一种防治桃树黑星病的天然杀菌剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种防治桃树黑星病的天然杀菌剂及其制备方法。该天然杀菌剂由小檗碱提取物6?10重量份、垂盆草提取物1?5重量份、防冻液甘油、防腐剂乙醇、水，超声混合而成；该天然杀菌剂中小檗碱的含量为5％。其制备方法包括以下步骤：(1)提取垂盆草提取物；(2)提取小檗碱提取物；(3)小檗碱提取物与垂盆草提取液按比例混合，加防冻液甘油、防腐剂乙醇、水，超声制成杀菌剂。本发明的防治桃树黑星病的天然杀菌剂原料来源丰富，成本低廉，采用纯天然的组份制成，不仅无毒无公害，且能够有效防治桃树黑星病。
【专利说明】
一种防治桃树黑星病的天然杀菌剂及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种防治桃树黑星病的天然杀菌剂及其制备方法，属于防治病虫害技 术领域。
【背景技术】
[0002] 近年来，桃黑星病越来越严重。桃黑星病危害非常大。症状主要表现在桃果实上， 严重影响了桃的品质，其次为害枝梢和叶片。果实发病，开始出现褐色小圆斑状以后逐渐扩 大为2~3毫米黑色点状，病斑多时汇集成片。由于病菌只为害病果皮，使果皮停止生长，并 木栓化，而果肉生长不受影响，所以，病情严重时经常发生裂果，使果实失去经济价值。枝梢 发病，初期产生褐色圆形病斑、后期病斑隆起、颜色加深，有时出现流胶现象，病菌只为害病 枝表层，第二年树液流动时会产生小黑点，即病菌的分生孢子，成为桃疮痂病的主要初侵染 源，危害严重。
[0003] 目前，为防治桃树黑星病通常使用化学农药杀菌剂，如己唑醇、醚菌酯、噻霉酮、戊 唑醇、代森锰锌等，但效果均不佳。由于大量使用化学农药而造成的环境污染问题日趋严 重。同时，采用化学农药杀菌剂，使病原菌菌种产生耐药性、抗药性，增加了防治的难度，甚 至造成防治失败。此外，化学农药因其不具有选择性，对有益的生物也会造成威胁。而且，很 多化学农药是不可降解或难于降解的，容易在动植物体内积累而造成污染物的富集。另外 对于桃树黑星病目前尚无有效的药物治疗。随着公众对"绿色食品"、"无公害食品"的要求 越来越高，市场对无污染、可自然降解的生态农药需求量也逐渐增多。在农药研制方面"回 归自然"及农药的"无公害化、农业零增长"，是社会和自然科学发展的必然趋势，因此新型 生物广谱杀菌剂有着广阔的开发应用前景。
[0004] 基于以上现有技术，由"北京市教育委员会市属高校创新能力提升计划项目"资助 完成本发明。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种绿色环保、杀菌效果好的防治桃树黑星病的天然杀菌 剂。
[0006] 为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
[0007] 一种防治桃树黑星病的天然杀菌剂，由小檗碱提取物6-10重量份、垂盆草提取物 1-5重量份、防冻液甘油、防腐剂乙醇、水，超声混合而成;该天然杀菌剂中小檗碱的含量为 5%〇
[0008] 优选地，所述小檗碱提取物中小檗碱的含量为70%以上。所述垂盆草提取物的浓 度为0 ? 1-0 ? 2g生药/mL。
[0009] 所述小檗碱提取物用黄连、黄柏、三颗针或十大功劳叶提取而得。
[0010] -种所述防治桃树黑星病的天然杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：
[0011] (1)将垂盆草粉碎，过20目筛，加入5-10倍重量的水，加热至80-90 °C煎煮2-4h，过 滤，收集滤液;滤渣加5-10倍重量50-75 %体积百分比的乙醇水溶液，加热至50-80 °C煎煮2-4h，过滤，收集滤液;以上滤液合并，浓缩；
[0012] (2)分别将黄连、黄柏、三颗针或十大功劳叶粉碎，过20目筛，取5-10倍重量的 0.2 %硫酸水溶液浸泡12-24h，加热至80-90 °C煎煮2-4h，过滤，收集滤液;滤液用石灰乳调 pH值至12，过滤，滤液用硫酸调pH值到2-3，相对于滤液，再加入5-20 %的氯化钠，使氯化钠 完全溶解，放置过夜，抽滤得小檗碱粗品；
[0013] (3)将小檗碱粗品加40-50倍重量的纯净水，加热至80-90°C回流煮沸30min，迅速 抽滤，收集滤液;不溶物再加30-40倍重量的纯净水，煮沸30min，过滤，合并滤液，滤液加硫 酸调pH为1_2，得小檗喊提取物；
[0014] (4)小檗碱提取物与垂盆草提取液按比例混合，加防冻液甘油、防腐剂乙醇、水，超 声制成杀菌剂。
[0015] 在所述步骤(4)中，超声功率为450w，超声处理时间为20-30min。
[0016] 本发明还提供所述天然杀菌剂在防治桃树黑星病中的应用，具体为:将防治桃树 黑星病的天然杀菌剂用500-1200倍量水稀释，4月初-7月初，每月喷洒1-2次，可用于有效防 治桃树黑星病。
[0017]本发明的优点在于：
[0018] 小檗碱具有广谱杀菌效果，但小檗碱水溶性很差，在水中的溶解度仅为0.5 %。本 发明先制备成70%以上小檗碱提取物，再与垂盆草提取液混合，加辅料，超声，制备成5%小 檗碱杀菌剂。与低浓度小檗碱水剂(0.5%)比较，大大降低小檗碱水剂的运输成本。且本发 明的5%小檗碱水剂对桃树黑星病的防治效果达70%以上。
[0019] 本发明提供的防治桃树黑星病的天然杀菌剂原料来源丰富，成本低廉，采用纯天 然的组份制成，不仅无毒无公害，而且能够有效防治桃树黑星病。
【具体实施方式】
[0020] 以下通过具体实施例对本发明做进一步说明。
[0021] 实施例1
[0022] (1)将垂盆草1000g粉碎，过20目筛，加10kg水，加热至80°C煎煮2h，提取，过滤，滤 液收集。滤渣加5kg 50 %的乙醇水溶液，加热至50°C煎煮4h，得提取液。以上提取液合并，浓 缩至0. lg生药/mL。
[0023] (2)小檗碱用黄柏提取而得。黄柏2000g粉碎、过20目筛，取10kg0.2 %硫酸水溶液 浸泡12h，加热至80°C煎煮3h，提取，过滤，滤液收集。滤液用石灰乳调pH值至12,过滤，滤液 用硫酸调pH值到2，再加入10 %的氯化钠，使氯化钠完全溶解，放置过夜，抽滤得小檗碱粗品 800g〇
[0024] (3)将粗制小檗碱加3600mL纯净水，加热至90°C回流煮沸30min，迅速抽滤，收集滤 液。不溶物再加纯净水2000mL水，煮沸30min，滤过，合并滤液，加硫酸调pH为2，得小檗碱提 取物，高效液相色谱检测小檗碱含量达91.5%。
[0025] (4)小檗碱提取物150g与垂盆草提取液100mL，加防冻液甘油2mL、防腐剂95%乙醇 5mL，加水2180mL，450w超声30min，制备成5 %小檗碱水剂。
[0026] 实施例2
[0027] (1)将垂盆草lOOOg粉碎，过20目筛，加入8kg水，加热至90°C煎煮3h，提取，过滤，滤 液收集。滤渣加6kg75 %的乙醇水溶液，加热至70 °C煎煮4h，得提取液。以上提取液合并，浓 缩至0.15g生药/mL。
[0028] (2)小檗碱用黄连提取而得。黄连2000g粉碎、过20目筛，取10kg0.2 %硫酸水溶液 浸泡24h，加热至90 °C煎煮2.5h，提取，过滤，滤液收集。滤液用石灰乳调pH值至12，过滤，滤 液用硫酸调pH值到2.5，再加入20 %的氯化钠，使氯化钠完全溶解，放置过夜，抽滤得小檗碱 粗品930g。
[0029] (3)将粗制小檗碱加5000mL纯净水，加热至85°C回流煮沸30min，迅速抽滤，收集滤 液。不溶物再加纯净水3100mL水，煮沸30min，滤过，合并滤液，加硫酸调pH为2，得小檗碱提 取物，高效液相色谱检测小檗碱含量达85.5%。
[0030] (4)小檗碱提取物150g与垂盆草提取液100mL，加防冻液甘油5mL、防腐剂95%乙醇 10mL，加水2020mL，450w超声30min，制备成5 %小檗碱水剂。
[0031] 实施例3
[0032] (1)将垂盆草1000g粉碎，过20目筛，加入5kg水，加热至85°C煎煮2 ? 5h，提取，过滤， 滤液收集。滤渣加5.5kg 60%的乙醇水溶液，加热至80°C煎煮3h，得提取液。以上提取液合 并，浓缩至0.2g生药/mL。
[0033] (2)小檗碱用十大功劳叶提取而得。十大功劳叶2000g粉碎、过20目筛，取 20kg0.2 %硫酸水溶液浸泡24h，加热至80°C煎煮2.5h，提取，过滤，滤液收集。滤液用石灰乳 调pH值至12,过滤，滤液用硫酸调pH值到3,再加入5%的氯化钠，使氯化钠完全溶解，放置过 夜，抽滤得小檗碱粗品652g。
[0034] (3)将粗制小檗碱加4000mL纯净水，加热至80°C回流煮沸30min，迅速抽滤，收集滤 液。不溶物再加纯净水2600mL水，煮沸30min，滤过，合并滤液，加硫酸调pH为2，得小檗碱提 取物，高效液相色谱检测小檗碱含量达70.8%。
[0035] (4)小檗碱提取物150g与垂盆草提取液100mL，加防冻液甘油5mL、防腐剂95%乙醇 10mL，加水1650mL，450w超声30min，制备成5 %小檗碱水剂。
[0036] 实施例4
[0037] 试验在北京市平谷区峨眉山镇进行。共设5个药剂处理，分别为本发明实施例2制 备的5 %小檗碱水剂1200倍液、900倍液、600倍液、80 %代森锰锌可湿性粉剂800倍液、空白 对照(CK)。以2株树为1个试验小区，3次重复。小区采取完全随机排列。分别于2015年4月1 日、5月2日、5月17日、6月2日、7月1日进行药剂处理，共喷药5次。7月28日，在每株试验树的 东、西、南、北、中5点随果调查，每个点调查20个果，按病情对果分级，记录各级果数量。0叶 片上无病斑;〇级：果实上无病斑；1级：每个果上有病斑1~2个;3级：每个果上有病斑3~4 个;5级:每个果上有病斑5~6个;7级:每个果上有病斑7~10个，或部分病斑相连占果面积 1/5左右，9级:每个果上有病斑10个以上，或病斑相连占果面积1/4以上。
[0038]药效计算方法如下。
[0041 ] 表1为5%小檗碱水剂防治桃黑星病结果。结果表明，5%小檗碱水剂600-1200倍液 对桃果实黑星病有较好的防治效果，无药害发生，对有益生物无不良影响。5%小檗碱水剂 600-900倍液对桃果实黑星病防效好于对照药剂80 %代森锰锌800倍液，或与之无显著差 异。
[0042]表1 5%小檗碱水剂防治桃黑星病结果
【主权项】
1. 一种防治桃树黑星病的天然杀菌剂，其特征在于：由小檗碱提取物6-10重量份、垂盆 草提取物1-5重量份、防冻液甘油、防腐剂乙醇、水，超声混合而成;该天然杀菌剂中小檗碱 的含量为5%。2. 根据权利要求1所述的防治桃树黑星病的天然杀菌剂，其特征在于:所述小檗碱提取 物中小檗碱的含量为70%以上。3. 根据权利要求1或2所述的防治桃树黑星病的天然杀菌剂，其特征在于:所述垂盆草 提取物的浓度为〇. 1-0.2g生药/mL。4. 根据权利要求1或2所述的防治桃树黑星病的天然杀菌剂，其特征在于:所述小檗碱 提取物用黄连、黄柏、三颗针或十大功劳叶提取而得。5. -种权利要求1-4中任一项所述的防治桃树黑星病的天然杀菌剂的制备方法，其特 征在于:包括以下步骤： (1)将垂盆草粉碎，过20目筛，加入5-10倍重量的水，加热至80-90°C煎煮2-4h，过滤，收 集滤液;滤渣加5-10倍重量50-75 %体积百分比的乙醇水溶液，加热至50-80 °C煎煮2-4h，过 滤，收集滤液;以上滤液合并，浓缩； ⑵分别将黄连、黄柏、三颗针或十大功劳叶粉碎，过20目筛，取5-10倍重量的0.2%硫 酸水溶液浸泡12_24h，加热至80-90°C煎煮2-4h，过滤，收集滤液;滤液用石灰乳调pH值至 12，过滤，滤液用硫酸调pH值到2-3，相对于滤液，再加入5-20 %的氯化钠，使氯化钠完全溶 解，放置过夜，抽滤得小檗碱粗品； (3) 将小檗碱粗品加40-50倍重量的纯净水，加热至80-90°C回流煮沸30min，迅速抽滤， 收集滤液;不溶物再加30-40倍重量的纯净水，煮沸30min，过滤，合并滤液，滤液加硫酸调pH 为卜2，得小檗喊提取物； (4) 小檗碱提取物与垂盆草提取液按比例混合，加防冻液甘油、防腐剂乙醇、水，超声制 成杀菌剂。6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(4)中，超声功率为450w，超 声处理时间为20-30min。7. -种权利要求1所述的天然杀菌剂在防治桃树黑星病中的应用，其特征在于:将防治 桃树黑星病的天然杀菌剂用500-1200倍量水稀释，4月初-7月初，每月喷洒1-2次。
【文档编号】A01P3/00GK105851066SQ201610288872
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月4日
【发明人】葛喜珍, 尹鸣, 尹一鸣, 田平芳, 刘杨平, 缪刚, 彭枢才
【申请人】北京联合大学