖含量、光和速率、保护酶活性、激素含量。
[0020]测定方法:
[0021]叶片相对含水量测定:参照张志良等的方法测定，即得相对含水量=(Wf叶片鲜重-Wd叶片干重)/(Wt叶片饱和湿重-Wd) X 100% ;
[0022]叶片相对电导率测定:采用浸泡法测定相对电导率，相对电导率=Rl浸泡电导率/R2加热后电导率X 100% ；
[0023]比叶重测定:采用单位面积干重法测定比叶重；
[0024]丙二醛(MDA)含量测定:采用硫代巴比妥酸法测定MDA含量；
[0025]可溶性糖含量测定:采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量；
[0026]光合速率测定:采用L1-6400型光合仪测定蓝莓叶片光合速率；
[0027]保护酶活性测定:超氧化物歧化酶(SOD)活性采用四氮唑蓝(NBT)光还原法测定，过氧化物酶(POD)活性采用愈创木酚法测定；
[0028]激素含量测定:采用酶标仪法测定激素含量以及多胺含量。
[0029]步骤四、数据分析:
[0030]对经过步骤三测定的6种处理下的每株蓝莓植株的各项数据进行处理并统计分析，通过对比分析得出实验结论。
[0031]作为优选，所述的步骤一中大棚温度控制在25?30°C之间，湿度90%，光照适宜。
[0032]作为优选，所述的步骤二中的土壤的营养配比为泥土:营养基质=2:1。
[0033]作为优选，所述的步骤二中每一个盆栽的相应重量控制范围为盆栽重量-盆栽重量X田间持水量+盆栽重量X田间持水量X对应干旱程度+蓝莓植株重量。
[0034]本发明的有益效果:与现有技术相比，本发明提供的一种外施亚精胺对蓝莓抗旱影响的实验方法，步骤合理，实验条件控制精准，设置三种不同的实验干旱条件(正常水分、中度干旱、重度干旱)，以喷施和不喷施lmmol/L的亚精胺作为实验条件处理，并进行蓝莓植株的叶片相对含水量、叶片相对电导率、比叶重、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖含量、光和速率、保护酶活性、激素含量测定，通过各项数据分析后，得出在同一胁迫条件下喷施亚精胺能够增强蓝莓在干旱条件下的光合速率;提高植株体内抗氧化酶的活性(SOD和POD)以及降低丙二醛(MDA)的含量;降低植株细胞可溶性糖含量的累积;诱导降低生长素(IAA)和脱落酸(ABA)含量，提高赤霉素(GA)含量和体内多胺含量;此外亚精胺的喷施对于改善干旱条件下蓝莓的叶片相对含水量、比叶重、相对电导率都有着很明显的作用，对蓝莓植株的抗旱性能的研究提供了指导性帮助，为蓝莓植株的高产提供了重要的依据。
[0035]本发明的特征及优点将通过实施例结合附图进行详细说明。
【【附图说明】】
[0036]图1是不同干旱胁迫下Spd对叶片相对含水量的影响分析图；
[0037]图2是不同干旱胁迫下Spd对叶片可溶性糖含量的影响分析图；
[0038]图3是不同干旱胁迫下Spd对叶片光合速率的影响分析图；
[0039]图4是不同干旱胁迫下Spd对叶片比叶重的影响分析图；
[0040]图5是不同干旱胁迫下Spd对叶片SOD活性的影响分析图；
[0041 ]图6是不同干旱胁迫下Spd对叶片POD活性的影响分析图；
[0042]图7是不同干旱胁迫下Spd对叶片MDA含量的影响分析图；
[0043]图