一种蓝莓继代培养基及其配制方法
【专利摘要】本发明公开了一种蓝莓继代培养基，包含大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、钙盐母液、有机物母液和激素母液；每1L蓝莓培养基中所述有机物母液包括肌醇100 mg/L、烟酸1 mg/L、维生素B11 mg/L、维生素B62mg/L、维生素C2mg/L，所述激素包括玉米素4 mg/L。本发明培养基中加入了植物生长激素玉米素，能够使蓝莓组织培养的植株长势良好，分株多，并且容易生根，有利于蓝莓培养后移栽进入田间，提高蓝莓在田间的成活率；同时辅以维生素C的用量配合，既能够消除玉米素对蓝莓造成的玻璃化影响，又能够促进蓝莓植株更好的生长，培苗生长的更加健壮，不容易褐化死亡，叶色更绿，叶片平展。
【专利说明】
一种蓝莓继代培养基及其配制方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种培养基，具体涉及一种继代培养基。
【背景技术】
[0002] 蓝莓是一种营养价值非常高的水果，果肉内富含丰富的维生素、蛋白质、膳食纤 维、脂肪和矿物质等营养元素，远高于其他水果富含的营养，其中蓝莓中独特的花青苷色素 在众水果中比重是非常的高。而在蓝莓的栽培中，对土壤的要求比较高，土壤有机质含量和 pH值是蓝莓是否栽培成活的重要因素，一般要求有机质含量5%，且pH值4.0~5.5的土壤。 目前蓝莓种苗大量繁育都使用组织培养的方法，同样在组织培养中，蓝莓对培养基的要求 也是比较高的，要求高有机质含量和弱酸性的pH值。
[0003] 植物组织培养中常用的培养基是MS培养基，而MS培养基特点是无机盐和离子浓度 较高，是较稳定的离子平衡溶液。WPM培养基是在目前在木本植物培养时经常使用的培养 基。但是在蓝莓的组织培养中，无论用MS还是WPM培养基，效果都不是很好。虽然目前报道的 许多蓝莓培养使用的是WPM培养基，但是都是针对某一个蓝莓品种而言，因此，已报道的培 养基配方在多数蓝莓品种中都不通用。
[0004] 玉米素一般用于组织培养过程中促进细胞分裂，促进植株进行分株，但是玉米素 使用的浓度过高，或者是在继代过程中玉米素使用次数太平繁，容易造成蓝莓植株的玻璃 化，呈现玻璃化的蓝莓苗，其茎、叶表面无蜡质，体内的极性化合物水平较高，细胞持水力 差，蒸腾作用强，无法进行正常移栽，造成人力、物力、财力的极大浪费，是目前蓝莓组织培 养中组培苗生产的最大障碍。而在不使用玉米素或者是玉米素浓度过低的情况下，蓝莓植 株是不能够正常生长的，更严重时会使蓝莓植株死亡。因此通过降低玉米素浓度或者不加 玉米素来解决蓝莓的玻璃化现象是不可行的。
【发明内容】
[0005] 发明目的：本发明的目的在于为了克服现有技术的不足，提供一种蓝莓继代培养 基及其配制方法，以适应不同蓝莓品种的培育需要，保证生长良好。
[0006] 技术方案：本发明所述的一种蓝莓继代培养基，包含大量元素母液、微量元素母 液、铁盐母液、钙盐母液、有机物母液和激素母液;每1L蓝莓培养基中所述有机物母液包括 肌醇l〇〇mg/L、烟酸lmg/L、维生素 Bdmg/L、维生素 B62mg/L、维生素 C2mg/L，所述激素包括玉 米素4mg/L。
[0007] 进一步，所述大量元素母液包括硝酸钾400mg/L、硫酸钾900mg/L、七水合硫酸镁 370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L，微量元素包括四水合硫酸锰20mg/L、七水合硫酸锌8 · 6mg/L、 硼酸6 · 2mg/L、五水合硫酸铜0 · 05mg/L、二水合钼酸钠0 · 25mg/L。
[0008] 进一步，所述铁盐母液包括乙二胺邻二羟基乙酸铁l〇mg/L。
[0009] 进一步，所述|丐盐母液包括水合氯化lilOOmg/L、四水硝酸|丐60〇11^/1。
[0010] 进一步，将每一种母液浓缩配制成浓缩液，冷藏备用，配置培养基时每升培养基添 加蔗糖30克，琼脂粉6克，pH值调节至5.2。
[0011]有益效果：1、本发明培养基中加入了植物生长激素玉米素，能够使蓝莓组织培养 的植株长势良好，分株多，并且容易生根，有利于蓝莓培养后移栽进入田间，提高蓝莓在田 间的成活率；同时辅以维生素 C的用量配合，既能够消除玉米素对蓝莓造成的玻璃化影响， 又能够促进蓝莓植株更好的生长，培苗生长的更加健壮，不容易褐化死亡，叶色更绿，叶片 平展；
[0012] 2、配方不使用硝酸铵，使用目前容易购买到的硫酸铵和尿素来替代，解决了硝酸 铵购买难的问题；
[0013] 3、由于使用了硫酸铵，因此硫酸根的浓度增加，因此将传统MS培养基中的硫酸亚 铁和乙二胺四乙酸二钠配制的铁盐换成Fe-EDDHA乙二胺邻二羟基乙酸铁，试验效果证明植 物生长更好；
[0014] 4、去掉了MS培养基中的氯化钴和硫酸铜，因为这两个物质用量及其少，配制过程 中由于不好称量，常常需要先配置这两个物质的浓缩液，在按照一定浓度添加到母液中，费 时费力，实验发现增加两个物质对植物生长没有影响，因此去掉，简化配制流程。
【具体实施方式】
[0015] 下面对本发明技术方案进行详细说明，但是本发明的保护范围不局限于所述实施 例。
[0016] 实施例：以配置1升的蓝莓继代培养基为例：
[0017] 第一步，配置1升大量元素，配置成25倍的浓缩溶液，为母液一。
[0018]称取:KN〇3硝酸钾 10g、K2S〇4硫酸钾22.5g、MgS〇4 · 7H20七水合硫酸镁9.25g、KH2P〇4 磷酸二氢钾4.25g，溶解于1升蒸馏水中。
[0019]第二步，配置200豪升微量元素，配置成1000倍的浓缩溶液，为母液二。
[0020] 称取:MnS〇4 · 4H20四水合硫酸锰4g、ZnS〇4 · 7H20七水合硫酸锌1.72g、H3B03硼酸 1.24g、CuS〇4 · 5H20五水合硫酸铜0.01g、NaMo〇4 · 2H20二水合钼酸钠0.05g，溶解于200豪升 蒸馏水中。
[0021] 第三步，配置500豪升铁盐，配置成200倍的浓缩溶液，为母液三。
[0022] 称取:Fe-EDDHA乙二胺邻二羟基乙酸铁lg，溶解于500豪升蒸馏水中。
[0023] 第四步，配置500豪升钙盐，配置成50倍的浓缩溶液，为母液四。
[0024] 称取:CaCl2 · 2H20二水合氯化钙2.5g，Ca(N03)2 · 4H20四水硝酸钙15g，溶解于500 豪升蒸馏水中。
[0025] 第五步，配置500豪升有机溶液，配置成200倍的浓缩溶液，为母液五。
[0026] 称取:肌醇10g、烟酸O.lg、维生素 m O.lg、维生素 B6 0.2g、维生素 C0.2g溶解于500 豪升蒸馏水中。
[0027] 第六步，配制100mL浓度为lmg/L的玉米素溶液，为母液六。
[0028] 称取:0. lg玉米素，溶解于100mL蒸馏水中。
[0029]母液配好后放4度冰箱保存备用。配置培养基时，每一升培养基加母液一 50mL，母 液二lmL，母液三5mL，母液四20mL，母液五5mL，母液六4mL。
[0030]上述培养基的配制方法为，将每种母液混匀后添加6g琼脂粉和30g蔗糖混匀，pH值 调节至5.2，定容至一升，分装到培养基适用容器中备用。
[0031] 下表是不同蓝莓品种在不同培养基中生长30天以后的生长状态统计：
[0032]
[0033]从表中能够看出，无论是MS培养基还是WPM培养基培养的蓝莓，在6个不同品种中， 株高、增值系数、以及成活率都明显低于本发明的培养基。因此，本发明的培养基能够促进 蓝莓生长，而且在多个品种中都有良好的作用。
[0034] 另外，本实施例的玉米素与维生素C的浓度能够有效抑制蓝莓苗的玻璃化，将本实 施例的浓度配比与其他浓度配比进行比较，如下表所示，可发现本发明玉米素和维生素 C的 用量配合能够在促进植株生长的同时，完全杜绝蓝莓的玻璃化现象，故培苗更加健壮。
[0035]
【主权项】
1. 一种蓝莓继代培养基，其特征在于:包含大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、钙 盐母液、有机物母液和激素母液;每1L蓝莓培养基中所述有机物母液包括肌醇100 mg/L、烟 酸1 mg/L、维生素 Bd mg/L、维生素 B62mg/L、维生素 C2mg/L，所述激素包括玉米素4 mg/L。2. 根据权利要求1所述的蓝莓继代培养基，其特征在于:所述大量元素母液包括硝酸钾 400 mg/L、硫酸钾900 mg/L、七水合硫酸镁370 mg/L、磷酸二氢钾170 mg/L。3. 根据权利要求1所述的蓝莓继代培养基，其特征在于:所述微量元素母液包括四水合 硫酸猛20 mg/L、七水合硫酸锌8.6 mg/L、硼酸6.2 mg/L、五水合硫酸铜0.05 mg/L、二水合 钼酸钠0.25 mg/L。4. 根据权利要求1所述的蓝莓继代培养基，其特征在于:所述铁盐母液包括乙二胺邻二 羟基乙酸铁10 mg/L。5. 根据权利要求1所述的蓝莓继代培养基，其特征在于:所述钙盐母液包括水合氯化钙 100 mg/L、四水硝酸|丐600 mg/L。6. 如权利要求1所述的蓝莓继代培养基的制备方法，其特征在于:将每一种母液浓缩配 制成浓缩液，冷藏备用，配置培养基时每升培养基添加蔗糖30克，琼脂粉6克，pH值调节至 5.2〇
【文档编号】A01H4/00GK106035084SQ201610393651
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月3日
【发明人】王媛花, 颜志明, 冯英娜, 王全智
【申请人】江苏农林职业技术学院