茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途及浸种液、抗盐方法
【专利摘要】本发明公开了茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途及浸种液、抗盐方法，在盐渍化环境中，小麦幼苗生长至10cm时，利用浸种液对小麦幼苗进行浇灌；抗盐方法：1)将小麦种子消毒；2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；3)对小麦种子进行催芽；4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行浇灌；所述浸种液中含有茶多酚，茶多酚的含量为10～40μg/mL；茶多酚能够明显延缓盐胁迫下小麦幼苗叶片叶绿素的降解，提高CAT、POD活性和脯氨酸含量，降低膜脂过氧化产物MDA的积累，最终有效地提高小麦幼苗的抗盐胁迫能力。
【专利说明】
茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途及浸种液、抗盐方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途。本发明还涉及含有茶多酚的浸种液，以及采用上述浸种液诱导小麦幼苗抗盐的方法。【背景技术】
[0002]茶多酚又名茶单宁、茶鞣质，是茶叶中所含的一类多羟基酚类化合物的总称，简称为TP。其主要成分包括儿茶素类、黄酮、黄酮醇类、花青素类、酚酸及缩酚酸类，其中儿茶素类约占茶多酚总量的65 %_80%，包括四种形式的儿茶素:表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表儿茶素(EC)，儿茶素类化合物在B环和C环上的酸性酚羟基具有很强的供氢能力，能中断自动氧化成氢过氧化物的连锁反应，从而阻断氧化过程。体外试验证明茶多酚能清除0-2和? 0H等自由基[1]，具有较强的抗氧化活性，能提高小鼠体内超氧化物歧化酶(S0D)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH2PX)活力， 降低过氧化脂质(LP0)和脂褐素含量，并能延长家蝇寿命。茶多酚在动物体上的研究成为科学界的一大热点，但其在植物体上的应用却很少。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供茶多酚的一种新用途，具体是茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途。同时，还提供含有茶多酚的浸种液，以及采用上述浸种液诱导小麦幼苗抗盐的方法。 [〇〇〇4]为了达到上述的技术目的，本发明的技术方案是:
[0005]茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途，在盐渍化环境中，小麦幼苗生长至10cm时，利用浸种液对小麦幼苗进行浇灌，浸种液中含有茶多酚，茶多酚的含量为10?40yg/mL。
[0006]—种促进小麦幼苗抗盐的浸种液，所述浸种液中含有茶多酚，茶多酚的含量为10 ?40iig/mL〇
[0007]—种利用茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的方法，包括以下步骤:[00〇8](1)将小麦种子消毒；
[0009](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0010](3)对小麦种子进行催芽；
[0011](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行浇灌;所述浸种液中含有茶多酸，茶多酸的含量为10?40lig/mL。
[0012]所述浸种液中茶多酚的含量优选为20yg/mL。
[0013]本发明中，茶多酚能够明显延缓盐胁迫下小麦幼苗叶片叶绿素的降解，提高CAT、 POD活性和脯氨酸含量，降低膜脂过氧化产物MDA的积累，最终有效地提高小麦幼苗的抗盐胁迫能力。
[0014]但是，在没有(或含量很低时)盐胁迫的情况下，加入茶多酚会降低蛋白浓度以及抗氧化酶(S0D、P0D和CAT)的活性，对小麦幼苗造成一定的影响。为了解决这个问题，浸种液中加入聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸种液的4?6%(以浸种液质量为基准)，十三烷醇聚醚-6含量占浸种液的1?2% (以浸种液质量为基准)。 十三烷醇聚醚-6可适当改变PH值，聚二甲基硅氧烷则利用其疏水等特性，在没有铬胁迫的情况下，消除茶多酚的影响，不会降低蛋白浓度以及抗氧化酶(SOD、POD和CAT)的活性。【附图说明】
[0015]图1为茶多酚(TP)对盐胁迫下小麦幼苗叶绿素含量的影响。
[0016]图2为TP对盐胁迫下小麦幼苗脯氨酸含量的影响。[〇〇17]图3为TP对盐胁迫下小麦幼苗丙二醛含量含量的影响。[〇〇18]图4为TP对盐胁迫下小麦幼苗超氧阴离子含量的影响。[〇〇19]图5为TP对盐胁迫下小麦幼苗过氧化氢酶活力影响。[〇〇2〇]图6为TP对盐胁迫下小麦幼苗过氧化物酶活力影响。【具体实施方式】[〇〇21]下面结合附图和【具体实施方式】对本发明作进一步详细的说明。
[0022] 小麦(Triticumaestivum L.)为早红1号。茶多?KTP)由无锡太阳绿宝科技有限公司提供，含量>98 %。聚二甲基硅氧烷含量和十三烷醇聚醚-6由上海麦克林生化科技有限公司提供。[〇〇23] 实施例1[〇〇24](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，
[0025](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；[0〇26](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；
[0027](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用蒸馏水连续三天对小麦幼苗进行饶灌。[〇〇28]实施例2[〇〇29](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，[〇〇3〇](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0031](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇32](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有200mm〇l/L NaCl。
[0033]实施例3[〇〇34](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，
[0035](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0036](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇37](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl为基准，浸种液中含有10yg/ml茶多酚。
[0038]实施例4[〇〇39](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，[〇〇4〇](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0041](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇42](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl为基准，浸种液中含有20yg/ml茶多酚。
[0043]实施例5[〇〇44](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，
[0045](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0046](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇47](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl为基准，浸种液中含有40yg/ml茶多酚。
[0048]实施例6[〇〇49](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，[〇〇5〇](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0051](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇52](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有200mmol/L NaCl，以NaCl为基准，浸种液中含有100yg/ml茶多酚。
[0053]实施例7[〇〇54](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，
[0055](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0056](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇57](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有40yg/ml茶多酚。
[0058]实施例8[〇〇59](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，[〇〇6〇](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0061](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇62](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有20yg/ml茶多酚，浸种液中还加入聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,聚二甲基硅氧烷含量占浸种液的4 % (以浸种液质量为基准)，十三烷醇聚醚-6含量占浸种液的2 % (以浸种液质量为基准)。
[0063]实施例9[〇〇64](1)选取饱满、整齐一致的种子用0.1 %高锰酸钾消毒20min，
[0065](2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；
[0066](3)将小麦种子在培养皿中，在温度25°C，自然光照下对小麦种子进行催芽；[0〇67](4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行饶灌;所述浸种液中含有20yg/ml茶多酚，浸种液中还加入聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,聚二甲基硅氧烷含量占浸种液的6 % (以浸种液质量为基准)，十三烷醇聚醚-6含量占浸种液的1 % (以浸种液质量为基准)。[〇〇68]实施例1是在正常状态下，即没有盐胁迫情况下，对应说明书附图中的CK1。实施例 2为无茶多酚诱导下的盐胁迫状态，对应说明书附图中的CK2。实施例3-6为在茶多酚诱导下的盐胁迫状态。实施例7为存在茶多酚诱导，但无盐胁迫状态。实施例8、9为浸种液中含有聚二甲基硅氧烷、十三烷醇聚醚-6、茶多酚诱导，但无盐胁迫状态。[0〇69 ]上述实施例获得幼苗测定方法:
[0070]叶绿素含量测定按张志良等的方法测定。
[0071]蛋白质含量测定按张志良等的方法测定。
[0072]脯氨酸含量的测定采用茚三酮比色法。[〇〇73] 丙二醛含量的测定采用硫代巴比妥酸显色法。
[0074]从图1可以看出，茶多酚抑制盐胁迫下叶绿素降解。实施例7中存在茶多酚诱导，但无盐胁迫状态下，叶绿素降解正常，在实施例8、9状态下，叶绿素降解也无差别。
[0075]从图2可以看出，茶多酚可以促进盐胁迫下小麦幼苗中脯氨酸的生成。实施例7中存在茶多酚诱导，但无盐胁迫状态下，脯氨酸含量下降12%，但在实施例8、9状态下，脯氨酸含量趋于正常状态，基本上无差别。[〇〇76]从图3可以看出，茶多酚处理明显降低小麦幼苗中丙二醛的含量。实施例7中存在茶多酚诱导，但无盐胁迫状态下，丙二醛的含量正常，在实施例8、9状态下，丙二醛的含量也趋于正常状态。
[0077]从图4可以看出，茶多酚对清除植物体内超氧阴离子的含量有良好的效果。实施例 7中存在茶多酚诱导，但无盐胁迫状态下，超氧阴离子的含量与正常状态下相比较提高4%， 在实施例8、9状态下，超氧阴离子的含量趋于正常状态。
[0078]从图5、6可以看出，茶多酚能提高盐胁迫条件下小麦幼苗叶片过氧化氢酶和过氧化物酶活力。实施例7中存在茶多酚诱导，但无盐胁迫状态下，过氧化氢酶和过氧化物酶活性与正常状态下相比较，分别下降了 13%和17%，在实施例8、9状态下，过氧化氢酶和过氧化物酶活性趋于正常状态。
[0079]上述实施例不以任何方式限制本发明，凡是采用等同替换或等效变换的方式获得的技术方案均落在本发明的保护范围内。
【主权项】
1.茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途，其特征在于:在盐渍化环境中，小麦幼苗生长至 10cm时，利用浸种液对小麦幼苗进行饶灌，浸种液中含有茶多酸，茶多酸的含量为10?40y g/mL〇2.根据权利要求1所述的茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途，其特征在于:所述浸种液 中茶多酚的含量为20yg/mL。3.根据权利要求1或2所述的茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的新用途，其特征在于:所述浸 种液中含有聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸种液的4? 6%，十三烷醇聚醚-6含量占浸种液的1?2%。4.一种促进小麦幼苗抗盐的浸种液，其特征在于:所述浸种液中含有茶多酚，茶多酚的 含量为10?40yg/mL。5.根据权利要求4所述的一种促进小麦幼苗抗盐的浸种液，其特征在于:所述浸种液中 茶多酚的含量为20yg/mL。6.根据权利要求4或5所述的一种促进小麦幼苗抗盐的浸种液，其特征在于:所述浸种 液中含有聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸种液的4? 6%，十三烷醇聚醚-6含量占浸种液的1?2%。7.—种利用茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的方法，其特征在于包括以下步骤:(1)将小麦种子消毒；(2)将消毒后的小麦种子在蒸馏水中反复冲洗干净；(3)对小麦种子进行催芽；(4)在小麦幼苗生长至10cm高度时，用浸种液连续三天对小麦幼苗进行浇灌;所述浸种 液中含有茶多酚，茶多酚的含量为10?4〇yg/mL。8.根据权利要求7所述的一种利用茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的方法，其特征在于:所述 浸种液中茶多酚的含量为20yg/mL。9.根据权利要求7或8所述的一种利用茶多酚诱导小麦幼苗抗盐的方法，其特征在于: 所述浸种液中含有聚二甲基硅氧烷和十三烷醇聚醚-6,所述聚二甲基硅氧烷含量占浸种液 的4?6%，十三烷醇聚醚-6含量占浸种液的1?2%。
【文档编号】A01N25/32GK105941400SQ201610334754
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年5月19日
【发明人】罗兵, 孙海燕, 汤俊, 孙惠娟
【申请人】常熟理工学院